Поколение сфероидов человеческого носа эпителиальных клеток для исследования регулятор трансмембранной проводимости индивидуализированные муковисцидоза

Общая суть этой процедуры заключается в получении сфероидов из носовых клеток человека, которые в конечном итоге могут быть использованы в качестве анализа для функциональных исследований CFTR. Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы в области муковисцидоза, такие как оценка реакции отдельного субъекта на препараты, изменяющие CFTR, в модельной системе ex vivo. Основное преимущество этого метода заключается в том, что большое количество сфероидов генерируется в относительно короткие сроки из небольшого образца назальной клетки, что позволяет проводить обширное тестирование.

Демонстрировать процедуру будут Лорен Стрекер и Джессика Мончивайз, техники из моей лаборатории. После обработки и расширения клеток назального эпителия человека или HNE на фидерных фибробластах в соответствии с текстовым протоколом доведите предварительно приготовленную среду для расширения, среду для дифференцировки, 0,1% раствор трипсина ЭДТА и стерильный PBS до комнатной температуры в течение 30 минут. Затем используйте 70% этанол для очистки контейнеров и переложите их в чистый шкаф биобезопасности.