ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Авторы хотели бы поблагодарить д-ра Брэндона Хелфилда за помощь в строительстве газообменника и д-ра Миффи Хока Ян Ченга за технические обсуждения. Авторы хотели бы поблагодарить следующие источники финансирования: стипендию для выпускников Онтарио, Канадские институты исследований в области здравоохранения, Научно-исследовательский институт Терри Фокса и Фонд рака принцессы Маргарет.

<ol><li>Gramiak, R., Shah, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Echocardiography+of+the+aortic+root%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Radiology%22%5BJournal%5D)">Echocardiography of the aortic root.</a> Investigative Radiology. 3 (5), 356-366 (1968).</li>
<li>Ferrara, K., Pollard, R., Borden, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasound+microbubble+contrast+agents%3A+fundamentals+and+application+to+gene+and+drug+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Biomedical+Engineering%22%5BJournal%5D)">Ultrasound microbubble contrast agents: fundamentals and application to gene and drug delivery.</a> Annual Review of Biomedical Engineering. 9, 415-447 (2007).</li>
<li>Bing, K. F., Howles, G. P., Qi, Y., Palmeri, M. L., Nightingale, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood-brain+barrier+%28BBB%29+disruption+using+a+diagnostic+ultrasound+scanner+and+Definity+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+in+Medicine+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Blood-brain barrier (BBB) disruption using a diagnostic ultrasound scanner and Definity in mice.</a> Ultrasound in Medicine and Biology. 35 (8), 1298-1308 (2009).</li>
<li>Helfield, B. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Investigating+the+accumulation+of+submicron+phase-change+droplets+in+tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+in+Medicine+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Investigating the accumulation of submicron phase-change droplets in tumors.</a> Ultrasound in Medicine and Biology. 49 (10), 2891(2020).</li>
<li>Sheeran, P. S., Luois, S. H., Mullin, L. B., Matsunaga, T. O., Dayton, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Design+of+ultrasonically-activatable+nanoparticles+using+low+boiling+point+perfluorocarbons%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Design of ultrasonically-activatable nanoparticles using low boiling point perfluorocarbons.</a> Biomaterials. 33 (11), 3262-3296 (2012).</li>
<li>Sheeran, P. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+of+generating+submicrometer+phase-shift+perfluorocarbon+droplets+for+applications+in+medical+ultrasonography%5BTitle%5D)+AND+%22IEEE+Transactions+on+Ultrasonics%2C+Ferroelectrics%2C+and+Frequency+Control%22%5BJournal%5D)">Methods of generating submicrometer phase-shift perfluorocarbon droplets for applications in medical ultrasonography.</a> IEEE Transactions on Ultrasonics, Ferroelectrics, and Frequency Control. 64 (1), 252-263 (2016).</li>
<li>Yoo, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+encapsulation+on+in+vitro+and+in+vivo+performance+of+volatile+nanoscale+phase-shift+perfluorocarbon+droplets%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+in+Medicine+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Impact of encapsulation on in vitro and in vivo performance of volatile nanoscale phase-shift perfluorocarbon droplets.</a> Ultrasound in Medicine and Biology. 44 (8), 1836-1852 (2018).</li>
<li>Sheeran, P. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Image-guided+ultrasound+characterization+of+volatile+sub-micron+phase-shift+droplets+in+the+20-40+MHz+frequency+range%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+in+Medicine+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Image-guided ultrasound characterization of volatile sub-micron phase-shift droplets in the 20-40 MHz frequency range.</a> Ultrasound in Medicine and Biology. 42 (3), 795-807 (2016).</li>
<li>Sheeran, P. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((More+than+bubbles%3A+creating+phase-shift+droplets+from+commercially+available+ultrasound+contrast+agents%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+in+Medicine+and+Biology%22%5BJournal%5D)">More than bubbles: creating phase-shift droplets from commercially available ultrasound contrast agents.</a> Ultrasound in Medicine and Biology. 43 (2), 531-540 (2017).</li>
