Строительство плазмидов CRISPR и обнаружение эффективности нокаутов в клетках млекопитающих с помощью системы репортеров Dual Luciferase

Здесь мы представляем протокол, описывающий обтекаемый метод эффективного поколения плазмидов, выражающей как фермент CRISPR, так и связанные с ним одногидные РНК (sgRNAs). Ко-трансфекции клеток млекопитающих с этим вектором sgRNA/CRISPR и двойной вектор люциферазы репортер, который рассматривает двойной прядь перерыв ремонт позволяет оценку эффективности нокаута.