Измерения одного липосом для изучения Протон насосные мембранных ферментов с использованием электрохимии и Флюоресцентная микроскопия

Этот метод позволяет изучать протонную транспортную активность ферментов дыхательных мембран, таких как цитохром BO3, в естественной липидной двухслойной среде. Основным преимуществом этой единственной ферментной техники является возможность запуска и остановки ферментативных реакций в любой момент с помощью электрохимии. Использование стеклянного шприца передачи 200 микролитров хлороформного запаса липидного полярного экстракта из кишечной палочки в стеклянные флаконы, чтобы сделать пять миллиграммовых алицитов.

Добавьте 50 микролитров по одному миллиграмму на миллилитр убихинона 10 к липидам, чтобы сделать окончательное соотношение от одного до 100 убихинона 10 к липидам. К смеси добавить 20 микролитров по одному миллиграмму на миллилитр длинноволнового флуоресцентного красителя с надписью lipid сокращенно FDLL. Гомогенизировать раствор хлороформа коротким вихрем и испарять большую часть хлороформа под нежным потоком азота или аргона.