<li>Chen, C. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeted+drug+delivery+with+focused+ultrasound-induced+blood-brain+barrier+opening+using+acoustically-activated+nanodroplets%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Controlled+Release%22%5BJournal%5D)">Targeted drug delivery with focused ultrasound-induced blood-brain barrier opening using acoustically-activated nanodroplets.</a> Journal of Controlled Release. 172 (3), 795-804 (2013).</li>
<li>Wu, S. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Focused+ultrasound-facilitated+brain+drug+delivery+using+optimized+nanodroplets%5BTitle%5D)+AND+%22Physics+in+Medicine+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Focused ultrasound-facilitated brain drug delivery using optimized nanodroplets.</a> Physics in Medicine and Biology. 63 (3), 035002(2018).</li>
<li>Lee, J. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasound-enhanced+siRNA+delivery+using+magnetic+nanoparticle-loaded+chitosan-deoxycholic+acid+nanodroplets%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Healthcare+Materials%22%5BJournal%5D)">Ultrasound-enhanced siRNA delivery using magnetic nanoparticle-loaded chitosan-deoxycholic acid nanodroplets.</a> Advanced Healthcare Materials. 6 (8), 1601246(2017).</li>
<li>Cao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drug+release+from+phase-changeable+nanodroplets+triggered+by+low-intensity+focused+ultrasound%5BTitle%5D)+AND+%22Theranostics%22%5BJournal%5D)">Drug release from phase-changeable nanodroplets triggered by low-intensity focused ultrasound.</a> Theranostics. 8 (5), 1327-1339 (2018).</li>
<li>Huynh, E., Jin, C. S., Wilson, B. C., Zheng, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aggregate+enhanced+trimodal+porphyrin+shell+microbubbles+for+ultrasound%2C+photoacoustic%2C+and+fluorescence+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Bioconjugate+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Aggregate enhanced trimodal porphyrin shell microbubbles for ultrasound, photoacoustic, and fluorescence imaging.</a> Bioconjugate Chemistry. 25 (4), 796-801 (2014).</li>
<li>Zheng, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low-density+lipoprotein+reconstituted+by+pyropheophorbide+cholesteryl+oleate+as+target-specific+photosensitizer%5BTitle%5D)+AND+%22Bioconjugate+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Low-density lipoprotein reconstituted by pyropheophorbide cholesteryl oleate as target-specific photosensitizer.</a> Bioconjugate Chemistry. 13 (3), 392-396 (2002).</li>
<li>Dhaliwal, A., Zheng, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+accessibility+of+EPR-insensitive+tumor+phenotypes+using+EPR-adaptive+strategies%3A+Designing+a+new+perspective+in+nanomedicine+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Theranostics%22%5BJournal%5D)">Improving accessibility of EPR-insensitive tumor phenotypes using EPR-adaptive strategies: Designing a new perspective in nanomedicine delivery.</a> Theranostics. 9 (26), 8091-8108 (2019).</li>
<li>Goertz, D. E., de Jong, N., vander Steen, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Attenuation+and+size+distribution+measurements+of+Definity+and+manipulated+Definity+populations%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+in+Medicine+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Attenuation and size distribution measurements of Definity and manipulated Definity populations.</a> Ultrasound in Medicine and Biology. 33 (9), 1376(2007).</li>
<li>Pellow, C., Acconcia, C., Zheng, G., Goertz, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Threshold-dependent+nonlinear+scattering+from+porphyrin+nanobubbles+for+vascular+and+extravascular+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Physics+in+Medicine+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Threshold-dependent nonlinear scattering from porphyrin nanobubbles for vascular and extravascular applications.</a> Physics in Medicine and Biology. 63 (21), 215001(2018).</li>
<li>Kwan, J. J., Borden, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipid+monolayer+collapse+and+microbubble+stability%5BTitle%5D)+AND+%22Advances+in+Colloid+and+Interface+Science%22%5BJournal%5D)">Lipid monolayer collapse and microbubble stability.</a> Advances in Colloid and Interface Science. 183, 82-99 (2012).</li>
<li>Overchuk, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subtherapeutic+Photodynamic+Treatment+Facilitates+Tumor+Nanomedicine+Delivery+and+Overcomes+Desmoplasia%5BTitle%5D)+AND+%22Nano+Letters%22%5BJournal%5D)">Subtherapeutic Photodynamic Treatment Facilitates Tumor Nanomedicine Delivery and Overcomes Desmoplasia.</a> Nano Letters. 21 (1), 344-352 (2021).</li>
