В режиме реального времени в Vivo отслеживания тимоцитов в передней камере глаза лазерная сканирующая микроскопия

Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы в области иммунологии о механизмах аутоиммунных заболеваний, иммунодефицита, центральной толерантности и интулации тимуса. Основным преимуществом этой методики является то, что она позволяет в vivo продольной записи набора прародителя и зрелой Т-клеточной экгрессии в васкуляризированных и привитых сегментах тимуса мыши. Хотя этот метод может дать представление о развитии и функции тимуса, также может быть применен к другим тканям, таким как островки поджелудочной железы или гломерули почек.

Чтобы изолировать тимус, поместите мышь на стерильные абсорбентные бумажные полотенца в спинном вертикальном положении в капюшоне ламинарного потока и распылите и протрите живот мыши 70% этанола. Сделайте поверхностный V-образный разрез в нижней части живота, чтобы разоблачить грудную полость и использовать пару прямых 10-сантиметровых рассекающих ножниц, чтобы сделать разрез на 0,5-1 сантиметр в груди вдоль брюшной средней линии. Сложите кожу по обе стороны грудной клетки, чтобы разоблачить грудной полости и сделать два дополнительных глубже 0,5 до одного сантиметра боковых разрезов через диафрагму и грудную клетку для доступа к превосходной медиастинии в передней грудной полости.