Стратегий выборки и обработки образцов ткани биобанка из свинины биомедицинской модели

Демонстрируются практического применения и производительности методов для генерации образцы представительной ткани свинину животных моделей для широкого спектра течению анализов в биобанке проектов, включая volumetry, систематического случайной выборки, и дифференциальный обработка образцов ткани для качественных и количественных анализов молекулярных и морфологических типов.

В этом видео демонстрируются два ключевых метода отбора проб и обработки образцов тканей свиней из биобанков. Метод погружения надежно оценивает общий объем органов и тканей, а метод ориентатора генерирует случайные изотропные срезы ткани для объективной оценки количественных морфологических параметров. Основное преимущество метода погружения для определения плотности тканей заключается в том, что его можно применять к любому типу ткани и что он дает надежные результаты как для маленьких, так и для больших образцов.

Преимущества методики ориентатора заключаются в том, что она отличается высокой эффективностью, а также работает с большими образцами тканей. Для начала волюметрии для большого органа иссекайте из органа кусок ткани соответствующего размера. Тщательно промокните образец бумажным полотенцем, чтобы удалить лишнюю кровь и тканевую жидкость.

Затем взвесьте образец на прецизионных весах и запишите вес образца. Добавьте 0,9% физиологического раствора в стакан подходящего размера. Не заполняйте стакан полностью, чтобы предотвратить переполнение во время всплытия тканей.

Поместите стакан на весы, затем погрузите щипцы или самодельный держатель для образцов в физиологический раствор, пока метка на щипцах или держателе для образцов не достигнет жидкости. Далее сбросьте отображение шкалы в ноль. Осторожно приложите образец ткани к щипцам или держателю для образцов и полностью погрузите образец в физиологический раствор до достижения отмеченного положения.

Для записи надежных измерений плотности важно убедиться, что образец полностью погружен в воду, и избегать любого контакта погруженного образца с внутренними стенками или дном стакана. Удерживая образец в нужном положении, запишите вес, отображаемый на весах. Используйте это измерение и плотность физиологического раствора при комнатной температуре для расчета объема образца.

Затем рассчитайте плотность образца ткани из веса образца и его объема. Для крупных органов и тканей, таких как эта почка, выполните повторные измерения с несколькими образцами и рассчитайте среднюю плотность по одним измерениям. Для небольших образцов и небольших органов, измеряемых в целом, таких как гипофиз, повторите измерение три раза, прежде чем рассчитать среднюю плотность органов по одним значениям измерения.

Наконец, рассчитайте общий объем органа, ткани или компартмента органа по его весу и плотности. Поместите неподвижный образец ткани на отпечаток равноугольной окружности с одним краем, параллельным направлению от нуля до 180 градусов. Затем используйте таблицу случайных чисел для определения случайного угла.

Найдите соответствующие отметки в масштабе равноугольной окружности. С помощью этих меток разрежьте срез образца плоскостью сечения, ориентированной параллельно направлению случайного угла, указанного на шкале равноугольной окружности, и вертикалью к поверхности покоя образца. Поместите тканевый блок поверхностью сечения вниз на косинусный утяжеленный круг.

При этом край поверхности покоя располагают параллельно направлению «один к одному». Теперь разрежьте новый участок через образец под случайным углом, определенным с помощью таблицы случайных чисел. Результирующая плоскость сечения представляет собой изотропное равномерное случайное сечение.

В этой таблице показана репрезентативная плотность нескольких тканей и органов свиньи, определенная с помощью метода погружения. Большинство тканей свиньи демонстрируют значения плотности немного выше, чем тот, который относится к плотности воды. В то время как ткани, плавающие в солевом растворе, такие как жировая ткань, например, демонстрируют плотность ниже единицы.

На этом рисунке показаны четыре репрезентативных среза IUR миокарда левого желудочка свиньи, полученных с помощью ориентаторной техники. Обратите внимание на измененные углы резания в разных разделах IUR. После освоения техника погружения для определения плотности тканей может быть выполнена за несколько минут.

Если она выполнена правильно. Изотропные однородные случайные срезы ткани, полученные с помощью ориентаторного метода, пригодны для оценки любых количественных морфологических параметров с использованием соответствующих методов стереологического анализа. Цифровая музыка.