<li>Feshitan, J., Chen, C. C., Kwan, J. J., Borden, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microbubble+size+isolation+by+differential+centrifugation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Colloid+and+Interface+Science%22%5BJournal%5D)">Microbubble size isolation by differential centrifugation.</a> Journal of Colloid and Interface Science. 329 (2), 316-324 (2009).</li>
<li>Paproski, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Porphyrin+nanodroplets%3A+Sub-micrometer+ultrasound+and+photoacoustic+contrast+imaging+agents%5BTitle%5D)+AND+%22Small%22%5BJournal%5D)">Porphyrin nanodroplets: Sub-micrometer ultrasound and photoacoustic contrast imaging agents.</a> Small. 12 (3), 371-380 (2016).</li>
<li>Periyasamy, P. C., Leijten, J. C. H., Dijkstra, P. J., Karperien, M., Post, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanomaterials+for+the+local+and+targeted+delivery+of+osteoarthritis+drugs%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Nanomaterials%22%5BJournal%5D)">Nanomaterials for the local and targeted delivery of osteoarthritis drugs.</a> Journal of Nanomaterials. 2021, 1-13 (2012).</li>
<li>Matsumura, Y., Maeda, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+concept+for+macromolecular+therapeutics+in+cancer+chemotherapy%3A+mechanism+of+tumoritropic+accumulation+of+proteins+and+the+antitumor+agent+smancs%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">A new concept for macromolecular therapeutics in cancer chemotherapy: mechanism of tumoritropic accumulation of proteins and the antitumor agent smancs.</a> Cancer Research. 46 (12), 6387-6392 (1986).</li>
</ol>

Авторам нечего раскрывать.

Ультразвуковая визуализация является неинвазивной, неионизирующей формой медицинской визуализации, которая использует акустические волны. В то время как ультразвуковые сканеры более портативны и могут предоставлять изображения в режиме реального времени, ультразвуковая визуализация может страдать от низкой контрастности, что затрудняет для сонографистов надежное различение аналогично эхогенных патологических особенностей. Чтобы противодействовать этому ограничению, микропузырьки могут быть введены хозяину для улучшения сосудистого контраста. Микропузырьки представляют собой заполненные газом контрастные вещества микронных размеров, которые очень эхогенны для акустических волн и могут обеспечивать повышенную контрастность сосудов1,2. Оболочки и газовые ядра микропузырьков могут быть адаптированы для различных применений, таких как визуализация, тромболизис, пермеабилизация клеточной мембраны или переходное сосудистое отверстие2.
Недостатком микропузырьков является их короткий период полураспада циркуляции. Например, клинически доступные перфлутреновые липидные микросферы имеют период полураспада только 1,3минуты 3. Для длительных сеансов визуализации необходимы множественные инъекции микропузырьков. Еще одним недостатком микропузырьков является их большой диаметр. В то время как перфлутреновые липидные микросферы имеют диаметр от 1 до 3 мкм, достаточно маленькие, чтобы циркулировать в сосудистой ткани, они слишком велики, чтобы экстравазироваться и пассивно накапливаться в тканях, представляющих интерес, таких как опухоли4. Одна из стратегий преодоления этих ограничений заключается в конденсации газовых микропузырьков в более мелкие капли с жидким ядром5,6. Хотя капли не являются эхогенными в своем жидком состоянии, они могут испаряться в микропузырьки при воздействии ультразвука с достаточно высоким пиковым отрицательным давлением, восстанавливая их способность обеспечивать контраст. Это позволяет капельке воспользоваться преимуществами более благоприятной фармакокинетики небольшого жидкого ядра, сохраняя при этом способность обеспечивать контраст при инсонировании и без изменения химического состава4,7.
Декафторбутан является идеальным перфторуглеродным соединением для фазового сдвига между газообразным и жидким состояниями5,6,7. Декафторбутан позволяет конденсировать микропузырьки в капли только с понижением температуры, тогда как менее плотные перфторуглероды требуют дополнительного герметизации5. Этот щадящий метод минимизирует разрушение пузырьков при конденсации7,8,9. Поскольку их ядра жидкие, капли не эхогенны и невидимы для ультразвука. Однако при применении достаточной акустической или тепловой энергии жидкие ядра могут испаряться обратно в газообразное состояние, генерируя эхогенные микропузырьки8. Это испарение позволяет контролировать, когда и где генерировать микропузырьки.
