Современное согревающее/удерживающее устройство для эффективных инъекций хвостовых вен в модели грибкового сепсиса мышей

Нагревательное и удерживающее устройство предлагает оптимизированную технику для успешного проведения внутривенных инъекций в хвостовую вену, обеспечивает нагрев в контролируемой среде и эффективное обращение для проведения внутривенной инъекции в хвостовую вену. Прежде чем приступать к этой технике, важно ознакомиться с протоколом и попрактиковаться с инъекциями физраствора. Визуальная демонстрация дает возможность показать советы и предостережения, которые помогут в проведении процедуры.

Дзюнко Яно, постдок в моей лаборатории, настроит оборудование, а я продемонстрирую процедуру. Чтобы инициализировать устройство подогревателя, установите его на чистую плоскую столешницу и включите его, убедившись, что индикатор мощности термостата горит зеленым цветом. Затем поместите подстилочный материал внутрь камеры для нагрева, чтобы помещение оставалось сухим и сохраняло тепло.

Для настройки удерживающего устройства поместите удерживающий блок рядом с устройством подогрева и определите подходящие размеры конуса для животного. Вручную отрегулируйте ширину основания гибкого алюминиевого конуса, чтобы обеспечить достаточную фиксацию животного. В качестве альтернативы замените конус на специально подобранные модели, чтобы разместить животных разных размеров.

Установите термостат на нужную температуру с помощью диска управления, убедившись, что индикатор обогревателя горит красным цветом и что лампочка горит. Внимательно следите за отображением внутренней температуры, когда лампочка включена. Он активируется автоматически после достижения целевой температуры.

Расположите высоту конуса удерживающей платформы до оптимального для пользователя уровня с помощью ручки регулировки высоты. Как только целевая температура будет достигнута, осторожно перенесите животных из клетки в камеру подогрева. В камере подогрева можно безопасно содержать от четырех до шести мышей или одну крысу в течение максимум 20-30 минут.

Термической обработки в течение 5-10 минут достаточно, чтобы вызвать вазодилатацию и улучшить видимость хвостовых вен. Следите за животным на предмет любых признаков острого теплового стресса, таких как учащенное дыхание, вялость или прыжковое поведение при бегстве. Извлеките животное из камеры, подняв его за основание хвоста, и поместите его на конусное отверстие удерживающего блока.

Пока животное хватается передними лапами за дальний край конуса, осторожно оттяните хвост назад и пропустите хвост через открытую щель. Закрепите любую из задних ног, выступающих из конуса, так, чтобы боковая вена была видна в положении «12 часов». Возьмитесь за хвост на середину или 2/3 длины недоминантной рукой между большим и указательным пальцами, слегка натягивая боковую вену для поддержания положения хвоста и расширения сосудов.

Протрите кожу места инъекции марлевой губкой или тампоном, смоченным в 70% спирте. Держите шприц доминирующей рукой и расположите иглу параллельно хвосту. Введите иглу в направлении кровотока под углом от 10 до 25 градусов и продвигайтесь дальше в просвет вены, проникая на два-четыре миллиметра.

Медленно вводите раствор. В случае резистентности или появления белых волдырей над местом инъекции извлеките иглу и попробуйте сделать вторую инъекцию в место, расположенное выше первоначального места установки иглы. Если инъекция в одну латеральную вену не увенчалась успехом, переместите животное на противоположную сторону и сделайте больше попыток на контралатеральную вену.

Извлеките иглу и сильно надавите большим пальцем на место инъекции, чтобы предотвратить обратный ток введенного раствора или крови. Продолжайте наносить мягкое сжатие чистой марлей или салфеткой до тех пор, пока кровотечение не остановится. Верните животное в клетку и наблюдайте за ним в течение пяти минут, следя за тем, чтобы животное возобновило нормальную деятельность без дальнейшего кровотечения.

После того, как нагреватель камеры нагрева был активирован, тепловыделение лампочкой быстро повышает внутреннюю температуру в течение первых 5-15 минут, в зависимости от целевой температуры. Обогреватель отключает лампочку, если обнаруженная внутренняя температура превысила заданную температуру. Впоследствии устройство автоматически повторяет тепловой цикл для поддержания внутренней температуры.

В мышиной модели кандидоза кровотока, приводящего к сепсису, внутривенное введение Candida albicans у швейцарских мышей Вебстера вызвало быстрое начало сепсиса и распространение микроорганизмов, что привело к высокой смертности в течение трех-четырех дней. Напротив, животные могут быть защищены от сепсиса путем предварительной иммунизации или вакцинации авирулентным штаммом Candida dubliniensis, достигая более 95% выживаемости после смертельного внутривенного введения вирулентным C.albicans. У непривитых животных со смертельной инфекцией наблюдался значительный рост заболеваемости, вызванной сепсисом, в то время как у вакцинированной группы наблюдались минимальные симптомы после летального заражения.

Результаты по прогрессирующей смертности в сравнении с вакцино-опосредованной защитой были получены воспроизводимым путем в четырех независимых экспериментах. Будьте осторожны при расположении животного в конусе, чтобы вы правильно наклонили иглу для доступа к вене, отрегулировали иглу в вену и ввели в вену. Эта обтекаемая техника предлагает эффективные и действенные средства для проведения инъекций в хвостовую вену, которые улучшат научные результаты исследователей.