Пивоваренные дрожжи Метаболические маркировки с 4-thiouracil и количественная оценка недавно синтезированных мРНК как прокси для РНК-полимераза II деятельности

8.7K просмотров

Процитировано: 14

09:21 мин

22 октября 2018 г.

10.3791/57982-v

22 октября 2018 г.

8.7K просмотров

Протокол, описанные здесь основан на количественное определение генома общесистемной вновь синтезированной мРНК, очищенного от дрожжевых клеток с 4-thiouracil. Этот метод позволяет измерять синтез мРНК, расцеплено от гниения мРНК и, таким образом, обеспечивает точное измерение II транскрипции РНК-полимеразы.

Больше видео

Schizosaccharomyces pombe

Chapters in this video

0:04

Title

0:41

Cell Culturing

1:37

4tU Labeling with S. pombe as a Spike-in

3:20

RNA Extraction and DNase Treatment

4:30

Thiol-specific Biotinylation of Newly Synthesized RNA

6:05

Purification of Newly Synthesized Fraction from Total and Unlabeled RNA Using Streptavidin-coated Magnetic Beads

7:18

Results: Quantification of Newly Synthesized mRNA as a Proxy for RNA Polymerase II Activity

8:52

Conclusion

Related Videos