Количественная оценка циркулирующей ДНК свиней в крови модели ксенотрансплантации

3.4K просмотров

Цитируется: 2

07:34 мин.

22 сентября 2020 г.

10.3791/61579-v

22 сентября 2020 г.

3.4K просмотров

Yangyang Deng^*¹^,² , Ming Zhou^*¹^,³ , Ying Lu¹ , Jiao Chen¹ , Zuhui Pu⁴ , Dongjing Yu¹^,⁵ , Yifan Dai⁶ , Yongqiang Zhan⁷ , Lisha Mou¹

¹Shenzhen Xenotransplantation Medical Engineering Research and Development Center, Institute of Translational Medicine, Shenzhen University Health Science Center, Shenzhen University School of Medicine, First Affiliated Hospital of Shenzhen University, Shenzhen Second People's Hospital, ²Xianning Hospital of Traditional Chinese Medicine, ³Liver-biotechnology (Shenzhen) Co., Ltd., ⁴Department of Radiology, Shenzhen University Health Science Center, Shenzhen University School of Medicine, First Affiliated Hospital of Shenzhen University, Shenzhen Second People's Hospital, ⁵Department of Life Sciences, University of Toronto, ⁶Jiangsu Key Laboratory of Xenotransplantation, Nanjing Medical University, ⁷Department of Hepatopancreatobiliary Surgery, Shenzhen University Health Science Center, Shenzhen University School of Medicine, First Affiliated Hospital of Shenzhen University, Shenzhen Second People's Hospital

^* These authors contributed equally

В этом протоколе были разработаны свиные специфические грунтовки, построены плазмиды, содержащие свиные фрагменты ДНК, и установлены стандартные кривые для количественной оценки. Используя вид-специфические грунтовки, cpsDNA было количественно qPCR в моделях трансплантации клетки свиньи к мыши и свинья-к-обезьяна модели трансплантации артерии.

Больше видео

Циркулирующая ДНК

количественная ПЦР

обработка образцов крови

агарозный электрофорез

построение стандартной кривой

видоспецифичные праймеры

мониторинг иммунного отторжения

набор для экстракции ДНК

Chapters in this video

0:04

Introduction

0:52

Isolating Genomic DNA

2:20

Verification of Primer Specificity

3:42

Standard Curve of cpsDNA

4:45

Quantitation of Circulating Pig-specific DNA

5:55

Results: PCR Validation of Porcine Specific Primers

6:51

Conclusion