В то время как капли полезны для пассивного накопления, испарения in situ или улучшения проницаемости клеток4,капли (и их фрагменты) не могут быть визуализированы или количественно определены ex vivo. Поэтому поддающиеся количественной оценке сопутствующие диагностические агенты, такие как флуоресцентный4,10,11,магнитные частицы12,оптически абсорбирующие агенты13,используются в качестве аналога для измерения доставки капель в интересующие ткани. Например, Helfield et al. использовали коинъекцию флуоресцентных наношарик для количественной оценки гистологического изображения органов мыши, поскольку капли не могли быть обнаружены флуоресцентно4. Недостатком сопутствующих диагностических средств является то, что отслеживаемый компонент может действовать независимо от капли в зависимости от ее индивидуального фармакокинетического профиля.
К счастью, оболочку из микропузырьков и капель можно настроить. Например, Huynh et al. продемонстрировали ультразвуковые контрастные вещества с порфирин-липидными оболочками, создающими мультимодальные микропузырьки14. Порфирины представляют собой класс органических соединений с ароматической макроциловой структурой14,15. Они являются оптически абсорбирующими, флуоресцентными и могут быть хелатированы к широкому спектру металлов для лучевой терапии, визуализации на основе радионуклидов или количественной оценки на основе следовых металлов14. Одним из примеров порфирина является пирофеофорбид (Pyro). Конъюгируя Pyro с липидами, включение pyro-lipids в микропузырьки или капли позволяет их визуалировать и отслеживать с помощью нескольких модальностей: акустически, флуоресцентно и через поглощение14. Этот мультимодальный контрастный агент может быть использован для отслеживания и количественной оценки накопления. Это может устранить необходимость в сопутствующих диагностических агентах, поскольку поддающийся количественной оценке компонент теперь сопряжен с оболочкой, что позволяет более точно определять доставку16.
Здесь изложен протокол создания мультимодальных капель порфирина с фазовым переходом. Поскольку ультразвуковые контрасты агентов могут быть использованы в качестве платформы для доставки лекарств к тканям, представляющим интерес, таким как опухоли2,4,расширение их обнаруживаемости за пределы ультразвука может оказаться полезным для количественной оценки эффективности доставки. Целью этих капель является обеспечение отслеживаемых ультразвуковых контрастных веществ, способных к пассивному накоплению in vivo, испарению in situ и акустике, а также с потенциалом для количественной оценки биораспределения или накопления из органов ex vivo без опоры на вторичные датчики. Методы характеризации также изложены для демонстрации потенциала капель порфирина в качестве датчиков биораспределения. Также обсуждаются эффекты пиролипидной нагрузки в оболочку (от 0% до 50% по молярному соотношению).

<table><tbody><tr><td>1,2-дистеароил-sn-глицеро-3-фосфоэтаноламин-N-[метокси(полиэтиленгликоль)-5000] (соль аммония)</td> <td>Avanti Polar Lipids</td><td>880220</td><td>Также известен как "DSPE-PEG5K"</td></tr> <tr><td>1-стеароил-2-гидрокси-sn-глицеро-3-фосфохолин</td><td>Avanti Полярные липиды</td><td>855775</td><td>также известен как "DSPC"</td></tr> <tr><td>Алюминиевая фольга</td><td>любой марки</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Алюминиевые уплотнения, Отрывной</td><td>VWR</td><td>16171-840</td><td>Стандартный алюминий, наружный диаметр 13 мм</td></tr><tr><td>Ультразвуковая ванна</td><td>Любая марка</td><td></td><td>Способна&nbsp; ультразвуковая обработка и нагрев до 70 °°; </td></tr><tr><td>C,Флаконы с винтовой крышкой Bio-Stor</td><td>National Scientific</td><td>BS20NABP</td><td>пластик, 2 мл с юбкой, с уплотнительным кольцом</td></tr><tr><td>из боросиликатного стекла прозрачные пробирки</td><td>сыворотки VWR</td><td>16171-285</td><td>3 мл, диаметр внутреннего горла 7 мм, диаметр наружного горла 13 мм флакон</td></tr><tr><td>для образца боросиликатного стекла с фенольной винтовой крышкой</td><td>VWR</td><td>66011-020</td><td>1,85 мл, короткая форма, внешний диаметр 12 мм, высота 35 