Кролик Модель Aqueous-дефицитных сухих заболеваний глаз индуцированных Concanavalin инъекции в Lacrimal Glands: Применение к наркотикам эффективности исследований

Наш метод обеспечивает недостающие надежные животные модели сухого глазного заболевания, которые могут быть острыми или хроническими благодаря нашему методу введения всех лакримальных желез и повторных инъекций. Этот метод надежно обеспечивает Конканавалин А в нижней лакримальной железы с помощью ультразвукового руководства для желез широко переменных размеров и до превосходного lacrimal железы, что делает этот метод полный подход. Эта модель обеспечивает простое, оптимизированное, нехирургическое средство, чтобы вызвать aqueous-дефицит сухой болезни глаз.

Он хорошо подходит для изучения эффективности препарата и патофизиологии заболеваний. Выявление заднего резцы и использование ультразвуковой локализации может быть сложной задачей на первый взгляд. Удаление всего меха имеет решающее значение для оказания помощи в ультразвуковой локализации для обоих этих шагов.

Демонстрация процедуры будет Вэй Хуан, аспирант из моей лаборатории. После подтверждения мягкой сеяния, наблюдая расслабленное положение головы с мочками уха больше не полностью вертикально, использовать микропипют для применения 25 микролитров консерванта лидокаина на первый глаз и место гибкой крышкой проволоки speculum между веками. Используя 0,3 типса, схватить nictating мембраны на вершине и расширить его на роговицу.

Используя 26 калибровочных острых игл, вводить лидокаин 1%с 1:100, 000th эпинефрин subconjuctivally в основание nictating мембраны. Умеренный отбеливатель должен образовываться над мембраной. Затем удалите спектр и сделайте идентичную инъекцию в левую nictating мембрану.

Примерно через пять минут, поместите крышку speculum обратно в ближний глаз и использовать 0,3 типса, чтобы втянуть nictating мембраны на его вершине. Используя ножницы Westcott, отрежьте nictating мембрану на своем основании и извлекьте speculum. Затем поместите актуальные антибиотик мази на глаз.

Для палебральной порции верхней инъекции лакримальной железы, после подтверждения едирования, снимите мех в доурбитальной и коже головы области и использовать крем для депиляции, чтобы полностью удалить любой остаточный мех. Через две минуты удалите крем и нанесите 25 микролитров 1%-консервант-свободного лидокаина на соответствующий глаз. Эверт верхнее веко и применять нежное медиальное давление на задний орбитальный обода до тех пор, пока выступ маркировки палебральной части железы видно.

Используя мелкозубые типсы и шприц-туберкулин, оснащенный 27 калибровочной иглой, непосредственно проникают в железу с помощью трансконъюнктивального подхода, продвигающих иглу на два миллиметра в ткань, и вводят 100 микролитров раствора конконъюнктивы A или Con A. Сразу после инъекции нанесите медианное давление на земной шар, чтобы вызвать орбитальное превосходство лакримальной железы. Используя закрытые изогнутые типсы, отступ области до костлявого отверстия в черепе ощущается и применять дальнейшее скромное давление с типсами, чтобы оставить отступ в коже, чтобы служить ориентиром для размещения иглы. Вставьте шприц tuberculin оборудованный с иглой 27 датчика перпендикулярно к коже над indentation меткой около четверти дюйма в разрез и перенаправить иглу задней и внешней к боковому canthus aiming для midpoint между местом впрыска и костлявым орбитальным ободом.

Как только концентратор иглы будет достигнут, медленно ввилите 0,2 миллилитров раствора 1000 микрограммов инъекции Con A.For ILG, просмотрите животное со стороны, чтобы найти известность ILG вдоль нижней передней части орбиты. Используйте хирургическую ручку для маркировки, чтобы нарисовать вертикальную линию на коже, где поверхностная часть железы ILG переходит от ее поверхностного места упокоения на зигоматической кости к ее более медиальной расположению на орбите. Подметать вертикально провел ультразвуковой зонд через линию на коже, чтобы определить конец зигоматической кости.

Переход ILG происходит там, где изображение железы меняется от ограниченной гиперехойной линии к одной без узнаваемой медиальной границы. Относительное положение руки к линии, нарисованной на коже, когда это изменение наблюдается будет место инъекции. Чтобы поместить Con A в железу в точке просто медиальной к зигоматической арочные кости, установить желаемую глубину инъекций, как глубина зигоматической кости гиперехоический сигнал плюс один миллиметр минус известная длина иглы.

Вставьте иглу около 12 миллиметров в железу в месте инъекции, прежде чем медленно снятия до тех пор, пока длина подвергаются иглы за пределами тела равна рассчитанной разницы. Затем ввимите 0,2 миллилитров 1000 микрограммов раствора Con A и подтвердите успех инъекции с помощью ультразвука. ILG должен проявлять характерное гиперехойное пространство.

Инъекции Con A вызывают сильную воспалительную реакцию в лакримальной железе, характеризующуюся плотным лимфоцитаным проникновением, которое сопровождается снижением слезоточивого производства. Уровни слезоточивого лактоферрина подавляются, что приводит к ослаблению роговицы и конъюнктивального эпителия и увеличению окрашивания розового бенгала. Инъекция трех орбитальных тканей LG производит последовательное и равномерное состояние сухого глаза.

Один набор инъекций Con A производит сухое заболевание глаз продолжительностью около одной недели со всеми клиническими параметрами нормализации на 10 день. Последовательные инъекции Con A примерно на одну неделю друг от друга продлить продолжительность сухого заболевания глаз соответственно. После примерно пяти наборов инъекций, сухое состояние глазной болезни часто становится постоянным без необходимости дальнейших инъекций.

Оптимально локализация структур лакримальных желез является наиболее важным. Знакомство с анатомией черепа и внимание к мелким деталям, включая удаление меха вместе с мастерством использования ультразвука, улучшают результаты. Поскольку этот простой метод требует использования острых, расследование должно принять надлежащие меры предосторожности, чтобы предотвратить травмы иглы палкой.