17 апреля 2019 г.
Рецепторов соматостатина overexpress высокодифференцированных нейроэндокринных опухолей, которые могут быть использованы для диагностической визуализации с radiolabeled соматостатина аналоговых 68Ga-DOTATATE. Этот протокол описывает radiolabeling 68Ga-DOTATATE, контроля качества, подготовки больных и последующих ПЭТ/КТ. Радиационной безопасности и сужения время из-за короткий период полураспада 68Ga принимаются во внимание.
Этот протокол описывает синтез и контроль качества галлия DOTATATE и последующее приобретение галлия DOTATATE ПЭТ / КТ сканирования. Основным преимуществом этой техники является то, что она обеспечивает высокое качество галлия DOTATATE в сроки, подходящие для работы с изотопом короткого периода полусейна. Демонстрация процедур будет Else фон Bele и морской Декер, технологи ядерной медицины в нашем отделе.
По крайней мере за два часа до введения пациента поместите комплект маркировки галлия-68 на маркующий модуль в соответствии со спецификациями производителя и поместите материалы в нужное положение. Прикрепите растворы, предусмотренные в комплекте маркировки галлия-68, к многообразию. И прикрепите стерильный флакон с непритятаемым фильтром к выходу модуля маркировки.
Поместите флакон в свинцовый щит, достаточный для излучателей позитрона. И прикрепите выход 68-галлийного генератора к входу модуля маркировки. Растворите 50 микрограммов пептидного аналога в 1,5 миллилитров 1,5 молярного буферного раствора HEPES, предусмотренных в комплекте, и перенесите пептид в реакционной флакон.
Закройте свинцовую защиту вокруг модуля маркировки и начните производство галлия-68 DOTATATE через планшетный компьютер, прикрепленный к маркировке модуля. Когда синтез закончен, удалите иглы с фильтрами из стеклянного флакона и закройте щит свинца вокруг флакона. Поместите флакон в калибровку дозы для измерения активности галлия-68 DOTATATE и обратите внимание на время отсчета активности.
Затем в стерильной среде удалите 0,5 миллилитров помеченного пептида из флакона для контроля качества и подготовив шприцы для введения пациенту. Чтобы подтвердить качество синтезированного пептида перед администрацией, визуально проинспектировать окончательный галлий-68 DOTATATE продукт, чтобы убедиться, что это бесцветная жидкость без каких-либо частиц. Используйте полосу индикатора рН для измерения рН раствора.
РН должен лежать между 6,5 и 7,5. Далее для измерения галлия-68 коллоиды добавляют 20 микролитров помеченного пептида в 500 микролитров воды. И гомогенизировать разбавление с тщательной встряхивания флакона.
Далее добавьте пять микролитров разбавления около 1,5 сантиметра от нижней части семисемейметра длиной один сантиметр в ширину полосы мгновенного тонкого слоя хроматографии кремнезема гель стеклянной волоконной бумаги. И поместите бумагу в трубку, содержащую два миллилитров 50-50 метанола на один раствор ацетата аммония моляра, заботясь о том, чтобы пептид не соеди принимал контакт с раствором. Закройте трубку, чтобы предотвратить испарение и подождите несколько минут, пока растворитель не проехав не менее пяти сантиметров над тем местом, где был применен пептид.
Затем разрежьте бумагу пополам и поместите нижнюю и верхнюю половинки в отдельные трубки. Затем поместите трубки в счетчик хорошо и определить количество кол-во всех флаконов в 400 до 600 электрон вольт энергии окна в течение 30 секунд, чтобы определить коллоидный процент. Для определения 68-галлийных ионов разбавляют 20 микролитров галлия-68 DOTATATE в одном миллилитре из пяти миллимолейных ЭДТА.