мм, размер</td></tr> <tr><td>колпачка 8-425Флакон из боросиликатного стекла с завинчивающейся крышкой</td><td>Любая марка</td><td></td><td>Размеры будут зависеть от желаемых объемов</td></tr><tr><td>Хлороформ&nbsp;</td><td>Любая марка</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Coulter Counter Разбавитель элктролита</td><td>Любая марка</td><td></td><td>Совместима с Coulter Counter</td></tr><tr><td>Декафторбутан (C4F10)</td><td>FluoroMed</td><td>355-25-9</td><td></td></tr><tr><td>Деионизированная вода</td><td>любой марки Сухой</td> лед (углекислый газ) любой маркиЛюбая <td></td><td></td></tr><tr><td></td><td>марка</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Анализатор частиц с динамическим рассеянием света (DLS)</td> любой <td>марки</td><td></td><td>Возможность контроля температуры</td></tr><tr><td>E-Z Crimmer, 13 мм</td><td>Wheaton</td><td>W225302</td><td>13 мм Стандартные алюминиевые уплотнения</td></tr><tr><td>E-Z Decapper, 13 мм</td><td>Wheaton</td><td>W225352</td><td>13 мм Стандартные алюминиевые уплотнения</td></tr><tr><td>Флуоресцентный спектрофотометр</td><td>любой марки</td><td></td><td>Способен к возбуждению от 400 до 600 и обнаружению излучения от 300 до 800 нм, детектор перпендикулярно лазерному источнику</td></tr><tr><td>Флуоресцентный спектрофотометр совместимая кювета</td><td>любой марки</td><td></td><td>может вмещать не менее 2 мл, способна на 300 до 800 нм, все четыре стороны есть&nbsp; оптические окна&nbsp;</td></tr><tr><td>Газообменник</td><td>собственного производства</td><td></td><td>обратитесь к дополнительной информации - "Другие протоколы и данные" для получения инструкций по сборке.</td></tr><tr><td>Стеклянные шприцы</td><td>любой марки</td><td></td><td>Размеры будут зависеть от желаемых объемов</td></tr><tr><td>GLWR Custom Aperture Tube 10 мкм</td><td>Beckman Coulter</td><td>B42812</td><td>10 & микро; m апертура, совместимая с Beckman Coulter MultiSizer 4e</td></tr><tr><td>Glycerin</td><td>Любая марка</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Изолированные контейнеры из пенополистирола с крышками</td><td>Изопропанол любой марки</td><td></td><td></td></tr> Резиновые пробки любой <tr><td></td><td>марки</td><td></td><td></td></tr> типа <tr><td>лиофилизации</td><td>VWR</td><td>71000-060</td><td>7 мм Внутренний диаметр горла, 13 мм Диаметр наружного горлышка, 2 ножки, Хлорбутиловая</td></tr><tr><td>мембрана Мембранный вакуумный насос</td><td>Sartorius Stedim</td><td>16694-1-60-06</td><td>Регулируемое давление</td></tr><tr><td>Металлические щипцы</td><td>любой марки</td> Метанол любой марки <td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>MS250 21 МГц Линейная антенная решетка Ультразвуковой преобразователь</td><td>VisualSonics</td><td></td><td>21 МГц, способный к B-режиму и нелинейной визуализации.</td></tr><tr><td>MultiSizer 4e</td><td>Beckman Coulter</td><td></td><td>Способен к размерам от 0,2 и микро; м до 6 & микро; m</td></tr><tr><td>Nalgene Быстроточные стерильные одноразовые вакуумные фильтрующие установки</td><td>Thermo Scientific</td><td>567-0010</td><td>Мембрана из полиэфирсульфона (PES), 0,1&мкм; м размер пор, объем 1000 мл. Поскольку Isoton II не стерилен, можно использовать фильтрующие блоки несколько раз</td></tr><tr><td>Иглы, обычные</td><td>BD</td><td>305176</td><td>20 калибра, длина 1,5 дюйма</td></tr><tr><td>Газообразный азот</td><td>любой марки</td><td></td><td>Убедитесь, что есть регулирующие клапаны и трубки для направления потока. Настройка будет зависеть от бренда и источника.</td></tr><tr><td>Парапленка</td><td>любой марки</td><td></td><td>называется «восковая пленка» в протоколе.</td></tr><tr><td>Фосфатно-солевой буфер (PBS)</td><td>Любая марка</td><td></td><td>1X, 7,4 pH</td></tr><tr><td>Любая</td><td>марка</td><td></td><td>Размеры будут зависеть от желаемых объемов</td></tr><tr><td>Наконечники для пипеток</td><td>Любая марка</td><td></td><td>Размеры будут зависеть от желаемых объемов</td></tr><tr><td>Пластиковые шприцы</td><td>любой марки</td><td></td><td>1 мл, 3 мл и 30 мл. С соединениями Luer Lock</td></tr><tr><td>Мембранный фильтр из полиэфирсульфона (PES)</td> любой <td>марки</td><td></td><td>0,2 &; m размер пор</td></tr><tr><td>Пропиленгликоль</td><td>Любая марка</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Пирофеофорбид конъюгированный 1-стеароил-2-гидрокси-sn-глицеро-3-фосфохолин</td><td>Сделано на собственном производстве</td><td></td><td>Также известен как "Pyro-SPC". Для обобщения обратитесь к разделу "Дополнительная информация - Другие протоколы и данные".