Протокол предпочтение кондиционером место для измерения инкубации тягу в крыс
6 ноября 2018 г.
Здесь морфин кондиционером место предпочтение (CPP) Протокол описан измерить инкубации тягу в крыс.
Этот метод может помочь адресовать некоторые ключевые вопросы в поле наркомании о пристрастиях пользы снадобья и инкубации реакции жажды. Что только шесть дней морфина кондиционирования, обусловленное место предпочтение памяти ответ может быть продлен до 18 дней для наблюдения тягу явлений в крысы модели. Последствия этой модели кондиционирования крыс морфина распространяется на дальнейшее наше понимание основных механизмов инкубации тягу.
Перед началом процедуры постройте трехкумерный аппарат, состоящий из двух больших, черных 30 на 25 на 30 сантиметров боковых камер. И один белый 11 на 25 на 30 сантиметров средней камеры, с гладкой, белый пол ПВХ. Затем добавьте различные тактильные сигналы в боковые камеры для проверки первоначальных предпочтений крысы.
Для предварительного кондиционирования животных снимите двери гильотины, чтобы обеспечить свободный доступ ко всему аппарату. И поместите крысу в среднюю камеру. Запись активности животного в течение 15 минут, расчет времени, затязаемого в двух боковых камерах на третий день в качестве базового.
Для кондиционирования животных, вводить морфина обусловленной крысы группы с одним миллилитр на килограмм 10 миллиграммов на миллилитр гидрохлорид морфина IP в первой половине дня. И с одним миллилитром на килограмм физраствора 10 часов спустя, каждый день в течение шести дней. Размещение каждой крысы в соответствующий препарат в паре, не предпочтительный или солевой парной, предпочтительной камеры в течение 45 минут сразу после каждой инъекции.
Для тестирования морфина условных животных, в дни два, 10 и 18 после последнего сеанса кондиционирования, удалить двери гильотины, чтобы свободный доступ ко всему аппарату. И записывать активность каждого животного в течение 15 минут после размещения в средней камере для свободного исследования всего аппарата в состоянии, свободном от морфина. Сохранение памяти условных предпочтений места в морфина и солевые группы оценивается путем измерения условных место предпочтение оценка на несколько точек времени после последнего сеанса кондиционирования.
Количество записей в боковые камеры аналогично количеству активных ответов в парадигме самоуправления, отражающих укрепляющее свойство морфина и с увеличением числа записей, указывающих на инкубацию тяги. Как показано на примере, морфин условные предпочтения место может быть успешно создана с помощью этого протокола. Индуцирование долгосрочной памяти награды морфина на срок до 18 дней после последнего сеанса кондиционирования.
При попытке этой процедуры, важно помнить, чтобы выбрать, чтобы сбалансировать тактильные сигналы. После этой процедуры, другие меры, такие как восстановление после каждого кондиционирования могут быть выполнены. Чтобы ответить на дополнительные вопросы о том, восстановление под инкубацию тягу имеют аналогичные основные механизмы.
После восстановления, этот метод проложил путь для исследователей в области добавления наркотиков для изучения инкубации тягу в rats'conditioned парадигмы предпочтения места.
Обзор
В данной статье описывается протокол кондиционированного предпочтения места (CPP) с использованием морфина для измерения инкубации тяги у крыс. Этот метод позволяет исследователям изучить фундаментальные механизмы возникновения наркотической тяги и зависимости.
Основные компоненты исследования
Область науки
- Нейронаука
- Поведенческая психология
- Фармакология
Теоретическая часть
- Понимание механизмов лекарственной тяги имеет решающее значение в исследованиях зависимостей.
- Метод кондиционированного предпочтения места является распространенным способом оценки воспоминаний, связанных с приемом препаратов.
- С помощью данной модели можно изучать феномен инкубации тяги.
- Предыдущие исследования продемонстрировали долгосрочные эффекты лекарственного кондиционирования.
Цель исследования
- Создание надежной модели обусловленного перепопотирования (CPP) на морфине у крыс.
- Изучение инкубации тяги с течением времени.
- Оценка подкрепляющих свойств морфина с помощью поведенческих реакций.
Используемые методы
- Сконструирована трехкамерная установка для теста кондиционированного предпочтения места (CPP).
- Проведено предварительное кондиционирование крыс для установления исходных предпочтений.
- В течение шести дней проводились инъекции морфина и физиологического раствора.
- Измерялись активность и предпочтения в нескольких временных точках после кондиционирования.
Основные результаты
- Успешное формирование морфинового КПП с долгосрочным сохранением памяти.
- Увеличение количества заходов в камеры, связанные с препаратом, указывало на инкубацию тяги.
