Использование 18F-ФДГ ПЭТ/КТ и количественных гистология для измерения динамического изменения в метаболизме глюкозы в моделях мыши рака легких

Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы в области метаболизма рака и терапии рака. Например, определение новых методов лечения, которые могут модулировать рост опухоли, а также метаболизм опухоли. Основное преимущество этого метода заключается в том, что мы можем выполнять неинвазивную визуализацию опухолей легких по мере их развития с течением времени.

Это важно, потому что мы можем лучше понять, как метаболизм опухоли реагирует на различные терапевтические вмешательства в режиме реального времени. Демонстрировать эти процедуры будет ученый из Центра доклинической визуализации Института Крампа. Внимание: используйте защитное снаряжение и соблюдайте все применимые нормативные процедуры при обращении с радиоактивностью.

Начните с нагрева клетки мышей, которые будут визуализированы при температуре 37 градусов Цельсия, за час до инъекции фтордезоксиглюкозы, меченной фтором 18. Это снижает потребление бурого жира индикатором. Взвесьте первую мышь и запишите ее вес.

После обезболивания мыши с помощью одобренного в учреждении метода проверьте глубину анестезии, зажав палец ноги. Если реакции не наблюдается, продолжайте процедуру, нанося офтальмологическую мазь на глаза, чтобы предотвратить сухость во время анестезии. Тщательно разведите меченный фтордезоксиглюкозой фтор-18 с радиоактивным периодом полураспада 109 минут, в стерильном физиологическом растворе при скорректированной инъекционной концентрации от 70 до 75 микрокюри на 100 микролитров.

Затем наберите 100 микролитров в инсулиновый шприц с помощью иглы 28 калибра и измерьте дозу радиоактивности с помощью калибратора дозы. Запишите измерение и время измерения, чтобы определить поправку на затухание. Поместите шприц в держатель для свинцового шприца.

Для инъекции сначала прогрейте хвост в течение 1-2 минут марлей, смоченной в теплой воде. А затем протрите 70% изопропанолом, чтобы расширить хвостовую вену непосредственно перед инъекцией. Ввести весь объем в шприце с помощью болюсной инъекции через боковую хвостовую вену.

И записывать время инъекции. Затем измерьте оставшуюся дозу в шприце с помощью калибратора дозы и запишите измерение и время. Наконец, поместите введенную мышь в анестезиологическую камеру с 1,5–2% изофлураном при температуре 37 градусов Цельсия, чтобы зонд мог распределяться через системный кровоток мыши в течение одного часа перед ПЭТ-сканированием.

Через 1 час поместите первую мышь в камеру визуализации, установленную при температуре 37 градусов Цельсия, под анестезию изофлураном конуса носа. И закрепите его конечности на месте с помощью медицинской ленты в положении лежа на спине. Поместите камеру визуализации в сканер ПЭТ КТ и получите снимки ПЭТ и КТ, как описано в руководстве по использованию сканера ПЭТ КТ.

После завершения ПЭТ-КТ извлеките мышь из камеры визуализации и дайте ей восстановиться в клетке. Импортируйте восстановленные изображения ПЭТ КТ в программное обеспечение AMOD, нажав «Файл», а затем «Импортировать файл». И выбор соответствующего DICOM-файла.

Щелкните правой кнопкой мыши по набору данных PET. И найдите поле процента введенной дозы на грамм на вкладке основной информации. Введите процент вводимой дозы на грамм, о котором сообщалось ранее.

Нарисуйте интересующие области опухоли и нормальных тканей, нажав «Редактировать», а затем «Добавить ROI». Выберите форму для ROI и присвойте ему имя. Нарисуйте ROI для опухолей и тканей и отрегулируйте их размеры, чтобы покрыть интересующую ткань по всем трем осям.

Фтордезоксиглюкозная ПЭТ-визуализация с помощью фтора-18 проводилась на мышах с опухолями с коммутациями KRAS и LKB1, называемых мышами KL. Опухоли у этих мышей были высокогликолитическими. О чем свидетельствует повышенное потребление F-FDG.

В соответствии с ранее опубликованными исследованиями. Резекция целых легких выявила наличие нескольких опухолей, показанных здесь в поперечном, сагиттальном и корональном видах. Пять долей легкого мыши были окрашены H&E для визуализации морфологии ткани.

Доли 1-5 окрашивали для транспортера глюкозы 1. Экспрессия и локализация Glut1 на плазматической мембране опухолевых клеток прямо коррелируют со стандартным значением поглощения фторсодержащей 18, меченной фтордезоксиглюкозой. При выполнении этой процедуры важно помнить, что биораспределение ФДГ зависит от условий обращения с животными.

Такие как обезболивание, согревание и голодание. Чтобы обеспечить воспроизводимость, эти шаги должны выполняться последовательно. Следуя этой общей процедуре, другие следы ПЭТ могут быть использованы для измерения различных биологических процессов in vivo, таких как метаболизм аминокислот и взаимодействия рецептор-лиганд.