-1::1
Simple Hit Counter
Skip to content

Products

Solutions

×
×
Sign In

RU

EN - EnglishCN - 简体中文DE - DeutschES - EspañolKR - 한국어IT - ItalianoFR - FrançaisPT - Português do BrasilPL - PolskiHE - עִבְרִיתRU - РусскийJA - 日本語TR - TürkçeAR - العربية
Sign In Start Free Trial

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

Behavior
Biochemistry
Bioengineering
Biology
Cancer Research
Chemistry
Developmental Biology
View All
JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

Biological Techniques
Biology
Cancer Research
Immunology
Neuroscience
Microbiology
JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduate courses

Analytical Chemistry
Anatomy and Physiology
Biology
Calculus
Cell Biology
Chemistry
Civil Engineering
Electrical Engineering
View All
JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

Advanced Biology
Basic Biology
Chemistry
View All
JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

Biology
Chemistry

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

Accounting
Finance
Macroeconomics
Marketing
Microeconomics

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Authors

Teaching Faculty

Librarians

K12 Schools

Biopharma

Products

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduates

JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Solutions

Authors
Teaching Faculty
Librarians
K12 Schools
Biopharma

Language

ru_RU

EN

English

CN

简体中文

DE

Deutsch

ES

Español

KR

한국어

IT

Italiano

FR

Français

PT

Português do Brasil

PL

Polski

HE

עִבְרִית

RU

Русский

JA

日本語

TR

Türkçe

AR

العربية

    Menu

    JoVE Journal

    Behavior

    Biochemistry

    Bioengineering

    Biology

    Cancer Research

    Chemistry

    Developmental Biology

    Engineering

    Environment

    Genetics

    Immunology and Infection

    Medicine

    Neuroscience

    Menu

    JoVE Encyclopedia of Experiments

    Biological Techniques

    Biology

    Cancer Research

    Immunology

    Neuroscience

    Microbiology

    Menu

    JoVE Core

    Analytical Chemistry

    Anatomy and Physiology

    Biology

    Calculus

    Cell Biology

    Chemistry

    Civil Engineering

    Electrical Engineering

    Introduction to Psychology

    Mechanical Engineering

    Medical-Surgical Nursing

    View All

    Menu

    JoVE Science Education

    Advanced Biology

    Basic Biology

    Chemistry

    Clinical Skills

    Engineering

    Environmental Sciences

    Physics

    Psychology

    View All

    Menu

    JoVE Lab Manual

    Biology

    Chemistry

    Menu

    JoVE Business

    Accounting

    Finance

    Macroeconomics

    Marketing

    Microeconomics

Start Free Trial
Loading...
Home
JoVE Journal
Immunology and Infection
Количественная ПЦР бактериофага Т7 от Biopanning
Количественная ПЦР бактериофага Т7 от Biopanning
JoVE Journal
Immunology and Infection
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Immunology and Infection
Quantitative PCR of T7 Bacteriophage from Biopanning

Количественная ПЦР бактериофага Т7 от Biopanning

Full Text
11,655 Views
05:42 min
September 27, 2018

DOI: 10.3791/58165-v

Xiujuan Peng1, Jasmim Leal1, Rashmi Mohanty1, Melissa Soto1, Debadyuti Ghosh1

1Division of Molecular Pharmaceutics and Drug Delivery, College of Pharmacy,University of Texas at Austin

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This article describes a reproducible and efficient quantitative PCR (qPCR) method for enumerating T7 bacteriophage. The protocol includes genomic DNA preparation, PCR reaction setup, cycling conditions, and data analysis.

Key Study Components

Area of Science

  • Virology
  • Microbiology
  • Diagnostics

Background

  • Enumeration of bacteriophages is crucial for various applications.
  • Traditional assays may not be feasible for large sample sizes.
  • Accurate quantification aids in diagnostics and therapeutics.
  • This method addresses key challenges in the field.

Purpose of Study

  • To provide a time-efficient method for quantifying T7 bacteriophage.
  • To enhance the accuracy of bacteriophage enumeration.
  • To facilitate research in phage display biopanning experiments.

Methods Used

  • Preparation of phage genomic DNA.
  • Designing specific primers for PCR.
  • Serial dilution of reference T7 phage DNA.
  • Setting up qPCR reactions and analyzing data.

Main Results

  • The method allows for accurate quantification of bacteriophages.
  • It supports the analysis of multiple samples efficiently.
  • Demonstrated by graduate students in a laboratory setting.
  • Facilitates advancements in bacteriophage-based diagnostics.

Conclusions

  • The qPCR method is a valuable tool in virology and microbiology.
  • It addresses limitations of traditional bacteriophage assays.
  • Promotes further research and application of bacteriophages.

Frequently Asked Questions

What is the main advantage of this qPCR method?
The main advantage is its time efficiency and accuracy in quantifying large numbers of samples.
Who demonstrated the procedure?
The procedure was demonstrated by graduate students Rashmi Mohanty and Jasmim Leal.
What is the significance of enumerating bacteriophages?
Enumerating bacteriophages is crucial for diagnostics and therapeutic applications in virology.
How is the T7 phage DNA prepared?
T7 phage DNA is prepared by obtaining a stock concentration and performing serial dilutions.
What are the applications of this method?
This method can be applied in phage display biopanning experiments and bacteriophage-based diagnostics.
What challenges does this method address?
It addresses the challenges of accurate quantification and analysis of complex samples.

