11,799 Views
•
04:59 min
•
September 27, 2019
DOI:
Наши данные показывают, что алгогены снижают царапины поведения, но влияние капсаицина на царапины поведения остаются неясными. Поэтому одновременное измерение каждого количества боли имеют важное значение. Традиционный метод предоставляет информацию только для зуда или болевые ощущения, но модель инъекции щеки предоставить информацию для зуда и боли, отдельно и одновременно.
Инъекции щеки может быть трудно на первый, как это занимает практика различать царапины, вытирая, и уход поведения. Видео-демонстрация инъекций и поведенческий анализ могут быть полезны для освоения методов. Для эксперимента по инъекциям щек, за день до оценки, побрить мех на щеке каждой мыши с ножницами для волос, и смонтировать видеокамеру с 30 до 60 кадров в секунду частоту кадров на штатив, в температуре, влажности и контролируемой звуком среде.
Поместите четыре клетки под камеру в указанной ориентации, и место экраны между каждой клетке, чтобы предотвратить мышей видеть друг друга. На следующий день после бритья поместите одну мышь в каждую записывающую клетку в течение одного часа, чтобы акклиматизировать животных к условиям записи. Если местное лечение должно быть использовано, применить его в это время.
Пока животные акклиматизируются, загрузите тестируемое вещество, представляющие интерес, в один 0,5 миллилитровый шприц, оснащенный иглой 29 или 30-го калибра на мышь. В конце периода акклиматизации начните видеозапись перед инъекцией. Затем ввимит 10 микролитровый раствор испытательного вещества внутридермально в бритую щеку бодрствующее животное.
Затем верните инъекционных мышей в свои клетки и продолжить видеозапись в течение 30 минут. В конце эксперимента загрузите видео в подходящую программу для редактирования видео. Подсчитайте каждый раз, когда мышь поднимает заднюю ногу к щеке и царапины несколько раз в течение одного или нескольких секунд, прежде чем положить ногу вниз, как один бой нуля.
Мыши используют один foreleg для вытирать, и оба forelegs для холить, но только обтирая поведения подсчитаны как боль-родственные поведения. Для эксперимента по инъекциям шеи, за день до эксперимента, побрить мех на затылке каждой мыши с ножницами для волос. На следующий день после бритья, акклиматизировать мышей в записывающих клетках в течение одного часа, прежде чем вводить 10 микролитров испытательного вещества, представляющих интерес внутридермально в бритую шею, в условиях бодрствования.
Верните инъекционных животных в свои клетки записи и записывать поведение мыши в течение 30 минут. Затем подсчитайте царапины приступы на шее и любое лицо вытирая поведения, как только что продемонстрировали. В модели инъекции шеи, гистамин вызывает сильное поведение царапин, в то время как автомобиль вызывает легкие царапины.
В модели инъекции щек, капсаицин не вызывает царапин поведения, но вызывает вытирая поведения, которые, как полагают, связаны с болью. После инъекции в щеку, гистамин в основном вызывает царапин поведения со слабым поведением вытирая. Применение антигистаминных реагентов ингибирует царапины, предполагая, что гистамин индуцированных царапин поведения вызваны реакцией гистамина на рецепторы гистамина.
В этом эксперименте применение зуд-посредника индуцировало царапины, но не вытирало поведение, указывая, что испытанный посредник действует как зудоген, но не алгоген у мышей, похожий на его воздействие на человека. Этот метод позволяет зуд и болевые ощущения, чтобы быть легко и четко отличается одной процедурой. Подробный анализ поведения может быть сделано, сосредоточив внимание на зуд или боль ощущение.
Зуд и боль поведения будут овсем разные ответы. Также эти методы не являются сложными. Процедура инъекции щеки и наблюдения может позволить различным из наших сверстников подготовки освоить.
Мы высоко ценим внедрение модели инъекций щек профессором Ламоттом в йельском университете.
Как правило, модель инъекции шеи мыши используется для оценки поведения нуля, вызванного pruritogen. Однако модель предоставляет информацию только о зуд, а не боль. Здесь, модель инъекции щеки введена в мышах, которые могут быть использованы для одновременного измерения боли и зуда, связанных с поведением.
Read Article
Цитировать это СТАТЬЯ
Yamanoi, Y., Kittaka, H., Tominaga, M. Cheek Injection Model for Simultaneous Measurement of Pain and Itch-related Behaviors. J. Vis. Exp. (151), e58943, doi:10.3791/58943 (2019).
Copy