Затем разбавьте 10 микролитров раствора пептида ЭДТА в один миллилитр стерильной воды и поместите раствор в счетчик, чтобы определить количество кол-во в окне энергии 400-600 электронвольт в течение 30 секунд. Медленно промыть картридж C-18 с одним миллилитром 100%этанола следуют один миллилитр стерильной воды. Промыть разбавленный образец через картридж C-18 в трубку сбора.
Промыть образец трубки с одним миллилитров воды и промыть мыть через колонку в трубку сбора. Поместите коллекторную трубку, пустую пробную трубку и шприц в счетчик колодец и определите количество подсчетов в каждом материале в окне энергии 400-600 вольт электронов в течение 30 секунд, чтобы оценить процент ионов. Радиофармацевтическая чистота может быть определена путем расчета общего количества галлия-68 DOTATATE по формуле.
Если радиофармацевтическая чистота, по крайней мере 91%получить короткую историю болезни пациента после регистрации заботиться, чтобы узнать о дате последнего соматостатина аналоговой администрации. Это не противопоказание для галлия-68 DOTATATE изображения, но следует отметить. Когда пациент будет готов, поместите внутривенную канюлю в руку, и промыть катетер с солевым раствором, чтобы проверить размещение канюли.
За 45 минут до ПЭТ/КТ изображения вводят в канюлю 100 мегабеккерелей галлия-68. Поместите пациента с руками над головой на ПЭТ/КТ сканер и поручите пациенту оставаться на месте на протяжении всего обследования. Когда пациент находится в состоянии приобрести изображение обследования и выбрать область сканирования от гипофиза до середины бедра.
Выполните низкую дозу КТ с 40 миллиамперами, 140 электронными вольтами и пятью миллимоларами для коррекции времени и анатомической корреляции. Затем, начиная с головы пациента выполнить ПЭТ-сканирование с 150 секунд на кровать позиции. Здесь показана репрезентативная галлия-68 ДОТАТАТЕ ПЭТ/КТ без признаков заболевания.
Физиологическое поглощение наблюдается в печени и селезенке. Галлий-68 ДОТАТАТЕ выделяется почками и поэтому виден в мочевыводящей дорожке. Здесь показаны изображения пациента с первичной опухолью поджелудочной железы.
Этому пациенту вводили более низкую дозу галлия-68 DOTATATE из-за задержки в производстве помеченного пептида, что привело к меньшей активности, присутствуют у пациента и еще два шумных изображения. Это видно в печени, на что указывает красная стрелка. Здесь можно наблюдать изображение с артефактом движения, которое указывается красной стрелкой.
Галлий-68 имеет короткий период полуотрия 68 минут, поэтому время имеет решающее значение в этом протоколе. В этом протоколе используется позитронно-излучающий изотоп галлия-68, поэтому следует принять адекватные защитные меры для того, чтобы радиационное облучение персонала было как можно более низким.
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео
В данном протоколе описываются синтез и контроль качества галлий-DOTATATE — радиоактивно меченного аналога соматостатина, используемого для диагностической визуализации нейроэндокринных опухолей. В нем изложены процедуры проведения ПЭТ/КТ сканирования с применением галлий-DOTATATE, при этом особое внимание уделяется соблюдению временных интервалов в связи с коротким периодом полураспада gallium-68.
Данный протокол поддерживает ранние этапы валидации мишени, обеспечивая количественную оценку экспрессии рецепторов соматостатинов в моделях нейроэндокринных опухолей. Он представляет собой воспроизводимый рабочий процесс производства радиофармпрепарата, гарантирующий стабильную доставку лиганда для доклинических исследований методами визуализации. Метод способствует снижению механистических рисков за счет стандартизированных показателей контроля качества, связанных с радиохимической чистотой и удельной активностью.
Данный метод интегрируется в общий процесс разработки лекарственных средств — от валидации мишени до оптимизации соединений-лидеров, предоставляя количественные визуализационные биомаркеры, которые позволяют принимать решения о целесообразности дальнейшей разработки на основе оценки взаимодействия с мишенью и фармакокинетического поведения.