Функциональные и физиологические методы оценки медианной регенерации нервов у крысы

Используя средний нерв крысы, можно адекватно реплицировать, периферические поражения нерва у людей. Клинически, большинство из этих поражений происходят, в верхней конечности, которая оказывает поддержку в использовании этой экспериментальной модели. В этой работе мы покажем, как производить различные типы средних нервных поражений у крыс.

Кроме того, мы будем иллюстрировать, как оценить функциональное восстановление этого нерва с помощью нескольких тестов. Средний нерв происходит от сегментов спинного мозга C6 до T1. Средний нерв выделен зеленым цветом. В этом видео хирургические шторы не используются в демонстрационных целях.

Пожалуйста, включите драпировку во время выполнения операции. Кожа в медиальной части правой руки и грудной области наклоняется до глубокой плоскости фасции. Кровоточащие сосуды тщательно перевязаются.

Далее, брахиальная фасция тщательно вырезать, заботясь, чтобы не повредить сосудистые и нервные структуры, в медиальной аспект руки. Ножницы открыты прямо под, терминал вставки грудной клетки основных мышц, для того, чтобы дразнить эту мышцу, вдали от основной аксилярной артерии и вены, а также от терминальных ветвей брахиального сплетения. Вставка грудной клетки основных мышц, затем делится с электрической прижигания.

Пекторалис незначительные мышцы затем подвергается и вырезать. Медиальный нерв затем тупо рассечены из брахиальных сосудов и от локтевого нерва до области локтя. Теперь можно наблюдать, различные ветви терминала Брахиального сплетения, а именно Медиана, Ульнар, Радиальный, Аксилярный, и Мускулокутановые нервы.

С Медианный нерв подвергается и изолированные различные механические травмы могут быть вызваны. Группа Шам может быть создана, только рассекая средний нерв. В группе давки, Средний нерв сжимается, используя микрохирургии типсы в течение 15 секунд.

Группа иссечения является результатом удаления 10-миллиметрового сегмента медианного нерва. Проксимальный пень медианного нерва перевязано с 8-0 нейлоновый шов для предотвращения аксонального роста. Кроме того, можно повернуть вырезанный сегмент на 180 градусов и использовать его в качестве аутологичного трансплантата нерва.

В этом случае проксимальные и дистальные пни секции в медиа-нерве зашивается на нервный трансплантат с помощью 10-0 нейлоновых швов. Физиотерапия является частью стандарта ухода за пациентами, восстанавливающиеся после травм периферического нерва. Есть несколько стратегий для обеспечения послеоперационной физиотерапии крыс, которые были представлены в среднем нервных травм.

Важно выбрать молодых крыс и позволить им иметь контакт с физиотерапевтическими инструментами перед операцией. Это обеспечивает более легкую и быструю адаптацию к настройкам упражнений. Кроме того, физиотерапевтические инструменты должны позволять крысам иметь некоторую степень свободы и в идеале позволяют им выполнять тонкие движения с предвиделами.

Существует несколько способов проведения физиотерапии. Например, можно использовать отдельные сферы. Положите крысу в сферу, а затем поместите его в комнату с несколькими препятствиями.

Пусть он исследовать комнату в течение получаса. Делайте это один раз в день. Крысы также могут быть размещены в отдельных клетках.

С включенными ходовые колеса. Таким образом, крысы могут осуществлять, столько, сколько они хотят, и всякий раз, когда они хотят. Другая возможность размещения, крыс в группах в больших клетках.

Персонализируйте клетки с помощью кожи, канатов, ходовые колеса и другие элементы обогащения окружающей среды. Это позволяет им широкие свободы передвижения, в согласии с их естественным исследовательским поведением и позволяет крысам ознакомиться, с некоторыми из присутствующих элементов, в функциональных тестах. Перед выполнением функциональных тестов, ознакомить крыс с пищей лечит вы решили использовать в качестве положительного подкрепления.

Проводите тесты вечером, когда крысы, естественно, более активны. Начните с теста grasping. Поместите крысу на сетку и поднимите ее за хвост, позволяя ей захватить сетку.

Когда крыса в состоянии захватить сетку, с аналогичной силой с обоими forepaws. Это означает, что средний нерв функционирует и Grasping тест считается положительным. Если он не может захватить сетку с травмированной лапой, grasping тест считается отрицательным.

Для pin Prick тест, поместите крысу на платформе и подождать несколько минут, пока разведка и основные мероприятия по уходу утихают. Начните, когда крыса неподвижно и стоя на forepaws. С помощью зеркала вставьте волосы фон Фрея через сетку, чтобы ткнуть ладонью аспект предвидел.

Повторите это пять раз на каждом forepaw, в качестве альтернативы, ожидая несколько секунд после каждой оценки. Оценка снять ответ следующим образом, ноль без вывода ответ, если крыса медленно удаляет лапу из нити и два, если крыса быстро реагирует на стимул и удаляет лапу или лижет лапу. Поместите крысу в нижней части лестницы и осторожно коснуться хвоста крысы.

Запустите таймер, как только крыса начинает ходить и остановить его, как только его морды пересекает вход коробки. Завехайте время и повторите тест три раза. Положите крысу на дно веревки и убедить ее подняться на нее, нежно касаясь ее хвоста.

Считайте тест действительным, если животное этого не делает, стесняйтесь во время выполнения задания или прекращает восхождение. Запустите таймер, как только животное инициирует восхождение и остановить его момент морды крысы пересекает вход платформы. Дайте крысе перекусить после выполнения, задачи правильно и дайте ему, несколько минут отдыха, прежде чем повторять его.

