Создание свиной модели пост-миокарда инфаркт сердечной недостаточности для лечения стволовых клеток

Эта модель свиной сердечной недостаточности, вызванная блокированием левой окружной артерии и быстрым темпом, может быть использована для оценки влияния прямой инъекции стволовых клеток интрамиокарда на регенерацию сердца. Наша свиная колония сердечной недостаточности модель довольно стабильна. Новый размер инфаркта этой модели составляет около 16% левого желудочка и инфаркта инъекций левого желудочка, уменьшенного по крайней мере на 40% от базового уровня.

С экспериментальной свиньи фиксированной в положении на спине, найти правой сонной артерии и жонглера вены в сонной треугольнике, и использовать гемостатические типсы и асептические техники, чтобы изолировать правую сонную артерию и яремную вену. Ligate дистальный конец правой сонной артерии и жонглер вены и использовать ангиокат, чтобы cannulate правой вены жонглера. После вставки кардиостимулятора свинца в правый желудочек под рентгеновским наведением используйте типсы, чтобы изолировать стерноклидомастоид и передние мышцы шкалы и подключить кардиостимулятор к свинцу.

Затем имплантировать кардиостимулятор между двумя мышцами. Затем закройте две мышцы 2-0 шелком. Для оценки изменений функции левого желудочка изолируйте правую бедренную артерию и бедренную вену в бедренной кости и вычислите правую бедренную артерию с помощью ангиоката.

Поместите направляющий провод в бедренную вену через ангиокат и удалите ангиокат. Cannulate 12 французских оболочки в бедренную вену под руководством направляющий провод и удалить направляющий провод. Cannulate правой бедренной артерии с девятью французскими оболочки, как только что продемонстрировали.

И вставьте воздушный шар катетер через 12 французских оболочки в внутренней полой вены под рентгеновским руководством. Калибруйте катетер громкости седьмого французского давления в изотоническом солевом растворе с процессором сигнала громкости давления и вставьте катетер в вершину левого желудочка через девять французских оболочек под рентгеновским наведением. Приостановить вентиляцию и использовать процессор сигнала громкости давления для измерения левого желудочка максимального и отрицательного давления производной, а также систолическое давление и конец диастолического давления.

Затем перезапусти вентиляцию. Для индукции инфаркта миокарда, ввести пять миллиграммов на килограмм амиодарона и 1,5 миллиграмма на килограмм лидокаина болюс внутривенно в течение одного часа, чтобы предотвратить желудочковой аритмии перед расчетом правой сонной артерии с восемью французскими оболочки, как попродемонстрировано. Выполните коронарную ангиографию через шесть французских оболочки более-провода руководящий катетер через размещенную оболочку руководствоваться стандартной флюороскопии руки C.

Окклюд к левой окружной коронарной артерии дистал к первой тупой маргинальной ветви с перкутанной транслюминальной коронарной ангиопластики расширения шар катетера инфляции под рентгеновским руководством. Загрузите один миллилитр 700 микросфер губки микросферы, смешанные с семью миллилитров iohexol в 10 миллилитров шприц и ввести смесь через воздушный шар катетер, чтобы заблокировать левую окружность коронарной артерии. Затем сдуть воздушный шар и выполнить ангиограмму, чтобы подтвердить окклюзии.

Восемь недель после инфаркта индукционной нагрузки два раза от 10 до восьмого человека индуцированных плюрипотентных стволовых клеток полученных мезенхимальных стволовых клеток в двух миллилитров нормального солевого раствора в пять миллилитров шприц и стерилизовать 10 сантиметров вокруг вершины бить области анестезированного экспериментального животного. Используйте ретрактор для выполнения левой торакотомии в четырех или пяти межреберных пространства и выполнить перикардиотомию, чтобы разоблачить инфаркт боковой стенки. Когда infarcted областях видны, выполнить пять-восемь внутри миокарда инъекции около 300 микролитров клеток на инъекцию до закрытия межреберного пространства с железной проволокой и закрытия мышечного слоя с 2-0 шелковых швов и подкожных тканей и слоев кожи с 2-0 vicryl швов.

Для оценки неодобряемости желудочковой тахиаритмии после клеточной терапии вставьте шесть французских электрофизиологических катетеров в правую желудочковую вершину через бедренную вену и отобразить внутрикардовые записи с поверхностными электрокардиограммами leas I, II и III на электрофизиологической системе записи со скоростью 200 миллиметров в секунду. Используйте стимулятор, чтобы доставить две миллисекунды шириной импульса в два раза диастолический порог и доставить ходить поезд из восьми стимулов на один 200 миллисекунд и один 300 миллисекундный цикл длины диска следуют один или два преждевременных дополнительных стимулов. Затем последовательно сокращается интервалы соединения до вентрикулярного эффективного огнеупорного периода аритмии индуцируется, не говоря уже о наличии неосуществимой устойчивой желудочковой тахиаритмии.

В этом репрезентативном эксперименте, серийное эхокардиографическое исследование показало, что фракция выброса левого желудочка значительно уменьшилась от базовой линии, в то время как левое желудочка энд-диастолическое измерение и конец систолического измерения значительно увеличилось на восемь недель после индукции инфаркта миокарда. В отличие от этого, фракция выброса левого желудочка значительно увеличилась, а систолическое измерение конца значительно уменьшилось в группе трансплантации клеток через восемь недель после введения. Отрицательное давление производных и конец систолического давления объем отношения значительно снизилась от базового уровня в восемь недель после индукции инфаркта миокарда в то время как интрамиокарда введения мезенхимальных стволовых клеток привело к увеличению этих функций.

Измерение толщины стенки левого желудочка в пяти-семи серийных участках толщиной один сантиметр от каждого животного выявило процент инфаркта левого желудочка примерно на 16% Не было выживания клеток вокруг места инъекции в области инфаркта через восемь недель после трансплантации. Но небольшое количество сохранившихся инъекционных стволовых клеток были видны в периинфарктной области. Случаи индуцированного устойчивого желудочковой тахиаритмии могут быть легко увеличены у животных с сердечной недостаточностью.

Следует отметить, что трансплантация стволовых клеток не в значительной степени изменила основной субстрат миокарда, чтобы уменьшить восприимчивость к желудочковой тахиаритмии. Как левый окружной коронарной артерии блокировки может вызвать аритмию. Обязательно следите за ЭКГ и немедленно используйте внешний бифазный дефибриллятор для при необходимости восстановить пазухи.

Этот метод обеспечивает стабильную и воспроизводимую клинически релевантную крупную животное модель сердечной недостаточности для проверки эффективности терапии на основе стволовых клеток.