Мыши модель частичной непроходимостью кишечника

Общая цель этой хирургической процедуры состоит в том, чтобы надежно и последовательно вызывать кишечные непроходимости у мышей, которые облегчают изучение молекулярных и фенотипических изменений в ткани желудочно-кишечного тракта, возникающих в ответ на непроходимость. Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы в области желудочно-кишечного тракта, связанные с клеточными механизмами, лежащими в основе фенотипических изменений, возникающих в результате кишечной непроходимости. Основные преимущества этого метода заключаются в том, что он надежен, воспроизводим и экономически эффективен.

Применение этой техники распространяется на терапию кишечной непроходимости, поскольку они имитируют фенотипические состояния, наблюдаемые при патологиях человека, вызванных кишечной непроходимостью. Эту процедуру будут демонстрировать Се Ын Ха, постдок, и Лай Вэй, аспирант, оба из нашей лаборатории. После подтверждения отсутствия реакции на защемление пальца ноги нанесите мазь на глаза животного и положите мышь на греющую подушечку.

Удалите волосы с живота с помощью крема для депиляции и очистите открытые участки кожи с помощью 70% этанола. Продезинфицируйте операционное место раствором повидон-йода и задрапируйте животное стерильной бумагой размером 25 на 50 сантиметров с отверстием 2,5 на 2,5 см для операционной области. Закрепите простыню стерильными полосками по границам отверстия и кожи и с помощью лезвия скальпеля номер 15 сделайте трехсантиметровый продольный разрез кожи.

С помощью щипцов и хирургических ножниц аккуратно отделите кожу от мышечно-мышечного слоя, не разрезая ткань, и найдите белую линию. Затем с помощью микрощипцов и ножниц разрежьте два сантиметра по белой линии, чтобы обнажить внутрибрюшинную полость и аккуратно расположить слепую кишку. С помощью микрощипцов медленно и осторожно переместите слепую кишку, проксимальный отдел ободочной кишки и подвздошную кишку из внутрибрюшинной полости на стерильную простыню и немедленно смочите кишечную ткань стерильной марлей, пропитанной физиологическим раствором.

Найдите брыжейку между подвздошной кишкой и проксимальным отделом ободочной кишки и сделайте разрез в один сантиметр в брыжейке параллельно и чуть ниже подвздошной кишки, стараясь не разрезать сосудистую систему. Разрежьте в продольном направлении, чтобы открыть брыжеечный сосуд, и с помощью микрощипцов откройте стерилизованное силиконовое кольцо соответствующего размера. Вставьте один конец кольца через разрез и приведите конец кольца в соприкосновение с первым концом, чтобы вернуть инструменту его первоначальную форму.

Убедитесь, что кольцо полностью окружает подвздошную кишку и закройте кольцо швом. Разрезы в брыжейке должны быть достаточно большими, чтобы в них поместилось кольцо, но достаточно маленькими, чтобы кровеносные сосуды не были разрезаны. Также убедитесь, что кольцо размещено на подвздошной кишке, а не на толстой кишке.

Осторожно верните кишечник в исходное анатомическое положение и с помощью рассасывающегося шва простым непрерывным швом закройте мышечно-перитонеальный слой по белой линии. Очистите кровотечение стерильной марлей, пропитанной физиологическим раствором, 0,9% и используйте новый нейлоновый шов и простой непрерывный шов, чтобы закрыть кожу. Затем дезинфицируют место раны повидон-йодом и вводят антибиотики перед помещением животного в утепляющие ворота с контролем до полного лежачего состояния.

В этом эксперименте тонкая кишка была частично заполнена и расширена через восемь дней после операции частичной обструкции и полностью заполнена и расширена через 13 дней после операции частичной обструкции по сравнению с контрольными животными, прооперированными бутафорией. Кроме того, образование фекальных гранул в толстой кишке у мышей на 8-й и 13-й день после операции частичной обструкции было снижено по сравнению с контрольными животными. Гладкомышечный слой подвздошной кишки чуть выше кольца был гипертрофирован через восемь дней после операции частичной обструкции, а дальнейшая гипертрофия наблюдалась на 13-й день.

Гладкомышечные клетки росли с прогрессивной скоростью во всех трех слоях ткани через 8 и 13 дней после операции частичной обструкции, как оценивалось с помощью иммунохимического анализа, в то время как интерстициальные клетки Кахаля дегенерировали во внутримышечных и межмышечных слоях. Субпопуляции альфа-положительных клеток рецептора фактора роста, полученные из тромбоцитов, также известные как альфа-клетки PDGFR, были динамически ремоделированы в межмышечных слоях мышей с частичной обструкцией, при этом рост, наблюдаемый через восемь дней после операции, дегенерировал к 13-му дню. Кроме того, нейрональные клетки также были значительно потеряны в межмышечных и внутримышечных областях мышей с частичной обструкцией на 8-й и 13-й день после операции.

После освоения эта техника должна быть завершена в течение 30 минут, чтобы обеспечить выживание мыши. При попытке этой процедуры важно быстро и деликатно обработать ткани. После этой процедуры могут быть выполнены другие методы, такие как тестирование желудочно-кишечного тракта, чтобы ответить на дополнительные вопросы о том, как непроходимость изменяет перистальтику кишечника.

После своего развития этот метод проложил путь исследователям в области исследований желудочно-кишечного тракта для изучения последствий кишечной непроходимости у мышей. После просмотра этого видео у вас должно сложиться хорошее представление о том, как быстро и правильно разместить кольцо вокруг подвздошной кишки мыши для создания кишечной частичной непроходимости. Не забывайте, что работа с хирургическими инструментами и иглами может быть чрезвычайно опасной, поэтому примите надлежащие меры предосторожности.

Также обязательно надевайте стерильные перчатки и практикуйте асептические техники во время выполнения этой процедуры.