Закрыт грудь модель побудить поперечной сужение аорты у мышей

Общая цель этой процедуры заключается в выполнении поперечного сужения аорты на закрытой модели грудной клетки мыши, индуцируя гипертрофию миокарда левого желудочка. Этот минимально инвазивный метод помогает уменьшить проблемы с дыханием и свести к минимуму воспалительную реакцию. Этот метод может помочь нам ответить на ключевые вопросы, в области иммунологии, например, на реакцию сердечной макрофагии на развитие гипертрофии левого желудочка.

Главное преимущество данной методики заключается в том, что грудная клетка остается неповрежденной, а значит травматизация сводится к минимуму. Поскольку пространства и дыхательные объемы адаптируются к весу тела, этот протокол можно использовать на мышах разного размера. Это также снижает операционную травматичность и уменьшает отклонение значений измерений.

После обезболивания мыши, в соответствии с текстовым протоколом, переместите мышь на операционный стол с регулируемой температурой и отсоедините носовой конус, который подключен к индукционной коробке для анестезии для поддержания наркоза. Капроновым швом зафиксируйте верхние резцы мыши. Прищипните хвост, чтобы обеспечить отсутствие рефлекса.

Используйте скотч для фиксации конечностей. После введения ректального зонда нанесите крем для депиляции на горло и верхнюю часть грудной клетки, в соответствии с инструкциями производителя, и дайте ему постоять в течение одной минуты. Затем сотрите крем и при необходимости повторите.

При настройке аппарата ИВЛ в соответствии с физиологическими параметрами и под операционным микроскопом животному делают надрез кожи по средней линии примерно на три миллиметра ниже нижней челюсти вплоть до второго ребра. Определите срединную линию и соединительные ткани подчелюстной железы. Затем с помощью двух угловых щипцов аккуратно и тупо разделите железу по средней линии и исследуйте трахейную мышцу.

Аккуратно подготовьте трахею, тупо раздвигая паратрахеальные мышцы. С помощью щипцов потяните за язык, чтобы выпрямить горло для облегчения интубации, и аккуратно введите канюлю для интубации внутрь трахеи. Подтвердите интубацию прямой визуализацией трубки внутри трахеи и проверкой правильности движения грудной клетки.

Подготовьте обе сонные артерии, которые прилегают к трахее, с помощью щипцов аккуратно раздвиньте соединительную ткань. Нанесите ультразвуковой гель на кончик допплеровского зонда с частотой 20 Гц и поместите кончик зонда на правую и левую сонную артерию под углом менее 45 градусов. Медленно вращайте зонд, чтобы переместить его в боковом и медиальном направлениях, чтобы найти доплеровский сигнал, а затем наклоните щуп для оптимизации сигнала.

С помощью свежего набора стерильных перчаток и ножниц расширьте разрез кожи вниз до второго межреберья. Затем кончиком щипцов откройте второе межреберье, и вставьте ретракторы. При увеличении 200% определите срединную и соединительную ткани.

Затем с помощью угловых щипцов аккуратно разделите тимус. Удаляйте жировую ткань до тех пор, пока дуга аорты не станет хорошо видна. С помощью щипцов большого пальца под углом подготовьте туннель под поперечной аортой, между брахиоцефальной артерией, и левой общей сонной артерией.

Затем с помощью тонких щипцов провести шов 6-0, и пропустить нить под дугу аорты. Вторыми щипцами возьмите нить с другой стороны дуги. Осторожно расположите распорку параллельно поперечной аорте.

Подготовьте свободный двойной узел на распорке и обеспечьте оптимальное размещение распорки параллельно аорте. Затем завяжите первый узел, и быстро завяжите второй противоположный узел, прежде чем быстро снять распорку. Самым важным этапом всей процедуры является быстрое и плотное завязывание обоих узлов и немедленное снятие распорки.

Второе межреберье закройте полипропиленовым швом 6-0, а при перевязке уделите особое внимание подключичным сосудам. Затем с помощью полипропиленового шва 6-0 прошить кожу непрерывным швом. Подтвердите лигирование, и проведите послеоперационный уход, согласно текстовому протоколу.

Эти допплеровские измерения скорости кровотока подтверждают успешную TAC, которая вызывает увеличение скорости крови в правой сонной артерии из-за повышенного давления в левом желудочке и аорте, в то время как постстенотическое ослабление скорости кровотока в левой сонной артерии ухудшается. Как показано на этом графике, отношение массы сердца и массы тела значительно увеличилось у мышей с TAC по сравнению с мышами без бандажей через шесть дней после операции. Это соотношение было почти постоянным через 21 день.

Частота сердечных сокращений оказывает значительное влияние на сократимость левого желудочка и сердечный выброс. Этот график показывает, что не было различий в частоте сердечных сокращений у мышей с аортальным бандажем и мышей без аорты через 21 день. Как показано здесь, постоянное бандажирование аорты было доказано повышенным систолическим артериальным давлением, измеренным с помощью катетера левого желудочка через 21 день.

Известно, что у черных шести мышей C57 развивается эксцентрическая гипертрофия с систолической дисфункцией после TAC. Обнаружено увеличение диаметра левого желудочка, что также представляется значимым при измерении объема давления. В результате значительно увеличивались конечные систолические и диастолические объемы.

После освоения этой техники ее можно выполнить менее чем за 10 минут, если она выполнена правильно. Наконец, эта процедура обеспечивает оптимизированный анализ иммунного ответа при гипертрофии левого желудочка, поскольку минимальная хирургическая травма ограничивает неспецифическую индукцию иммунной системы. После просмотра этого видео у вас должно сложиться хорошее представление о том, как выполнять стандартизированную, минимально инвазивную поперечную констрикцию аорты.