6,660 Views
•
05:18 min
•
September 27, 2020
DOI:
Добро пожаловать в Рур-Университет Бохум, факультет спортивных наук. Сегодня мы продемонстрируем коллекцию биопсий скелетных мышц из верхнего отсека передней части человеческого мускулуса tibialis. Хотя методы биопсии являются эффективными при сборе мышечной ткани, волокна часто структурно повреждены таким образом, что оценка механики волокна трудно.
Мы представляем вариацию модифицированной техники Бергстрома, которая ограничивает повреждение волокна и максимизирует длину волокна, так что механическая оценка человеческих волокон может быть проведена. Демонстрация будет проводиться врач команды, д-р Маркус де Marees и ученых-исследователей, д-р Даниэль Хан и Энтони Хессель. Участник и врач сначала встречаются, чтобы рассмотреть и обсудить процедуру.
В случае удовлетворения участник подписывает договор добровольного информированного согласия. Проинструктируй субъекта лежать на спине и держать их конечности как можно более расслабленным. Dorsiflex ноги участника так, что tibialis передней является вялым.
Используйте ультразвуковой зонд для визуализации поперечной плоскости поверхностного отсека в передней части живота голени, определить область биопсии без основных артерий или нервов. Наконец, заметь глубину центрального апорероза так, чтобы коллекция иглы никогда не загнали мимо этой точки. Поверните ультразвуковой зонд, чтобы получить доступ к сагиттаальной плоскости идентифицированной целевой области.
Сохранить изображение объема мышц с фасциклами видны. Хирургические инструменты стерилизованы и подготовлены перед процедурой и полностью описаны в письменном протоколе. Игла Бергстром имеет окно близко к кончику.
В этой игле находится меньший полый трокар, который движется вверх и вниз по валу и режет мышцы при прохождении через окно иглы. Внутри трокара находится меньший ramrod, который используется, чтобы подтолкнуть биопсии из трокара. Чтобы вытащить мышцу в окно иглы, всасывающий шланг крепится к верхней части иглы, которая высасывает воздух из иглы и тянет мышцу через окно иглы отрицательным давлением.
Поручить участнику положить на стол процедуры и расслабить мышцы ног. Воспроизвести небольшой спинной лодыжки используется во время ультразвуковой визуализации, а затем исправить голеностопного сустава, чтобы свести к минимуму вращение во время процедуры. Бритье и дезинфицировать целевую область разреза.
Далее вводят поверхностную инъекцию 1,5 КК 2%ксилоцитина с эпинефрином. Он функционирует как локальный анестетик и сосуд-сужение. Время влияния составляет от 20 до 30 минут.
Удалите линию зрения пациента в место биопсии с помощью экрана. На ранее отмеченном месте биопсии сделайте один сантиметр проксимальным для дистального разреза стерильным скальпелем, который прорезает кожу и фасцию, обнажая основную мышечную ткань. Распоить биопсию иглы над разрезом и сориентировать его перпендикулярно коже.
Нажмите биопсии иглы от половины до одного сантиметра в мышцу. Там может быть некоторая светоустойчивость к движению иглы, но любое дополнительное сопротивление является ненормальным и часто указывает на невпать разрез. Затем сориентировать иглу на дистальное до проксимального положения, толкать иглу еще один на два сантиметра в мышцу.
Точная ориентация и глубина путешествия иглы будут конкретными участниками. И, таким образом, на основе ультразвукового обследования. Прикрепите шприц-шланг к игле биопсии и создайте отрицательное давление в игле.
Это привлечет мышечную ткань через окно иглы. Принудительно нажмите trocar над окном иглы для того чтобы excise мышца. Снимите иглу с ноги и перейти к технику для обработки тканей.
Используйте ленту закрытия раны или клей, чтобы в первую очередь закрыть рану и применить повязки для защиты раны от инфекции или механической ссадины. Поручите участнику встать и прогуляться. Они будут болит, но в состоянии ходить сразу.
Чтобы удалить ткань из окна биопсии, сначала разоблачить ткани, а затем погрузил кончик иглы в мерзкий заполнен физиологический буфер и энергично двигаться иглы, пока мышцы плавает из иглы в раствор. Процесс мышечной ткани для механической оценки с использованием стандартных методов. Недавно мы собрали 22 биопсии от участников, используя этот протокол.
Средняя урожайность коллекции составила от 100 до 200 миллиграммов годной к использования мышечной ткани. Каждая биопсия дала от 150 до 300 неповрежденных волокон длиной от трех до пяти миллиметров. Волокно пучки были химически кожурой с глицеролом, а затем активируется в растворе кальция в среднем саркомер длиной 2,7 микрона.
Биопсии, которые должным образом хранятся жизнеспособны для механического тестирования в течение нескольких месяцев. Эта процедура биопсии занимает один час. Осложнения от биопсии очень редки, но, скорее всего, это инфекция участка разреза.
Основная проблема в физиологии мышц человека и биомеханики заключается в том, чтобы различать различные адаптации мышечной производительности к физическим упражнениям и болезни. Для надлежащего выявления уровня волокна адаптации к физическим упражнениям или болезни, биопсии являются подходящим методом. Тем не менее, необходимо позаботиться о защите от повреждения мышц во время извлечения тканей.
Протокол, продемонстрированый здесь, обеспечивает высокую урожайность мышечной ткани для этих целей.
В этом техническом отчете описывается вариация модифицированной техники Бергстрёма для биопсии передней части musculus tibialis, которая ограничивает повреждение волокна.
09:45
Митохондриальная Изоляция от скелетных мышц
Видео по теме
28794 Views
12:55
Очистка прародителей из скелетных мышц
Видео по теме
18161 Views
07:13
Лазерная нанесенные травмы рыбок данио эмбриональных скелетных мышц
Видео по теме
10371 Views
11:57
Выделение и культура Индивидуальные мышечных волокон и их сателлитные клетки от взрослых скелетных мышц
Видео по теме
62268 Views
14:36
Оценка функции мышц-разгибателей мышц пальцев Longus
Видео по теме
41879 Views
11:22
Оценка кальция Sparks в малонарушенных скелетных мышечных волокон
Видео по теме
15044 Views
10:52
Выделение кровеносных сосудов, полученных мультипотентные прекурсоров от человека скелетных мышц
Видео по теме
11572 Views
05:58
Ткань Сортировка и морозильные моделей скелетных мышечных заболеваний
Видео по теме
39734 Views
10:12
Выделение митохондрий из минимальных количествах мыши скелетных мышц для измерения Высокая пропускная микропланшетов дыхания
Видео по теме
12681 Views
06:37
Иммуномаркировка дегенерации миофибра при биопсии мышц
Видео по теме
8573 Views
Read Article
Цитировать это СТАТЬЯ
Hessel, A. L., Hahn, D., de Marées, M. Collection of Skeletal Muscle Biopsies from the Superior Compartment of Human Musculus Tibialis Anterior for Mechanical Evaluation. J. Vis. Exp. (163), e61598, doi:10.3791/61598 (2020).
Copy