Идентификация хост Пути целевых бактериальных протеинов с использованием дрожжей токсичности и супрессорэкранов

Внутриклеточные бактерии выделяет белки эффектора в хозяина, который может манипулировать биологическими путями для содействия выживанию патогенов. Выявление принимающих целей эффекторов имеет важное значение для понимания внутриклеточных патогенов, таких как chlamydia trachomatis. Дрожжи токсичности и супрессор экраны могут обеспечить ключевое понимание в отношении естественной биологической цели бактериальных белков эффектора и может быть особенно полезным, когда связывающий партнер неизвестен.

Мы демонстрируем токсичность дрожжей и супрессор анализы здесь для скрининга на хламидиоз trachomatis эффектор белков, но этот метод также был использован для характеристики Legionella пневмофилы и Coxiella burnetii эффекторов. Начните с инокуляции пяти миллилитров одного выпадают бульона с одной колонией дрожжей, преобразованных с эффектором белка, содержащего плазмиду. Используйте дрожжи преобразованы с вектором только в качестве отрицательного контроля и инкубировать инокулум ночь при 30 градусах по Цельсию во время встряхивания.