Пивоваренные дрожжи Метаболические маркировки с 4-thiouracil и количественная оценка недавно синтезированных мРНК как прокси для РНК-полимераза II деятельности

8.7K просмотров

Цитируется: 14

09:21 мин.

22 октября 2018 г.

10.3791/57982-v

22 октября 2018 г.

8.7K просмотров

Протокол, описанные здесь основан на количественное определение генома общесистемной вновь синтезированной мРНК, очищенного от дрожжевых клеток с 4-thiouracil. Этот метод позволяет измерять синтез мРНК, расцеплено от гниения мРНК и, таким образом, обеспечивает точное измерение II транскрипции РНК-полимеразы.

Больше видео

Синтез мРНК

Chapters in this video

0:04

Название

0:41

Культивирование клеток

1:37

Мечение 4tU с использованием S. pombe в качестве внутреннего стандарта

3:20

Экстракция РНК и обработка ДНКазой

4:30

Тиол-специфичное биотинилирование вновь синтезированной РНК

6:05

Очистка фракции вновь синтезированной РНК из общей и немеченой РНК с помощью магнитных частиц, покрытых стрептавидином

7:18

Результаты: Количественное определение вновь синтезированной мРНК как показатель активности РНК-полимеразы II

8:52

Заключение

Related Videos