Создание острого инфаркта понтий в Крысах электрической стимуляцией

Мы предоставляем протокол для установления инфаркта в пончики крысы. Эта модель pontine infarction крысы легко была выполнена, легко воспроизведена, и высоки успешно модель. Электрическая стимуляция может быть использована для инфаркта в любой другой области мозга, как таламус.

Люди, которые хотят выполнить эту модель должны узнать понтийскую автономию перед экспериментом. Перед операцией взвесить крыс и оценить их неврологические показатели в соответствии с поведенческими тестами, как описано в сопроводительном тексте. Разогреть грелку до 37 градусов по Цельсию непосредственно перед анестезией и прикрепить сверло черепа к держателю на стереотаксисной раме.

Подтвердите отсутствие реакции на педаль рефлекса у первой обезболивающей крысы и смонтируете крысу на стереотаксисную раму в положении, подверженном на грелке. Распоить ухо баров над ушным каналом, чтобы обеспечить голову, заботясь о том, что череп хранится горизонтально, чтобы избежать перекоса инъекции. Нанесите мазь на глаза животного и используйте микро бритву, чтобы удалить волосы из черепа.

Используйте маркер, чтобы нарисовать трехсантиметровую линию вдоль средней линии черепа от линии двустороннего бокового кантуса до 0,5 сантиметра за задней фонтанелью и использовать скальпель, чтобы сделать разрез средней линии вдоль отмеченной линии. Используйте ватный тампон, чтобы удалить кровь и поместить кусок хирургической ленты на каждой стороне лоскута кожи, чтобы разоблачить череп. Используйте новый тампон, пропитанный хлоридом натрия 0,9%, чтобы аккуратно удалить любую соединительной ткани из черепа и найти брегму.

Используйте тонкую ручку маркера наконечника, чтобы указать центральную точку брегмы в качестве точки происхождения, поместите сверло на шесть миллиметров передней задней, два миллиметра медиальной боковой. Используйте дрель, чтобы тщательно выполнить краниотомию диаметром один миллиметр. Далее, заменить дрель с 22 калибровочный зонд с изолированной оболочки с кончиком размещены два миллиметра над проксимальным концом оболочки.

Вставьте листы семь миллиметров в мозг и заранее зонд вдоль оболочки до верхней части зонда девять миллиметров ниже поверхности мозга. Подключите электроды к электрическому стимулятору и соедините анод с зондом. Затем подключись к катоду к уху крысы.

Затем включите электрический стимулятор и установите ширину одного импульса до 4 050 миллисекунд, напряжение до 50 вольт и ток до четырех миллиампер. Оставьте зонд в положении в течение пяти минут после стимуляции, прежде чем удалить устройство из мозга. Обложка краниотомии с костным цементом и дайте цементу высохнуть перед использованием 4,0 полиамидных шов нитей, чтобы закрыть рану.

После трех или четырех швов, галстук 2-1-1 стандартных хирургических узлов. Затем интраперитонически вводят крысе 250 микролитров пенициллина и следят за крысой каждые 15 минут до полного бодрствования, прежде чем вернуть животное в клетку. В этом анализе, шесть животных были подвергнуты операции, как попродемонстрировано, и шесть животных были обработаны в качестве контроля.

Кусочки мозга на этих изображениях были получены из одной крысы на группу. МРТ-сканирование показало, что инфаркт находился в основе пон, имитирующих антеролатеральные инфаркты у пациентов. Поскольку использовалась изолированная оболочка, инфаркт не наблюдался в коре головного мозга, мозжечка или среднего мозга.

Диффузионные взвешенные изображения также выявили острый инфаркт понтий. ТТК окрашивание было использовано для подтверждения инфаркта 24 часов после операции. Как и ожидалось, объем инфаркта был значительно выше в хирургической группе по сравнению с контрольной группой.

Поведенческие оценки измерялись до и после операции. По сравнению с контрольной группой, крысы с инфарктом понтии кружили влево. Значительные различия наблюдались в Лонга, Бердерсон, расположение конечностей, баланс пучка, и клей удаления соматосензорных тестов между тирады с понтийского инфаркта и контрольной группы крыс.

Любая конкретная область мозга будет уничтожена электрической стимуляцией.