Воспроизводимость, точность и время эффективный количественный PCR (ПЦР) метод для перечисления бактериофага Т7 описано здесь. Протокол четко описывает подготовка геномной ДНК фага, подготовка реакции PCR, Велоспорт условия ПЦР и ПЦР анализа данных.

Этот метод может помочь решить ключевые проблемы в области вирусологии и микробиологии, связанные с перечислением бактериофагов из сложных образцов и бактериофаг на основе диагностики и терапии. Основным преимуществом этого метода является то, что он позволяет время эффективной и точной количественной оценки большого количества образцов из фагов дисплей биопанирования экспериментов не представляется возможным с традиционными анализами. Демонстрация процедуры будет Рашми Mohanty и Jasmim Leal, аспиранты из моей лаборатории.

После проектирования грунтовок и создания концентрации запасов, получить ссылку T7 фаг ДНК в концентрации 0,1 микрограмма на микролитер. Используя ультрапурную воду, последовательно разбавляйте эту ДНК в десять раз, от одного миллиона фемтограмм на микролитр до одной фемтограммы на микролитр в 0,2 миллилитровЫх ПЦР-трубках. Подготовка 20 микролитров каждой концентрации, убедившись, что изменить пипетки советы и вихрь труб между каждой стадии разбавления.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

Sign In Start Free Trial

Explore More Videos

Иммунология и инфекции выпуск 139 фага Т7 фаг геномной ДНК ПЦР assay металлической пластинкы предел обнаружения количественная оценка диапазона

Related Videos

Количественная полимеразная цепная реакция для перечисления бактериофагов

03:25

Количественная полимеразная цепная реакция для перечисления бактериофагов

Related Videos

1.2K Views

Биопанирование на основе кварц-кристаллических микровесов на основе биосенсора для изучения белок-лекарственных взаимодействий

05:13

Биопанирование на основе кварц-кристаллических микровесов на основе биосенсора для изучения белок-лекарственных взаимодействий

Related Videos

855 Views

Протокол для фагов и Affinity выделение с помощью рекомбинантного белка Приманки

12:36

Протокол для фагов и Affinity выделение с помощью рекомбинантного белка Приманки

Related Videos

35.1K Views

Кинетика синтеза Отставание-нити ДНК In Vitro С помощью бактериофага Т7 белков репликации

08:14

Кинетика синтеза Отставание-нити ДНК In Vitro С помощью бактериофага Т7 белков репликации

Related Videos

7.9K Views

Синтез инфекционных бактериофагов в E. coli-на основе свободных клеток выражение системы

11:33

Синтез инфекционных бактериофагов в E. coli-на основе свободных клеток выражение системы

Related Videos

15.7K Views

Стратегия биосенсорного анализа высокой пропускной способности и биоинформатики для глобальной проверки взаимодействий между наркотиками и белком

08:31

Стратегия биосенсорного анализа высокой пропускной способности и биоинформатики для глобальной проверки взаимодействий между наркотиками и белком

Related Videos

5.6K Views

Понимание влияния умеренных бактериофагов на их лизогены с помощью транскриптомики

09:23

Понимание влияния умеренных бактериофагов на их лизогены с помощью транскриптомики

Related Videos

2.7K Views

Взаимодействие бактериофага Т4 и кишечной палочки в кишечнике мышей: прототипная модель для изучения динамики бактериофагов хозяина in vivo

08:46

Взаимодействие бактериофага Т4 и кишечной палочки в кишечнике мышей: прототипная модель для изучения динамики бактериофагов хозяина in vivo

Related Videos

2.7K Views

Количественная оценка аденоассоциированных вирусных геномов в очищенных образцах векторов методом цифровой капельной полимеразной цепной реакции

04:43

Количественная оценка аденоассоциированных вирусных геномов в очищенных образцах векторов методом цифровой капельной полимеразной цепной реакции

Related Videos

2.6K Views

Отбор проб фотосинтезирующих микробов и их вирусов из окружающей среды: от полевых условий к лабораторным

08:01

Отбор проб фотосинтезирующих микробов и их вирусов из окружающей среды: от полевых условий к лабораторным

Related Videos

935 Views

JoVE logo
Contact Us Recommend to Library
Research
  • JoVE Journal
  • JoVE Encyclopedia of Experiments
  • JoVE Visualize
Business
  • JoVE Business
Education
  • JoVE Core
  • JoVE Science Education
  • JoVE Lab Manual
  • JoVE Quizzes
Solutions
  • Authors
  • Teaching Faculty
  • Librarians
  • K12 Schools
  • Biopharma
About JoVE
  • Overview
  • Leadership
Others
  • JoVE Newsletters
  • JoVE Help Center
  • Blogs
  • JoVE Newsroom
  • Site Maps
Contact Us Recommend to Library
JoVE logo

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. All rights reserved

Privacy Terms of Use Policies
WeChat QR code