Использование куриного эмбриона в качестве мощного инструмента в оценке кардиотоксицитов развития

Всем привет. Меня является Цисяо Цзян, адъюнкт-профессор кафедры токсикологии Школы общественного здравоохранения Университета Циндао. От имени моей исследовательской группы я собираюсь представить активы использования куриного эмбриона в разработке нашей оценки кардиотоксичности.

Куриный эмбрион - это классическая модель развития, которая имеет множество преимуществ, таких как легкая манипуляция, высокая доступность, закрытая независимая система и так далее. Работа с несколькими загрязнителями окружающей среды, такими как фенольные дубильные кислоты. Дизельные выхлопные газы, особенно на углеродных нанотрубках.

У нас есть несколько методов воздействия, установленных в лаборатории, но по более широкой причине функциональные оценки также регулярно выполняются. В этом видео я покажу вам подробности, методы воздействия и методы морфологической функциональной оценки. Не стесняйтесь обращаться к нам, если вы заинтересованы.

Спасибо. Вот наши методы воздействия, которые я могу представить вам. Теперь первый метод, который я собираюсь ввести, это инъекция воздушной клетки, где вы будете непосредственно вводить в воздушную клетку.

Очистите поверхность яиц полийодидным раствором. Это коммерчески доступный полийодидный раствор, разбавленный деионизированной водой, 1/5. А затем я высушиваю яичную скорлупу папиросной бумагой, без скрабирования.

Это важно, потому что очистка сломает их защитный слой покрытия на внешней стороне оболочки. Вычищели все яйца в темной комнате и помечаем воздушную ячейку карандашом. Исключите яйца с трещинами на скорлупе.

Также исключите яйца с воздушными клетками сбоку. Если у него тупой наконечник, они вряд ли вылупятся нормально. Продезинфицируйте область воздушной ячейки, а также металлический зонд, с 75% спиртом.

Протрите их насухо, а затем просверлите зондом небольшое отверстие в центре области воздушной ячейки. Не втыкайте зонд глубоко в воздушную ячейку. Вместо этого разбейте оболочку только кончиком зонда.

Если отверстие все еще недостаточно велико, снова разбейте оболочку в непосредственной близости от существующего отверстия, пока оно не будет достаточно большим, чтобы вы могли вставить наконечник. Вставьте наконечник пипетки в отверстие, а наконечник коснется внутренней мембраны. Медленно вводят смесь и удерживайте ее там не менее 10 секунд.

Это делается для того, чтобы дозируемое масло было полностью дозировано. А затем снимите наконечник. Теперь запечатайте отверстие щеткой и каплей расплавленного парафина.

Будьте осторожны, чтобы не капать расплавленный парафин во внутреннюю память. После запечатывания поместите яйца в инкубатор до тех пор, пока они не достигнут желаемой эмбриональной стадии. Второй, метод, который я собираюсь ввести, это микроункциркул.

Прежде всего, яйца должны быть очищены и обработаны, как описано в разделе впрыска воздуха. Эту процедуру нужно проводить в стерилизованного капюшоне. Стерилизуйте область воздушных ячеек и инструментов ацетоном.

Просверлите небольшое отверстие в центре области воздушной ячейки с помощью металлического зонда. Не втыкайте зонд глубоко в воздушную ячейку, иначе внутренняя память может быть повреждена. Затем используйте тот же процесс, чтобы аккуратно увеличить отверстие, пока диаметр не составляет примерно два миллиметра.

Это может позволить подтвердить соотношение внутренней памяти. Затем загрузите раствор в микроинжектор и осторожно вставьте иглу через отверстие во внутреннюю мембрану примерно на три миллиметра. Аккуратно дозируйте раствор, а затем удалите иглу.

Держите иглу как можно более перпендикулярной. Тонко запечатайте отверстие небольшим кусочком ленты. Полностью закройте отверстие, чтобы предотвратить обезвоживание эмбриона и его гибель во время последующей инкубации.

Третий метод, который я собираюсь ввести, это инфузия воздушных клеток. где вы закапываете газовое загрязнение в воздушную ячейку. Очистите и обработайте яйца, как описано в разделе инъекции воздушных клеток.

А затем можно читать яйца до 17-го эмбрионального дня. Обработайте яйцеклетки на эмбриональном 17-м дне, чтобы отметить область воздушной клетки. На 18-й эмбриональный день выньте яйца из инкубатора, стерилизуйте область воздушной клетки и инструменты ацетоном.

