Оценка метаболических эффектов изокалорийного 2:1 Прерывистый пост у мышей

Текущая статья описывает подробный протокол для изокалорийных 2:1 прерывистый пост для защиты и лечения от ожирения и нарушения метаболизма глюкозы в диком типе и об / об мышей.

Два к одному прерывистый режим голодания состоит из одного дня поста с последующим двумя днями кормления позволяет изучить последствия диетических мероприятий, связанных с периодическим ограничением энергии, а не последствия потребления калорий. В отличие от альтернативного дневного поста, который приводит к под кормлением два к одному прерывистый пост предоставляет мышам достаточно времени, чтобы полностью компенсировать потерю энергии и снижение массы тела, которые происходят во время поста. Это позволяет ученым исследовать последствия периодического голодания независимо от потребления калорий.

Два к одному прерывистый пост способствует ряд преимуществ против диеты в используется при ожирении и связанных с ними метаболических дисфункций, включая нарушение гомеостаза глюкозы и жировой болезни печени. Этот протокол можно легко приспособить к пяти-двум режимам питания, состоящим из пяти дней кормления и двух дней поста или ограниченного времени кормления, когда доступ к пище ограничен восемью часами в день. Если использовать модель мыши, которая показывает альтернативное поведение кормления, такие как гиперфагия, кормление от рекламы либитума может быть не совсем правильным условием управления.

В этом случае для изучения и сравнения последствий прерывистого поста потребуется правило кормления пары. Начните с подготовки нормальной диеты или с высоким содержанием жира диеты для худой и диеты индуцированного ожирения мыши моделей. Измерьте базовый вес тела и состав каждой семинедельной мужской мыши C57BL/6J с помощью шкалы и EchomRI, соответственно.

На основе веса и состава тела результаты случайным образом и поровну разделить мышей на две группы: ad libitum или AL, прерывистый пост или IF групп. Затем поместите двух или трех мышей на клетку, гарантируя, что мыши имеют свободный доступ к питьевой воде. Разрешить мышей одну неделю, чтобы акклиматизироваться к новой среде клетки до начала режима IF.

Когда мы готовы начать период поста, переместите мышей в чистую клетку со свежими постельными принадлежностями в 12:00 .m. Предоставьте взвешенное количество пищи группе AL. Нет еды в группу IF.

Через 24 часа взвесьте мышей в обеих группах, а также остатки пищи в клетках AL. В 12:00 вечера.m, обеспечить взвешенное количество пищи как AL и IF групп.

После того, как период кормления закончился мера веса мышей и остатки пищи. Повторите цикл на время исследования. Настройка пары кормления или PF контролируемой группы в течение всего эксперимента, с тем чтобы обеспечить калории независимое сравнение с IF. Измерьте количество пищи, потребляемой группой IF.

Разделите его равномерно на три части и предоставьте одну порцию ежедневно контролю PF. При работе с животными с измененным пищевым поведением, таким как гиперфагия, очень важно ежедневно предоставлять равное количество пищи в парную контрольную группу, чтобы мышей не ели пищу сразу. Для анализа состава тела мышей включите анализатор состава тела и оставьте машину на два-три часа, чтобы разогреться.

Перед его использованием запустите системный тест для обеспечения точности измерений. А при необходимости откалибровать систему рапсовым маслом. Измерьте вес тела каждой мыши.

Затем поместите его в мелкий цилиндрический держатель животного. Вставьте делимитр, чтобы ограничить физическое движение мыши во время измерения. Поместите держатель в анализатор состава тела.

Запустите программу сканирования, которая должна занять от 90 до 120 секунд. Затем снимите держатель с оборудования. Поместите мышь обратно в клетку.

Проведи тест на толерантность к глюкозе и инсулину, чтобы изучить влияние прерывистого голодания на гомеостаз глюкозы. После ночи или шестичасового поста выполните внутриперитонеавную инъекцию глюкозы или инсулина на каждой мыши. Затем измерьте уровень глюкозы в крови на 0, 5, 15, 30, 60 и 120 минут после инъекции с помощью глюкометра.

Чтобы исследовать влияние прерывистого голодания на энергетический метаболизм, выполните косвенную калорийность в течение одного цикла ИФ. После того, как мыши акклиматизироваться к системе, быстро их путем удаления пищи и крошки из бункера и нижней части клетки. Повторно ввести пищу после 24 часов в течение двух дней кормления. В конце цикла IF, принести мышей обратно в свою первоначальную клетку и собирать данные из программы.

Мышей, которые постились в течение 24 часов испытали до 10%снижение массы тела, которая была полностью восстановлена после двух дней кормления. При сравнении потребления энергии от одного до одного и двух к одному прерывистый пост, было установлено, что один день периода кормления не было достаточно, чтобы компенсировать потери калорий, которые произошли во время поста. По сравнению с AL, если лечение привело к снижению массы тела у диких мышей кормили с нормальной чау или с высоким содержанием жира диеты без значительных различий в приеме пищи.

Анализ состава тела показал, что если уменьшить жировую массу без изменения мышечной массы у диких мышей типа. Эксперименты с контролем парного кормления подтвердили, что снижение массы тела if не было связано с измененным потреблением энергии у мышей дикого типа. Однако, в генетически брюзглых, ob/ob, группа управления пары мышей была неотличима от группы IF в весе тела и составе тела.

Глюкоза и инсулиноустойчивость тесты показали, что с высоким содержанием жира диета ЕСЛИ мышей выставлены значительное улучшение в гомеостаз глюкозы по сравнению с высоким содержанием жира диеты AL и высоким содержанием жира диета пару кормили мышей. В ob/ob мышей, группа IF exhibited значительно улучшенная обработка глюкозы с более малыми экскурсиями глюкозы сравненной к группе управления пары-кормили с unaffected чувствительностью инсулина. Другим метаболическим эффектом ИФ, отмеченным у мышей дикого типа, было более высокое потребление кислорода, свидетельствующее о расходах энергии именно в период кормления.

На поведение кормления мышей могут повлиять экологические факторы, включая плотность жилья. Поэтому важно держать одинаковое количество мышей в клетке между группами и в течение исследования. При использовании новой модели мыши рекомендуется изучить поведение кормления перед выполнением прерывистого эксперимента по посту.

Изокалорический два к одному прерывистый пост может быть легко применен к другим моделям заболеваний, включая диабет, болезни сердца, атеросклероз и неврологические заболевания.