</td></tr><tr><td>Термометр</td><td>любой марки</td><td></td> <td>(от -20 до 100°; C)</td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Любая торговая марка</td><td></td><td>Также известная как "2-[4-(2,4,4-триметилпентан-2-ил)фенокси]этанол"</td></tr><tr><td>Сверхчистая вода</td><td>любой марки</td><td></td><td>Тип 1 Чистота</td></tr><tr><td>Ультрафиолет; Видимый (UV-Vis) спектрофотометр</td><td>любой марки</td><td></td><td>Способен поглощать от 300 до 800 нм, разрешение не менее 0,5 нм</td></tr><tr><td>Ультрафиолет; Видимый (UV-Vis) спектрофотометр совместимый кювет, 1 см Длина пути</td><td>Любая марка</td><td></td><td>Может вместить не менее 2 мл, способен выдерживать вакуумный эксикатор от 300 до 800 нм</td></tr><tr><td></td><td>Любая марка</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Vevo 2100 Платформа ультразвуковой визуализации Vevo 2100</td><td>Система</td><td></td><td>доклинической ультразвуковой визуализации</td></tr><tr><td>Vialmix</td><td>Bristol-Myers-Squibb</td><td></td><td>В протоколе называется «механическая мешалка». Перемешивает в течение 45 с.</td></tr><tr><td>Вихревой смеситель</td><td>любой марки</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

Синтез и характеристика мультимодальных капель порфирина с фазовым переходом

Synthesis and Characterization of Multi-Modal Phase-Change Porphyrin Droplets

Капли фазового изменения представляют собой класс ультразвуковых контрастных веществ, которые могут превращаться в эхогенные микропузырьки in situ с применением достаточной акустической энергии. Капли меньше и стабильнее, чем их микросубблы. Однако традиционные ультразвуковые контрастные вещества не отслеживаются за пределами измерений акустической обратной связи, что затрудняет количественное определение биораспределения или накопления контрастных веществ ex vivo. Исследователям, возможно, придется полагаться на флуоресцентные или оптически абсорбирующие сопутствующие диагностические частицы, чтобы сделать вывод о биораспределении. Целью данного протокола является детализация этапов создания мультимодальных капель порфирина с фазовым переходом с использованием метода конденсации. Порфирины представляют собой флуоресцентные молекулы с отчетливыми полосами поглощения, которые могут быть конъюгированы с липидами и включены в капли для расширения универсальности капель, обеспечивая более надежное биораспределения при сохранении акустических свойств. Семь составов с различным содержанием порфирин-липидов и базовых липидов были изготовлены для исследования распределения микросубблок и капель по размерам. Характеристики, подходящие для порфиринсодержащих структур, также описаны в протоколе, чтобы продемонстрировать их аналитическую универсальность в растворе. Размер показал, что средние диаметры после конденсации были в 1,72-2,38 раза меньше, чем популяции прекурсоров. Характеристика поглощения показала, что неповрежденные сборки имели пик Q-диапазона 700 нм, в то время как разрушенные образцы имели пик поглощения на уровне 671 нм. Флуоресцентная характеристика показала, что неповрежденные 30% порфирин-липидных сборок были флуоресцентно закалены (>97%), при этом восстановление флуоресценции достигалось при разрушении. Акустическая испарение показало, что капли порфирина не имеют эхогенных при более низких давлениях и могут быть преобразованы в эхогенные микропузырьки с достаточным давлением. Эти характеристики показывают потенциал капель порфирина для устранения необходимости в сопутствующих диагностических стратегиях на основе абсорбции или флуоресценции для количественной оценки биораспределения ультразвукового контрастного агента для доставки или терапевтического применения in vivo или ex vivo.