А затем аккуратно просверлить два небольших отверстия с двух сторон воздушной ячейки. Один из них предназначен для инъекции газа или аэрозоля. Другой — для расширения нашего воздуха.

Тщательно контролируйте размер отверстий, чтобы боковой стороны инъекционного отверстия было достаточно для введения иглы катетера, при этом диаметр расширяющегося отверстия должен быть немного больше. Примерно один миллиметр в диаметре. Теперь это мешок для образцов, который мы используем для удержания целевого газа или аэрозоля.

Вы можете заменить его любым устройством, которое вы используете. Аккуратно влейте в шприц 10 мл газа или аэрозоля. А затем осторожно прикрепите шприц к нашей катетерной игле с помощью внутреннего пульта иглы, чтобы он был мягким.

Аккуратно вставьте эту иглу катетера в инфузионный отверстие. Как только он там появится, надавите на иглу катетера. Это необходимо для минимизации утечки из места инъекции.

Другой палец можно поставить с отверстием для выталкивания для подтверждения инфузии. Если делать настой осторожно, то поток воздуха из выталкивного отверстия должен легко ощущаться. Это оригинальный воздух в воздушной ячейке, который выбрасывается.

Когда инфузия будет сделана, немедленно запечатайте оба отверстия. Эти ленты и возвращают яйца в инкубатор. Я могу представить наш процесс оценки конечных точек.

Полностью обезболить животных пентобарбиталом 33 мг/кг. IP-инъекция проверяется открытиями. Затем положите кур на операционный стол.

Стерилизуют область живота и электроды этанолом. Затем вводят два игольчатых электрода с двух сторон брюшной подсистемы непрерывно. Следите за тем, чтобы иглы не попадали в брюшную полость, немного приподняв кожу.

И вставьте иглу оттуда. После введения осторожно толкайте иглу вперед, пока она не достигнет боковой стороны грудной полости. Следите за тем, чтобы игла не уходила глубоко в тело и не торчала из кожи.

Затем произведите измерения с помощью электрокардиографического прибора. Можно использовать и другие инструменты семинарии, способные к ЭКГ. Это наш второй метод оценки конечной точки для отображения motrin.

Это поперечное сечение сердца на пути HME. Это правильный желудочек, с помощью которого мы будем измерять. Для этого мы используем две линейки.

Правитель 1 и правитель 2. Теперь мы просто копируем линейку на экран и изменяем ее размер до соответствующего размера, а затем поворачивают ее. И перемещаем его так, чтобы два конца горизонтальной линии опираются на 2 конца 3 стенок правого желудочка.

И теперь у нас есть семь измерительных линий, которые проходят через нашу стенку правого желудочка. Теперь мы копируем вторичную линейку и на картинку. Мы также немного изменяем его размер и поворачивают и заменяем его, чтобы он был размещен одинаково.

Эта горизонтальная линия идет параллельно наружной стенке правого желудочка. А перпендикулярный будет проходить через точку, где линии белого вещества линейки встречаются с внутренней стенкой или правым желудочком. И затем мы делаем измерительные точки, чтобы его можно было измерить позже с помощью изображения J.Мы повторяем этот процесс 7 раз на образец, так что наше репрезентативное измерение правого желудочка.

Я покажу вам краткое изложение нынешних результатов. Это инъекция PFOA в яйцеклетку перед инкубацией, и вы можете видеть, что с увеличением концентрации LPF в сыворотке крови эффективно увеличивается. Согласно демонстрации, эффективности, микроуколации.

Вы можете видеть, что A - это контроль, а B - это место, где антивирусный экспресс в большой флуоресценции q белка был введен. Вы можете увидеть сильную флуоресценцию. И это демонстрация эффективности инфузии эпителия.

Вы можете видеть, что при инфузии наблюдались драматические волоконно-оптические изменения в ткани миокарда. Хорошо. А еще можно увидеть, что интервалы R-R вылупляющихся цыплят 0, 1 и 2 недели. Он также значительно изменился после инфузии дизельным выхлопом.

Указывая, что вы учитываете это, этот метод. Здесь же можно увидеть, что эффективность инфузии эпителия в данном примере. Вы можете видеть, что правые желудочки сердца эффективно увеличивались после того, как аэрозоль был наполнен выхлопными газами дизельного топлива.

И, конечно же, здесь мы используем гистоморфометрические методы. Мы просто показываем вам. Это достаточно эффективно. Хорошо.

Это все методы, которые я собираюсь вам представить. Я надеюсь, что это может облегчить работу других людей с куриным эмбрионом в качестве мощного исследовательского инструмента в токсикологии развития. Хорошего дня.