- Поведенческие реакции отражали подкрепляющие свойства морфина.
- Полученные результаты обосновывают дальнейшее изучение механизмов развития тяги при зависимости.
Выводы
- Модель обусловленного переключения места действия (CPP) с использованием морфина эффективна для изучения лекарственной тяги.
- Можно наблюдать долгосрочные эффекты морфинового кондиционирования.
- Данный протокол может помочь в понимании динамики развития зависимости.
Часто задаваемые вопросы
Практическая значимость для промышленности
Данный протокол позволяет исследователям в области биофармацевтики моделировать зависящее от времени усиление тяги к препарату в период абстиненции, что является одной из основных проблем в терапии зависимостей. Регистрируя инкубацию тяги у крыс, этот метод способствует валидации мишеней и снижению механистических рисков при разработке новых методов вмешательства, направленных на предотвращение рецидива. Описанный подход служит трансляционным мостом между доклиническим скринингом и оценкой кандидатов в клинике в рамках разработки препаратов для лечения расстройств, связанных с употреблением психоактивных веществ.
Стратегическое применение в биофармацевтических исследованиях и разработках
Ранний поиск и валидация мишени
- Научная ценность: Позволяет проверять терапевтические гипотезы о нейробиологии долгосрочной памяти о вознаграждении и тяги.
- Операционная ценность: Обеспечивает функциональную валидацию мишеней с помощью поведенческих показателей феноменов инкубации.
- Прогностическая ценность: Способствует приоритизации портфеля путем выявления мишеней, модулирующих зависящее от времени усиление тяги.
Скрининг и разработка методов анализа
- Готовность анализа: Подготовка валидированных биологических систем для скрининга соединений по показателям тяги.
- Количественные результаты: Измерение количества заходов в камеру как прокси-показателя активного реагирования, что позволяет проводить анализ зависимости «доза-эффект».
- Воспроизводимость: Стандартизированные тактильные стимулы и конструкция камеры обеспечивают согласованность результатов оценки тяги между различными лабораториями.
Трансляционные и доклинические исследования
- Значимость для заболевания: моделирование инкубации тяги, клинически наблюдаемого феномена при зависимостях у людей.
- Доклиническая преемственность: обеспечивает связь с этапом открытия благодаря 18-дневному окну наблюдения после кондиционирования.
- Решения с учетом рисков: служит основой для критериев принятия решения «продолжать/прекратить» (go/no-go) на базе способности исследуемых соединений подавлять инкубацию тяги.
Интеграция конвейеров и рабочих процессов
Данный метод вписывается в континуум процесса разработки лекарственных средств — от проверки гипотез относительно мишеней до оптимизации соединений-лидеров, — в частности, позволяя оценивать соединения, которые нарушают инкубацию тяги в течение длительных периодов воздержания.
- Открывающая биология: Обеспечивает возможность механистического изучения устойчивости памяти, связанной с морфином, и нейроадаптаций при влечении.
- Скрининг: Предоставляет количественные поведенческие показатели (количество заходов в камеру) для оценки влияния соединений на инкубацию влечения.
- Аналитика: Позволяет получать временные ряды данных о предпочтении и заходах для сравнения условий в различные интервалы абстиненции.
- Трансляционные исследования: Соответствует клиническим временным рамкам инкубации, что подтверждает прогностическую значимость стратегий предотвращения рецидивов.
- Корпоративное повторное использование: Создает многоразовую платформу для оценки различных фармакологических вмешательств, направленных на борьбу с устойчивым влечением.
Операционное и корпоративное воздействие
- Научная ценность: обеспечивает прогностическую уверенность в воздействии на мишень за счет моделирования клинически значимых траекторий тяги.
- Операционная ценность: обеспечивает стандартизированную масштабируемую оценку инкубации тяги при минимальной сложности процедуры.
- Стратегическая ценность: повышает эффективность использования капитала за счет возможности раннего выявления соединений, которые ослабляют дезадаптивные процессы памяти.
- Влияние на портфель: способствует приоритизации кандидатов с учетом рисков на основе их воздействия на долгосрочное проявление тяги.
Особенности реализации
- Требуются экспертные знания в области поведенческой фармакологии грызунов и кондиционирования предпочтения места.
- Результат зависит от точности конструкции камер с четко различимыми тактильными сигналами напольного покрытия.
- Необходимы единообразные процедуры обращения с животными и график инъекций на протяжении шестидневного периода кондиционирования.
- Метод основан на «слепом» подсчете заходов в камеры для минимизации систематической ошибки наблюдателя.
- Ограничен измерением приближающего поведения; не отражает аффективные или мотивационные аспекты тяги.
