Стандартизация нелетального метода для характеристики репродуктивного статуса и ларвал развития пресноводных мидий (Bivalvia: Unionida)

Наш протокол стандартизирует методологии отбора проб жабры гравидных пресноводных мидий и характеризует различные этапы разработки личинок, а также предоставляет онлайновую базу данных для представления данных и исследования альманаха Gravidity. Техника нелетальная и не существенно влияет на способность женской мидии оставаться гравидной после отбора проб жабры, поэтому метод может быть применен как к общим, так и охраняемых видов. Эта методология может быть применена к организмам, характерным для семейств бивалвий в Гиридае, Маргаритиферидае и Унионидае, которые распространяются в пресноводных экосистемах на всех континентах, кроме Антарктиды.

Важно, чтобы открыть мидии с осторожностью, собирать информацию о местоположении, и убедитесь, что данные собираются должным образом. Если идентификация сомнительна, следует сфотографироваться и связаться с соответствующими экспертами. Начните с сбора живых мидий с поля с помощью тактильных визуальных методов.

Оцените женскую гравитацию при визуальном осмотре во время или после сбора, осторожно приглядывая открыть клапаны достаточно, чтобы заглянуть внутрь и посмотреть, являются ли жабры надуты. При использовании сохранившегося образца из музея, выполнить визуальный осмотр, открыв клапаны и осмотр жабры. Чтобы попробовать содержание жабры, подготовьте 1,5-миллилитровую пластиковую трубку для сбора микроцентрифуг с примерно одним миллилитром воды или этанола, в зависимости от того, как скоро будет проведена оценка.

Разверните стерильную 30-го калибра скошенную иглу на 10-миллилитровом шприце, отвинтите крышку, чтобы разоблачить иглу, и нажмите ручку шприца вниз, так что пробка находится на линии с нулевым миллилитров. Возьмите gravid женщины и осторожно подглядывать открыть два клапана с помощью кончиков больших пальцев. Используйте кончик иглы, чтобы аккуратно проникнуть в одну водную трубку надутой сумчатой жабры, а затем аккуратно зачерпнуть жабры содержимое с скошенной кончиком иглы.

Храните их в подготовленной трубке микроцентрифуга для более поздней оценки. Запись соответствующей информации, такой как идентификация видов рода, информация о местоположении сбора и статус гравити на листе данных и запись уникального идентификатора на каждом судне сбора для обеспечения точных записей данных во время транспортировки. Правильно сориентировать мидии, чтобы сфотографировать правильный клапан для проверки личности, заложить его, и принять фотографию, убедившись, что включить помечены образца трубки на картинке.

Чтобы оценить содержимое жабры, перенесите их в чашку Петри и заполните дно тарелки водой. Аккуратно закружить блюдо, чтобы собрать содержимое в центре для более концентрированного просмотра образца. Поместите чашку Петри под микроскопом для оценки образца и, по возможности, сфотографируете образец под микроскопом.

Завехать результаты, какие этапы развития присутствуют в каждом образце жабры. Если самки задумчивые личинки на нескольких стадиях развития, сообщить о каждом этапе развития наблюдается в данном образце. Если выявлены полностью разработанные глохидии и этанол не использовался для сохранения, оцените их жизнеспособность, добавив кристалл хлорида натрия в подмножельную каплю образца жабры.

Жизнеспособная глохидия будет реагировать, открывая и закрывая свои клапаны или просто закрывая их из открытой позиции. Сообщите о любых проверенных солью глохидиях с T в конце обозначения при записи данных. Чтобы сообщить данные, доступ к странице FMGA или мобильному приложению и запись результатов в форме ввода данных с помощью меню высадки и полей ввода текста.

Для больших уже существующих наборов данных обратитесь к авторам для электронной таблицы шаблонов. Введите записанные данные под соответствующими заголовками столбца, имея в виду, что каждая строка в электронной таблице представляет наблюдения жаберного образца от одного gravid человека, а затем представить результаты, и они будут добавлены в базу данных FMGA после проверки администратором, который может связаться с коллекционером, чтобы запросить дополнительные детали или фотографии. База данных FMGA собирает всю представленную информацию и позволяет пользователю визуализировать данные временной гравитации для всех видов в базе данных.

Альманах пресноводных мидий Gravidity является исследовательским инструментом, предназначенным для стандартизации сбора данных о гравитации, одновременно облегчая будущие исследования, сохранение и восстановление. Протокол гилл-выборки оценивался путем пометки и захвата самок с ежемесячными интервалами в течение года. Хотя размеры выборки в исследовании неравны по всем видам, результаты подчеркивают полезное и практическое применение этого протокола.

Календарь gravidity для Villosa lienosa показывает gravid женщин задумчивый полностью развитой glochidia были найдены почти каждый месяц года, за исключением августа, когда только женщины задумчивый массы яйца были найдены. Самка Hamiota australis была найдена не-гравидной в июле, августе и декабре. Большая доля самок были задумчивый полностью разработаны glochidia в январе и феврале и в октябре и ноябре.

Ни один человек Elliptio pullata не были найдены задумчивый полностью развитой glochidia, хотя женщины были задумчивый массы яиц с мая по июнь. Только одна самка Strophitus williamsi была найдена и отбита трижды. Эта самка была найдена задумчивый полностью развитой glochidia в марте, а не gravid в мае, сообщил gravid в июне, и задумчивый яйца в августе.

Gravid женщин Villosa vibex задумчивый полностью развитой glochidia были найдены в период с февраля по июнь. Пресноводные мидии являются сильно под угрозой группы организмов. Эта методология имеет важное значение, поскольку она обеспечивает нелеталенный способ оценки репродуктивных характеристик исчезающих видов.

Очень важно обращаться с мидиями с осторожностью. Экологические условия, такие как температура воды и потоки ручьев, могут быть измерены в полевых условиях, чтобы определить, какие условия вызывают нерест и развитие личинок в пресноводных мидиях. Компиляция данных о временной гравитации для всех видов пресноводных мидий может помочь исследованиям в области эпидемиологии, глохидиальной морфологии, истории жизни, филогенетики, распространения и транслокации.