Поместите лист графовой бумаги на пол коридоров. Затем возьмите крысу за хвост и дайте ей держать кисть, пропитанную метиленовым синим цветом. Поместите его у входа в коридор, чтобы заставить его ходить внутри коробки.

Удалите граф бумаги из пола коридоров и повторить тесты, пока вы не получите хорошее, репрезентативное впечатление от обоих forepaws. Из полученных отпечатков выберите один с хорошей печатью последовательных forepaws и измерить следующие параметры. Длина печати, распространение пальцев, промежуточный палец распространения и стэнк-фактор.

Наконец, измерить расстояние между вторым пальцем двух последовательных отпечатков, длина шага. Для выполнения термографической оценки поместите на губку кусок двойного бокового клея. Поместите крысу на него и клей forepaws как показано на показано.

Подождите минуту, чтобы рассеять тепловой обмен от обработки лап крысы. Захватите камеру под углом 90 градусов и примерно в 30 сантиметрах от крыс. Сделайте два приобретения.

Сначала термограмму всего тела, затем, при приближении камеры к верхней части тела крысы, делают вторую. Из полученной термограммы мы находим область интереса, соответствующую пальмовой области протеп. Измерьте средние, минимальные и максимальные значения температуры этой области на обеих лапах и вычистете разницу температур.

Для выполнения следующей оценки, разоблачить средний нерв с обеих сторон, как это объяснялось ранее. Начните с размещения крысы на спине и положить электрод только что показали в коже. Наземные электроды на бедре крысы и электроды стимуляции и записи, на левой верхней конечности.

Поместите записывающий электрод на мышечный живот Flexor digitorum sublimis и электроды стимуляции, примерно в среднем нерве. Начните приобретение с амплитуды Стимул 10 милливольт и постепенно увеличить его, в 10 милливольт шагов до достижения двух вольт. Во время приобретения зарегистрируйте амплитуду Стимула для первого видимого сгибания пальцев.

Это порог стимуляции мотора. Минимальная амплитуда стимула, необходимая для получения потенциала действия мышц соединения, C.M.A.P.is порога неврологической стимуляции. Наконец, выберите представителя C.M.A.P, в ответ на supramaximal стимул и измерить следующие параметры, задержка, амплитуда, и продолжительность.

Для выполнения оценки прочности сгибания, во-первых пройти пять или шесть шелковых швов петли через ладонь области каждого forepaw и оставить его с пятью сантиметрами длины. Распоить крысу на спине. Начните с левого предпы, зацепите линию шва в динамометровом крючке и выровняйте предпыть с динамометром, не ставя слишком много нагрузки на крючок.

Держите стимулирующие электроды, примерно в среднем нерве. Отрегулируйте амплитуду Стимула до 1,5 вольт и замилите мгновенную силу в течение 30 секунд. Из полученного участка проанализируйте максимальные, минимальные и средние значения силы и область под кривой.

Flexor carpi radialis, который иннервирован средним нервом, удаляется на двусторонней основе и взвешивается в точном масштабе. Что касается некоторых репрезентативных результатов, в Grasping тест, процент крыс с положительным ответом, является самым высоким в группе Шам и постепенно увеличивается с течением времени, у крыс из группы нервного трансплантата. Pin Prick результаты теста выше, в группе Шам по сравнению с теми из либо трансплантата или excision групп.

Скорость крысы в тесте Лестница Бег, является самым высоким в группе Шам, чем крыса представлена на медиальной лаборатории поражения. Среди легких, время для запуска лестницы, как правило, уменьшается с течением времени парирования Медианный восстановления нерва. Аналогично тому, что наблюдается в тесте Лестница Бег, время крысы принимают, чтобы подняться на веревку, уступает в группе Шам, по сравнению с группами, в которых средний нерв ранен.

Скорость крыс, в этом тесте, увеличивается у крыс, в которых средний нерв может восстановиться. Как показано на этих барных графиках, анализ ходячих крыс, как правило, показывает изменения в морфологии отпечатков лап. Эти изменения часто более выражены, в сокрушительных травм, чем в сегментальных поражений нерва.

Этот график показывает, что термография, как представляется, полезный инструмент для поиска температурных различий, между forepaws в первые 30 дней после операции. Те разницы температуры более заметны, в крысах с более строго поврежденным медианным нервом, such as в тех от группы иссечения. Сила сгибания крысы напрямую коррелирует со степенью восстановления нерва.

Быть ближе к нормальному, когда восстановление является максимальным, как видно на этих графиках бар сравнения силы, в обеих лапах в Excision и нервных групп трансплантата. Что касается электротеромиографии, то здесь можно наблюдать различные закономерности. Нормальный потенциал C.M.A.P., характерен для крысы из группы Шам.

В то время как C.M.A.P.is связаны, с переменной степенью поражения среднего нерва, как это происходит в давке и в группах трансплантата нерва. В группе иссечения, нет C.M.A.P.Волна и морфология Flexor carpi radialis зависят от восстановления среднего нерва. На этих двух снимках показаны эти мышцы в группах Шама и Эксцизии.

Как показано в этой работе, крысы Средний нерв является удобной моделью поражения периферического нерва и ремонта. Несколько стандартизированных стратегий доступны для оценки мотора и сенсорного восстановления. Многие из них являются неинвазивными, что позволяет провести ежедневную оценку.

Наконец, экспериментальные настройки физиотерапии, может имитировать восстановление в клиническом контексте, облегчая оговорку результатов для человеческого вида.