Подготовка хлоропласта суб отсеков от Arabidopsis для анализа белка локализации Immunoblotting или протеомики

21.8K просмотров

Цитируется: 9

10:28 мин.

19 октября 2018 г.

10.3791/58581-v

19 октября 2018 г.

21.8K просмотров

Здесь мы опишем способ очистить нетронутыми хлоропластов Arabidopsis листья и их три основных суб отсеков (конверт, стромы и тилакоидов), с помощью сочетания дифференциального centrifugations, непрерывной Percoll градиенты, и разрывными сахарозы градиенты. Этот метод является ценным для subplastidial и внутриклеточных Локализация белков immunoblotting и протеомики.

Больше видео

Percoll

Chapters in this video

0:04

Title

1:01

Harvesting of Arabidopsis Leaves

2:26

Purification of Crude Chloroplasts Using Differential Centrifugation

3:30

Purification of Intact Chloroplasts on Continuous Percoll Gradient

4:51

Lysis of Intact Chloroplasts Using a Hypotonic Buffer and Purification of Chloroplast Sub-Compartments on Discontinuous Sucrose Gradients

6:05

Washing and Concentration of Thylakoid and Envelope Membrane Systems

7:09

Results: Analysis of Protein Localization by Immunoblotting or Proteomics

8:44

Conclusion

Related Videos