Расширение редактирования с Cas9 рибонуклеопротеида в различных клеток и организмов геном

37.3K просмотров

Цитируется: 45

09:51 мин.

25 мая 2018 г.

10.3791/57350-v

25 мая 2018 г.

37.3K просмотров

Behnom Farboud^*¹^,² , Erin Jarvis^*¹ , Theodore L. Roth^*³^,⁴^,⁵^,⁶ , Jiyung Shin^*¹^,³ , Jacob E. Corn¹^,³ , Alexander Marson³^,⁵^,⁶^,⁷^,⁸^,⁹ , Barbara J. Meyer¹^,² , Nipam H. Patel¹^,¹⁰ , Megan L. Hochstrasser³

¹Department of Molecular Cell Biology, University of California, Berkeley, ²Howard Hughes Medical Institute, University of California, Berkeley, ³Innovative Genomics Institute, University of California, Berkeley, ⁴Biomedical Sciences Graduate Program, University of California, San Francisco, ⁵Department of Microbiology and Immunology, University of California, San Francisco, ⁶Diabetes Center, University of California, San Francisco, ⁷Chan Zuckerberg Biohub, ⁸Department of Medicine, University of California, San Francisco, ⁹UCSF Helen Diller Family Comprehensive Cancer Center, University of California, San Francisco, ¹⁰Department of Integrative Biology, University of California, Berkeley

^* These authors contributed equally

Используя креплению Cas9 рибонуклеопротеида комплекс (RNP) является мощный метод для изменения генома точный и эффективный. Здесь мы подчеркиваем свою полезность в широком диапазоне клеток и организмов, включая первичных клеток человека и оба классических и новых модельных организмов.

Больше видео

РНП CRISPR-Cas9

редактирование генов

рибонуклеопротеиновый комплекс

дизайн гидовой РНК

протокол электропорации

редактирование Т-клеток

редактирование ГСК

микроинъекции C. elegans

инъекции эмбрионов Parhyale

анализ методом проточной цитометрии

Chapters in this video

0:04

Заголовок

1:09

Подготовка РНП для редактирования первичных клеток, подготовка гемопоэтических стволовых клеток/клеток-предшественников (ГСК/КП) и электропорация РНП

2:46

Микроинъекция РНП в гонады C. elegans и последующий уход

5:17

Микроинъекция РНП в эмбрионы P. hawaiensis и последующий уход

8:05

Результаты: оценка итогов редактирования генома

9:28

Заключение