11,226 Views
•
06:56 min
•
July 30, 2019
DOI:
Сбор тканей для тестирования на бешенство имеет как очевидные, так и неаппадентные опасности. Техник должен использовать самые безопасные методы и носить надлежащее личное защитное оборудование. Эти протоколы обеспечивают безопасные методы некропсии без использования силовых инструментов или пил, минимизируя производство аэрозолей.
Большой протокол животных также может быть выполнен в полевых условиях. Использование метода извлечения крупных образцов животных в полевых условиях устраняет проблему транспортировки головы животного весом свыше 45 килограммов в лабораторию. Большой метод животного похож на европейский протокол для транспонтиформной энцефалопатии образца поиска и может быть использован для любого исследования с использованием ствола мозга и мозжечка.
Для извлечения мозжечка и ствола мозга с помощью брюшного метода, положение образца брюшной стороны вверх с носом направлены distally к задней части биобезопасности кабинета. Держа ортопедический молоток в доминирующей руке и долото советник в другой руке, положение долото на 45 градусов угол с угловой точкой на долото в V форме открытия между правой стороной височной и затылочной костей. Удар верхней части стамески молотком, пока две кости отдельно.
И сделать разрез, прилегающий к основе феноидной кости. Разделив височные и затылочные кости на левой стороне образца, как только что продемонстрировано. И используйте стамеску, чтобы согнуть V область черепа вниз, чтобы разоблачить всю область ромбенцефалона мозга.
Затем используйте ножницы и типсы, чтобы вычерпыть ствол мозга и мозжечок, удаляя все оставшиеся части ткани из черепа по мере необходимости. Если образец не позволяет вентрал поиска положение образца dorsally, с носом направлены distally к задней части шкафа биобезопасности. И использовать тумор tenacula для того чтобы схватить левую височную мышцу с зубами tenacula.
Сожмите ручку, чтобы заблокировать зубы вокруг ткани и использовать острый резной нож, чтобы сократить височной мышцы до кости. Поверните образец на 180 градусов с тенакулой и ножом и повторите разрез на противоположной височной мышце, чтобы разоблачить череп. Верните голову к исходной ориентации и поместите стамеску под углом 45 градусов с угловой точкой к стамести по центру черепа на стыке теменной и внутрипариетальной костей.
И удар в верхней части стамески молотком, пока горизонтальное отверстие не сделано на верхней половине черепа в теменной кости. Поверните образец на 180 градусов и сделайте отверстие на противоположной стороне черепа, как только что продемонстрировано. Распорежьте голову по мере необходимости, чтобы вставить точку стамески в конце первого разреза под углом 90 градусов к горизонтальному открытию и ударить долото, пока отверстие не достигнет затылочной кости.
Roll образца, чтобы сделать отверстие на противоположной затылочной кости таким же образом. Отверстия в черепе должны напоминать перевернутый U.Insert зубы тенакулы в череп в нижней части вас и тянуть кости назад, чтобы разоблачить хвостовой конец мозжечка и мозжечка. Затем используйте ножницы в качестве совок, чтобы вырвать весь мозжечок из полости.
И использовать ткани миппы, чтобы дразнить из ствола мозга от foramen. Для извлечения мозжечка крупного животного и ствола мозга, распоистите образец так, чтобы спинная часть черепа соединялась с поверхностью некропсии. С хвостовой частью черепа и foramen magnum перед передней частью шкафа биобезопасности.
Возьмитесь за ствол мозга с помощью типсов. Вставьте модифицированный нож стилета в foramen magnum между спинным мозгом и спинномозговой околиний, насколько это возможно, и рыскать вокруг спинного мозга, чтобы отделить мозжечок и ствол мозга от спинного окония. Затем вытащите стебель из foramen с типсами.
Когда нож был вставлен через foramen magnum, осторожно угол лезвие следовать вдоль черепа как можно больше и вставить металлический шпатель или нож с достаточно длинной ручкой, чтобы достичь под мозгом в пространство между нервной ткани и спинномозговой ока. Зонд вокруг мозжечка, чтобы гарантировать, что соединения с спинномозговой одеяния были разорваны. Когда meninges были полностью разорваны заранее шпатель rostrally и dorsally зачерпнуть мозжечок.
Затем вычерпыть мозжечок шпателем. Во всех наземных образцах, представленных с черепами в период с 31 января 2019 года по 28 февраля 2019 года, была собрана информация о наличии шеи и методе некропсии. За это время было некропсировано 170 голов с 18 представленными видами.
52% были должным образом обезглавлены. Остальные имели по крайней мере один позвонок прилагается в том числе три образца всего тела. В 75% случаев использовался брюшной метод.
Из них шеи присутствовали на 49. Три крупных животных были представлены и в двух случаях, большой протокол животных был использован. Одна белка была представлена с измельченным черепом и просто отрезав кожу подвергаются мозговой ткани, чтобы ни один из продемонстрированых методов были использованы.
Ткани, используемые для производства микроскопии слайдов и или извлечены из молекулярных методов при обработке нескольких животных избежать перекрестного загрязнения с помощью новых перчаток инструментов и чистой рабочей области. Будьте осторожны при выполнении этих протоколов, так как образцы могут быть инфицированы вирусом бешенства или другими зоонозными заболеваниями. Обратите внимание, что острые предметы также могут присутствовать в образцах.
Целью этого протокола является демонстрация безопасных методов некропсии у мелких и крупных животных для получения удовлетворительных образцов тканей для тестирования на бешенство.
12:37
Изготовление электрода и имплантации в Aplysia californica Для многоканального нейронных и мышечной Записи в неповрежденными, свободно Поведение животных
Видео по теме
12983 Views
10:47
Эффективное Вывод прав нейронов и нейронов прародителей из плюрипотентных эмбриональных стволовых клеток человека с малыми Индукционная Молекула
Видео по теме
15230 Views
17:37
Крупномасштабные Запись нейронов Зонды Движимое кремния в Поведение грызунов
Видео по теме
34497 Views
10:29
Проектирование и монтаж Сверхлегкий моторизованная Microdrive при хронических нейронных Recordings у мелких животных
Видео по теме
12008 Views
08:44
Оценка пространственного обучения и памяти в малых чешуйчатый Рептилий
Видео по теме
7092 Views
09:42
Высокое разрешение 3D Изображение бешенства вирусной инфекции в Solvent-очищенных мозговой ткани
Видео по теме
10773 Views
05:52
Мульти-Волокно Фотометрия для записи нейронной активности в свободно движущихся животных
Видео по теме
35207 Views
09:05
Поколение олигодендроцитов и олигодендроцитов-кондиционированных средних для совместно-культурных экспериментов
Видео по теме
10240 Views
04:05
Картирование мозга фМРТ в реальном времени у животных
Видео по теме
3362 Views
07:43
Субретинальная трансплантация ткани сетчатки, полученной из эмбриональных стволовых клеток человека, на модели крупного крупного животного кошки
Видео по теме
1819 Views
Read Article
Цитировать это СТАТЬЯ
Jarvis, J. A., Brown, K. T., Appler, K. A., Fitzgerald, D. P., Davis, A. D. Rabies Necropsy Techniques in Large and Small Animals. J. Vis. Exp. (149), e59574, doi:10.3791/59574 (2019).
Copy