Быстрая коллекция цветочных аромат летучих веществ с использованием Headspace летучих Коллекция Техника для GC-MS тепловой десорпации выборки

Здесь мы представляем протокол для сбора цветочных ароматлетучих из цветущих цветов, используя неразрушающую процедуру отбора проб.

Поскольку цветочный аромат имеет решающее значение для привлечения опылителей, этот метод может быть использован для лучшего понимания или даже повышения опыления местных видов цветов. С помощью этого метода, аромат летучих пробуются с помощью неразрушаемого метода с легко транспортируется машина. Эта методология использует быструю выборку, сокращая время отбора проб с двух до трех часов до 10 минут.

Эти методы обеспечивают способ быстро образец летучих веществ, производимых цветами и может быть использован для образца летучих веществ из других образцов, а также, таких как насекомые феромоны. Для начала выберите цветок, который изначально неоткрыт, и отметь цветок помеченной лентой, чтобы обеспечить повторный отбор проб одного и того же цветка. Отварить мешки духовки в воде в течение 30 минут, чтобы удалить остаточные пластиковые соединения.

Чтобы высохнуть, выпекать в духовке при температуре 175 градусов по Цельсию в течение 60 минут. После того, как мешки высохли, добавить полипропилен переборки союза в каждом углу закрытого конца печи мешки. Промыть все мешки и трубки с 75% этанола и дайте им высохнуть.

Затем выпекать мешки и трубки в духовке на слабом огне, между 74 до 85 градусов по Цельсию в течение 30 минут. В зависимости от продолжительности цветения, по возможности подождите не менее 24 часов после цветения, чтобы собрать образец. Обложка выбранного цветка с запеченной печи мешок.

Cinch мешок плотно с пластиковым галстуком молнии ниже цветка, чтобы предотвратить нежелательные поток воздуха в мешок. Надев стерильные неопренные перчатки, прикрепите трубку из розетки коллекторского оборудования и соедините ее с одним из переборков на мешке для духовки. На другой переборке союз, приложите стеклянный фильтр картридж, содержащий пористый полимерный адсорбент.

Прикрепите вторую трубку к коллектору на вакуумном входе. Подключите конец второй трубки к картриджу фильтра для сбора летучих веществ. Включите как воздушный насос, так и вакуум одновременно и установите на 0,05 литра в минуту.

Пространство головы вокруг цветка наполнено воздухом, но не завышено. Система вытягивает воздух из мешка через фильтр, захватывая цветочные летучие воды. Разрешить машину для запуска в течение 10 минут.

А потом выключите как воздушный насос, так и вакуум. Разобрать трубки и картридж стеклянного фильтра. Поместите фильтр в стеклянный флакон и винт на крышку.

Печать флакона с лентой нити трубы PTFE. Храните образец в морозильной камере до анализа GCMS. Повторите этот процесс с пустой мешок духовки, чтобы собрать пустой образец воздуха в качестве контроля.

Для последовательной репликации же летучих веществ, повторить сбор образцов в то же время каждый день, так как некоторые цветы производят различные уровни аромата в течение дня. Во-первых, удалите стеклянный фильтр картридж из морозильной камеры и поместите его в GCMS в порту инжектора. Чтобы освободить летучие вещества, собранные на пористом полимерном адсорбенте, от адсорбента нагревают тепловую ловушку сбора до 220 градусов по Цельсию в течение восьми минут в потоке гелиевого газа при 1,2 миллилитров в минуту.

Сравните хроматограммы собранных летучих веществ для выявления общих пиков повторения. После определения пиковых летучих веществ используйте Pherobase, чтобы определить, были ли они ранее описаны в цветочных ароматах. В этом исследовании репрезентативные данные GCMS показаны как хроматограмма.

Пики от 10 до 15 минут являются цветочными летучими. Собранные летучие веществы были ссылки в Pherobase, чтобы определить, если они были ранее описаны в цветочный аромат. Например, соединение номер 21 со временем удержания 10.311 было определено как бензальдегид.

Benzaldehyde является поиск на Pherobase со списком всех видов цветов, организованных семьи растений, из которых, что аромат соединения была определена. Здесь показаны виды орхидей, из которых бензальдегид, как было установлено, присутствует в цветочном аромате. Предыдущие методы заняли от двух до четырех часов на выборку.

Использование растворителя для удаления образца из фильтра приведет к пику растворителя на GCMS. Это будет скрывать соединения от нуля до 3,5 минут. Этот метод позволяет видеть все соединения.