Индукция правого желудочкового отказа от сужения легочной артерии и оценка правого желудочковой функции у мышей

Этот метод обеспечивает полезный метод для изучения механизмов отказа правого желудочка. Основными преимуществами этой техники являются экономия времени и увеличение успеха операции. Этот метод может помочь нам имитировать гипертрофию правого сердца и отказ в организме человека путем сужения легочной артерии, чтобы создать перегрузку легочного давления.

Этот метод может быть применен к технике поперечного сужения аорты и может дать представление о пост-трансплантации сердца осложнений, и врожденных исследований сердечно-сосудистых заболеваний. Процедура будет продемонстрирована Xiaoxia Хуанг, техник из моей лаборатории. Перед началом процедуры, пройти кусок 6-0 плетеный шелковый шов через 25 калибровочных иглы разобраны из одного миллилитрового шприца.

Используйте гемостатические типсы, чтобы согнуть иглу на 90 градусов. Затем согните 22 калибровочных иглы 120 градусов. После подтверждения отсутствия реакции на щепотку ноша, поместите анестезированую мышь в положение на спине на 37 градусов по Цельсию грелку, и обеспечить резцы с швом.

Исправить конечностей с лентой, и использовать крем для удаления волос от шеи до процесса xiphoid. Дезинфицировать кожу с последовательным йодом и 75%этанол салфетки, и использовать остроконечные плоскогубцы для извлечения языка немного. Поднимитечинку с пользовательским шпателем, чтобы разоблачить glottis, и использовать источник холодного света, чтобы направить тщательную вставку на заказ трахеи канюли через glottis.

Отрегулируйте параметры мини-вентилятора и установите частоту дыхания до 150 вдохов в минуту, а также приливный объем 300 микролитров. Затем соедините трубку и вентилятор, чтобы подтвердить, что канюля была правильно вставлена перед фиксацией канюли лентой. Чтобы открыть грудную клетку, сделайте примерно 10-миллиметровый разрез кожи параллельно второму ребро.

Используйте ножницы и пинцет локтя, чтобы отделить грудные основные и незначительные мышцы выше второго межреберного пространства. Подсчитайте ребра с кормового угла, чтобы определить второе межреберное пространство и использовать ножницы, чтобы открыть это пространство. Затем прямо отделить паренхиму и тимус до тех пор, пока легочный ствол не будет виден.

Чтобы сжать легочную артерию, используйте пинцет локтя, чтобы прямо отделить легочный ствол и восходящую аорту. Используйте 90-градусную иглу защелки, чтобы пройти через шов через соединительной ткани между стволом легких и восходящей аорты. Поместите 120-градусную иглу на легочный ствол.

Используйте 6-0 плетеный шелковый шов, чтобы ligate обивка иглы к легочной ствол, удаление обивка иглы сразу после заполнения легочного конуса наблюдается. Вырезать оба конца швов и продолжать наблюдать заполнение легочного конуса, чтобы оценить, является ли сужение присутствует. Затем оцените педаль рефлекс животного снова, чтобы обеспечить успех перевязки и закрыть грудь и кожу с 5-0 нейлоновый шов.

По крайней мере, через три дня после операции нанесите ультразвуковой гель на грудную клетку легочной артерии суженного животного. Поместите 30 мегагерц зонд на грудь на 30 градусов против часовой стрелки положение относительно левой парастральной линии, в то время как ориентация выемки в хвостовом направлении. Регуляйте оси Y и X под режимом B до тех пор, пока не будут хорошо видны митральный клапан, аорта и камера левого желудочка.

Поверните зонд от 30 до 40 градусов по оси Y к груди. Регулировать Y и X осей, пока легочный конус хорошо видны и место курсор на кончике легочного клапана листовки для измерения пиковой скорости потока. Выберите цвет и PW и поместите импульсную волну пунктирной линии параллельно направлению кровотока.

Отрегулируйте левую сторону площадки так, чтобы она была выше правой, удерживая зонд, ориентированный на 30 градусов к горизонту вдоль правой внутренней подмышей линии, с выемкой, направленной в хвостовом направлении. Регуляйте оси X и Y до тех пор, пока не будет хорошо виден правый желудочек. Затем нажмите M-режим два раза, чтобы показать линию индикатора.

Через восемь недель после операции, intubate мыши, как попродемонстрировано, и сделать 1,5 сантиметра двусторонний разрез ниже процесса xiphoid через диафрагму, чтобы открыть грудную полость. Вырезать через ребра, чтобы разоблачить сердце, и использовать 23 калибровочных иглы проникнуть в правый желудочек свободной стенки. Нажмите точку прокола осторожно с ватным тампоном, чтобы остановить кровотечение, и использовать кончик катетера, чтобы проколоть желудочек через рану.

Когда кривая стабильна, регулировать кончик катетера к правому желудочка оттока тракта. Нажмите выберите и проанализируйте, чтобы записать систолическое кровяное давление правого желудочка и диастолическое давление, максимальную скорость роста, экспоненциальное время постоянного расслабления, и пульс в течение 10 минут. Затем перенесите катетер из сердца в контейнер с солевым раствором.

По сравнению с группой Шам, более высокая пиковая скорость, больший градиент давления и большая толщина стенки правого желудочка получаются из парастернального вида длинной оси через восемь недель после операции в группе сужения легочной артерии. Кроме того, систолическая функция правого желудочка значительно снижается в группе сужения легочной артерии, по сравнению с группой Шам, через восемь недель после операции. Группа сужения легочной артерии имеет более высокое давление правого желудочка в систоле и диастоле, и индекс контрактности снижается по сравнению с группой Шам.

Правый желудочек Тау и максимальная скорость подъема также больше в группе сужения легочной артерии, чем в группе Шам. Демонстрация того, что дисфункция правого желудочка индуцируется у мышей после восьми недель полос легочной артерии. Инвазивное гемодинамическое тестирование в правом желудочковом, показывает, что пульс остается стабильным до и после мониторинга катетера.

По сравнению с группой Шам, размеры правого желудочка значительно увеличены, а вес правого желудочка выше. Кроме того, гистологическое обследование показывает, что сердечный фиброз в области, покрытой кардиомиоцитами, больше в группе сужения легочной артерии, чем в группе Шам. Наиболее важной частью процедуры является обеспечение того, чтобы легочная артерия разделена правильно и полностью.

Чтобы избежать неправильного разделения, точка разделения должна быть рядом с ветвью легочной артерии, где соединительная ткань между артериями будет слабее. С помощью этого метода мы предоставили более удобный и эффективный подход к индуцированию гипертрофии правого желудочка. Как правило, хирургическая процедура и подходы к оценке очень безопасны.