Создание модели рака молочной метастатической мышиных ортотопическая и выполняя мышиных радикальная мастэктомия

Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы в области рака молочной железы о том, как имитировать прогрессирование рака молочной железы человека и лечения в мышиной модели. Основным преимуществом этой модели рака молочной железы мыши является то, что она имеет высокий уровень опухолевых после ортопедической имплантации и низкий местный уровень рецидивов после мастэктомии. Начните с подтверждения отсутствия реакции на щепотку ноша в анестезизированных самок мыши и лентой конечностей животного на хирургическую доску.

С помощью стерильных ватных тампонов стерилизовать хирургическую область с хлоргексидином, йодом и 75%этанолом. И сделать пятимиллиметровый разрез кожи в середине передней стенки грудной клетки. Затем поднимите правую сторону кожи, прилегающую к разрезу, и используйте стерильные ножницы микроперегиба, чтобы отделить кожу от грудной стенки.

Инвертировать кожу, чтобы разоблачить право номер два молочных жира площадку и использовать один миллилитр инсулина шприц оснащен 28,5-го калибра иглы тщательно вводить 20 микролитров подвески раковых клеток через рану в жирную площадку. Держите иглу в жировой прокладке в течение пяти секунд, чтобы желатиновая смесь белка раковых клеток затвердеть перед удалением иглы, и закрытие разреза стерильными 5-0 неабсорбируемых швов. Затем поместите животное в чистую клетку с мониторингом до полного лежачих.

Для выполнения мастэктомии через восемь дней после прививки от рака подготовить мышь к операции, как только что показали, и сделать пятимиллиметровый разрез кожи два миллиметра слева от хирургического шрама от прививки раковых клеток. Расширить разрез к корню предок для удаления опухоли, и кожи, в том числе хирургический шрам, и поражение в контакте с опухолью, и подмышечный лимфатический узел бассейна, в котором, как правило, нет видимых лимфатических узлов присутствуют во время мастэктомии. Затем закройте дефекты кожи стерильными 5-0 неабсорбируемыми швами в форме Y.And вернуть животное в клетку с контролем до полного вяжутости.

Для количественной оценки метастазов легких через 21 день после прививки вводят 150 миллиграммов на килограмм D-Luciferin IP за 15 минут до эвтаназии. И использовать изогнутые ножницы Майо, чтобы открыть кожу и брюшной полости в середине живота. Нажмите вниз печени, пока диафрагма может быть визуализирована, и сократить диафрагму и двусторонние ребра от caudad к головоносной.

Переверните переднюю стенку грудной клетки, чтобы разоблачить легкие и поднять легкие, чтобы определить грудной пищевод, который выглядит как шнур, соединяющий легкие с позвоночником. Вырезать пищевода с ножницами микроперепись и использовать миппы тянуть двусторонние легкие и сердце к caudad. Затем вырежьте трахею и крупные сосуды до вершины легких на головной клетке и поместите легкие в 10-сантиметровую чашку Петри для биолюминесцентной визуализации.

Используйте ножницы, чтобы удалить сердце из легочной ткани. Начиная примерно с восьми дней после прививки раковых клеток молочной железы, биолюминесценция в легких глубже и меньше, чем при первичном поражении, отражающем первичное бремя опухоли у живых мышей. Измерение размера опухоли с помощью калиперов позволяет оценить объем опухоли на месте.

Эта модель мастэктомии также позволяет серийный метастатической опухоли бремя мониторинга без необходимости усыптовать животных. Опухолевое бремя метастазов легких также может быть количественно ex vivo изображений, но ограничение в том, что мыши должны быть усыпаны. Выживаемость мыши после хирургического лечения также может контролироваться как переводимая клиническая конечная точка.

После своего развития этот метод проложил путь для исследователей в области рака молочной железы, чтобы изучить не только новые разработки лекарств, но и исследования рака молочной железы в целом.