Murine цервикальной аорты трансплантации модель с использованием модифицированных non-Suture манжеты Техника

Я Мартин Рилл из научно-исследовательских лабораторий кафедры общей, висцеральной и трансплантационной хирургии ЛМУ в Мюнхене. Сегодня мы собираемся показать вам модель пересадки гетеротопной аорты с использованием модифицированной техники без швов. Во-первых, анестезировать животное-реципиента с внутриперитонеальной инъекцией мидазолама, медетомидина и фентанила.

Обрезать все волосы шейки матки боковой области с электрическим клипер для волос для мелких животных и применять офтальмологические мази с ватными тампонами, чтобы предотвратить глаза от высыхания во время процедуры. Поместите животное в положение на спине на грелку под микроскопом и аккуратно приклейте ноги к операционному столу с чувствительными к коже гипсовыми полосками. Наклоните голову назад и скраб оперативного поля несколько раз с алкоголем.

Сделайте разрез кожи из яремного разреза в правую нижнюю нижнюю нижнюю нижнюю челюсти с маленькими ножницами. Удалите правую нижнюю долей подмандибулярной железы с помощью биполярного прижига сосуда и последующего иссечения с помощью микро ножниц. Удалите правую стерноклеидомастоидную мышцу через биполярную колею верхней и нижней части и последующее иссечение микро ножницами, чтобы получить доступ к общей сонной артерии.

Мобилизовать общую сонную артерию, насколько это возможно, путем вытягивания окружающей соединительной ткани на части с помощью тонких типсов. Свяжите две 7-0 шелковые лигатуры с минимальным расстоянием друг между другом вокруг середины общей сонной артерии и перевлеки общую сонную артерию мелкими микро ножницами между лигатурами. Перейдите проксимальный перевязанной конец через манжету и исправить его с небольшой артерии зажима.

Удалите лигатуру с мелкими микро ножницами как можно ближе к лигатуре, как это возможно, и промыть люмен с гепаринизированным солевым раствором с 30 калибровочной иглой, заботясь, чтобы не повредить стенки сосуда. Раздвоить открытый люмен с помощью тонких сосудистых дилататоров и инвертировать сонной пень над манжетой, потянув его осторожно над полиамидной трубки. Немедленно исправить перевернутый сонной с слабо предварительно связали 7-0 шелковой петли.

Выполните ту же процедуру на другом конце сонной артерии с другой манжетой. Перейдите дистальный перевязанной конец через манжету и исправить его с небольшой артерии зажима. Удалите лигатуру с мелкими микро ножницами как можно ближе к лигатуре, как это возможно, и промыть люмен с гепаринизированным солевым раствором с 30 калибровочной иглой, заботясь, чтобы не повредить стенки сосуда.

Раздвоить открытый люмен с помощью тонких сосудистых дилататоров и инвертировать сонной пень над манжетой, потянув его осторожно над полиамидной трубки. Немедленно исправить перевернутый сонной с слабо предварительно связали 7-0 шелковой петли. Установите животное-реципиент в сторону и увлажняйте верхнюю две трети солевым раствором до тех пор, пока сегмент аорты не будет эксплантирован.

Обезболивать мышь-донора так же, как животное-реципиент. Обрезать все волосы брюшной и грудной области с электрическим клипер для волос для мелких животных и применять офтальмологические мази с ватными тампонами, чтобы предотвратить глаза от высыхания во время процедуры. Поместите животное в положение на спине на грелку под микроскопом и аккуратно приклейте ноги к операционному столу с чувствительными к коже гипсовыми полосками.

Скраб оперативное поле несколько раз с алкоголем. Выполните лапаротомию брюшной полости с маленькими ножницами и нажмите кишечник немного вверх, чтобы разоблачить нижняя кава вены. Введать IVC с одним cc гепаринизированного солевого раствора с помощью 30 калибровочной иглы.

Вырезать брюшной аорты и IVC ниже почечных артерий с небольшими ножницами, чтобы exsanguinate донора животных. Свободно поместите компресс в живот, чтобы поглотить кровь. Выполните торакотомию через двустороннюю утечку ребер ножницами и наклоните переднюю грудную стенку черепно-мозговой с хирургическим зажимом, чтобы разоблачить медиастинум.

Вырезать IVC и пищевода непосредственно над диафрагмой с микро ножницами. Удалите сердце и легкие, оцепив их вверх с типсами проведения разрез IVC и пищевода, а затем excising их с микро ножницами от основания, чтобы получить доступ к грудной аорты и спинного медиастина. Мобилизовать торакальные аорты из окружающих тканей, потянув друг от друга окружающих соединительной ткани и жира с тонкой миппы, будучи осторожным, чтобы не повредить любые межреберные артерии.

Прижигать все ветви из грудной аорты с биполярной типсов прижигания и акцизного сегмента аорты между диафрагмой и аортальной аркой с помощью микро ножниц. Промыть вырезанного сегмента аорты с гепаринизированным солевым раствором с 30 калибровочной иглой, заботясь, чтобы не повредить стенки сосуда, чтобы удалить оставшиеся крови или сгустки и передать трансплантат животному-реципиенту. Потяните проксимальный конец сегмента донорской аорты над проксимальной манжетой поверх перевернутой сонной артерии с тонкой типсом и немедленно зафиксировать его с помощью слабо предварительно завязанной 7-0 шелковой петли.

Обрезать дистальный свободный конец аортального трансплантата с микро ножницами, так что длина трансплантата соответствует расстоянию между двумя манжетами. Потяните дистальный конец сегмента аорты донора над дистальной манжетой поверх перевернутой сонной артерии с тонкой типсом и немедленно зафиксировать его с помощью слабо предварительно завязанной 7-0 шелковой петли. Удалите дистальный зажим сначала, чтобы ретроградной перфузии.

После достижения гемостоза, удалить проксимальный зажим для завершения анастомоза. Наконец, закройте рану 6-0 непрерывным швом. Через 28 дней животные приносятся в жертву, а трансплантаты сохраняются для гистологического окрашивания.

Как показано в этих Ван-Гисон в окрашивания аортальных секций, полностью MHC несовпаденные аорты из Balb / C доноров черный шесть получателей разработали значительные неоинтимальной гиперплазии в результате светитального сужения. С другой стороны, сингенные пересадки аорты от черных шести доноров до черных шести реципиентов развили лишь небольшую неоинтиматальную гиперплазию. Иммунофлуоресценция окрашивания против SM22, маркер для сосудистых гладких мышечных клеток, как показано на этой картине в зеленой флуоресценции, показывает, что неоинтима в основном состоит из сосудистых гладких мышечных клеток.

Трансплантация аорты мурина служит моделью для хронической трансплантации васкулопатии, которая является наиболее распространенной причиной позднего отказа трансплантата. По сравнению с ортотопической брюшной моделью, наша модифицированная техника манжеты менее микрохирургическая требовательная, что приводит к высокому успеху. Кроме того, из-за постоянного диаметра манжеты, вариации сосудистого анатомоза, как видно из других микрохирургических моделей трансплантации могут быть пренебречь.

Кроме того, теплое ишемическое время остается неизменным во всех экспериментальных группах, так как животное-реципиент готовится сначала до того, как будет посажен аортический сегмент. Наша модифицированная модель должна помочь другим лабораториям установить пересадку аорты мурина.