Автоматизированное, долгосрочное поведенческое Assay для когнитивных функций в нескольких моделей Генетические болезни Альцгеймера, используя IntelliCage

Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы в области нейробиологии, такие как животные модели когнитивного дефицита или психические заболевания. Основное преимущество этой методики заключается в том, что при меньших затратах персонала можно получить высоковоспроизводимые данные по различным когнитивным задачам. Как правило, люди, плохо знакомые с этим методом, будут испытывать трудности, потому что системе требуется много шагов для точной работы.

Программное обеспечение для проектирования — это место, где создается экспериментальный файл, содержащий ключевые экспериментальные определения. Экспериментальные файлы используются для выполнения определенных тестов, таких как ценовое предпочтение, когда только один из четырех углов недоступен в течение определенного временного окна. Начните с создания списка животных.

Определите условия и задайте параметры для количества испытуемых мышей, количества генетических линий, пола животных и количества используемой клетки. Затем выберите подходящий тип транспондера, DataMars или Trovan на центральной панели инструментов. Затем на панели Группы добавьте или удалите экспериментальные группы, нажав зеленую кнопку с плюсом или красным крестиком в окне Группы соответственно.

Используйте функцию «Кластер» для одинаковой работы с подгруппами, определяя правильные, неправильные и нейтральные углы и стороны. Затем переменные сайта, включая Имя, Тег, Пол, Группу и Кластер. Сохраните и вставьте список животных, выбрав «Экспорт животных».

И «Импортировать животных» в строке меню «Файл», чтобы воспроизвести списки животных для другого эксперимента. Затем настройте все системы, используя соответствующие идентификационные номера на вкладке Настройка. Соотнесите количество адресов в разделе дизайнера с фактическим количеством адресов.

Затем выполните сборку экспериментальных протоколов на вкладке «Intellicage», используя следующие вкладки «Модуль» и «Опция». Проектируйте экспериментальные структуры в пространстве модуля, щелкнув вкладку «Модуль». Чтобы добавить новые модули, нажмите кнопку Добавить, перетащите единицы измерения, показанные в части единиц измерения, в пространство модуля.

Чтобы создать модель адаптации Nosepoke, перетащите блок Door из секции Task, блоки Gate и Timer из секции Utils, а также блоки Visit и Nosepoke из секции Events в пространство модуля. Свяжите любой в интернете устройства Nosepoke с блоком In in the Gate. Link Out to Close в блоке Gate.

Соедините в воротах, чтобы открыть в дверном блоке. Свяжитесь в воротах, чтобы активировать в блоке таймера. Соедините Out в блоке Timer для Close в блоке Door (Дверь).

Установите Период равным 5 000 миллисекунд в разделе Таймер. Определите начальное состояние дверей и клеток на вкладке Параметры. Укажите все двери, которые должны быть закрыты в сеансе без питья, в качестве типичного начального состояния для задач PP или PPR.

Затем задайте расписания во вкладке «Опции» с соответствием ссылке в разделе «Модули». После определения параметров сохраните экспериментальный файл, нажав кнопку Сохранить как. Наконец, загрузите экспериментальный файл, нажмите кнопку «Пуск» контроллера, а затем отслеживайте и визуализируйте текущее состояние системы и мышей.

Чтобы имплантировать транспондеры радиочастотной идентификации, начните с сжатия и поднятия кожи вокруг задней части лопатки для создания кармана. Далее облейте место инъекции 70% этанолом, чтобы свести к минимуму попадание волос в подкожное пространство. Затем введите иглу для инъекции в кожу параллельно позвоночнику.

Извлеките микрочип подкожно и защемите микрочип через кожу, чтобы удержать его в межлопаточном пространстве. Медленно извлеките иглу и продолжайте щипать область в течение нескольких секунд, чтобы обеспечить гомеостаз. Наконец, верните мышь в домашнюю клетку, как только она станет полностью передвижной.

В качестве испытуемых использовались несколько моделей БА, включая NLF, мягкую модель и модель NLGF Severer, а также две контрольные группы. Результаты показали, что производительность моделей AD при инверсии предпочтений места была незначительно снижена у молодых людей. Тем не менее, производительность у пожилых людей значительно и постепенно ухудшалась.

Что касается исполнительной функции, модели Severer AD не хватало точности на последних этапах теста времени последовательной реакции. Облегченная компульсивность наблюдалась у молодых людей и пожилых испытуемых мышей NLGF. Интересно, что, несмотря на то, что наблюдалось увеличение компульсивности у мышей НФОЮВ, которые были молодыми взрослыми, в пожилом возрасте оно стало сопоставимым с таковым у мышей дикого типа.

Пытаясь выполнить эту процедуру, важно помнить о ежедневной проверке системы, уделяя особое внимание состоянию животных, находящихся в клетках. Во время этой процедуры может быть выполнено медикаментозное лечение, чтобы ответить на дополнительные вопросы, такие как вопрос о терапевтических стратегиях. После своего развития этот метод проложил путь исследователям в области нейробиологии к изучению поведенческого фенотипирования или вариаций в биосинтетических моделях.