Предварительно конденсированные, выбранные по размеру микросуббные образцы(n = 3) и образцы капель с постконденсацией(n = 3) были рассчитаны на счетчике коултера (CC) с диафрагмой 10 мкм. Ограничением апертуры 10 мкм является то, что она не может измерять частицы размером менее 200 нм, что может искажать средний размер и концентрацию. На рисунке 4 показаны данные о размерах для каждого из составов пиролипидного содержания. В таблице 1 приведены статистические данные, основанные на данных о размерах. Используя соотношение средних диаметров до и после конденсации, результаты показали, что 0% пиролипидная композиция имела наименьшее смещение среднего диаметра при 1,72 ± 0,02. 50% пиролипидная композиция имела наибольший средний диаметр в 2,38 ± 0,08. Образец 1% пиролипидных капель имел самую высокую наблюдаемую концентрацию при (2,71 ± 0,13) × 1010 / мл, в то время как 40% образец пиролипидных капель имел самую низкую наблюдаемую концентрацию при (7,36 ± 0,81) × 109 / мл. Данные о размерах показали, что 10% образец пиролипидных капель имел наименьший пиковый диметр при 261 ± 13 нм, в то время как 50% образец пиролипидных капель имел самый большой при 390 ± 55 нм. Как правило, по мере увеличения содержания пиролипидов концентрация уменьшалась, а средний диаметр увеличивался. Поскольку постконденсированные образцы основаны на микросубблном образце предшественника, тенденция наблюдалась для обоих типов ультразвуковых контрастных веществ. По мере увеличения содержания пиролипидов начала формироваться микросубблная субпопуляция (с пиковым размером примерно 2000 мкм). Этот вторичный пик отсутствовал в образце 0% пиролипидных микросубблов и наиболее очевиден в 40% и 50% пиролипидных популяциях.
На рисунке 5 показаны репрезентативные измерения поглощения 30% образца пиролипидных капель. Пик интактного образца в PBS составил 700 нм, в то время как разрушенный образец в Тритоне сместил пик до 671 нм. Это показало, что неповрежденные сборки имеют различные оптические свойства по сравнению с отдельными, несобранными липидными компонентами.
На рисунке 6A показаны репрезентативные измерения флуоресценции предварительно конденсированного микросубблированного образца, в то время как на рисунке 6B показан образец после конденсации капель с 30% пиролипидов. Неповрежденный образец в PBS имел пик флуоресценции на 704 нм, в то время как нарушенная форма имела пик на 674 нм. Вычитание нарушенной области под кривой с неповрежденной областью под кривой и деление разницы на нарушенную область под кривой дает эффективность закалки, которая составляет 98,61% и 98,07% для 30% образца пиролипидного микросубблона и образца капель соответственно.
Чтобы продемонстрировать превращение капель в микропузырьки, разбавленные капли были визуализированы и испарились в фантоме потока 37 °C с ультразвуковой системой. На рисунке 7 показаны репрезентативные ультразвуковые изображения образца 30% пиролипидных капель, изображенных при различных давлениях. При низких давлениях(рисунок 7А)сигнала было очень мало, только фоновый сигнал от пузырьков воздуха застрял от синтеза агара. Это связано с тем, что капли не эхогенны и не рассеивают ультразвук. При слегка высокой мощности было сгенерировано несколько микропузырьков(рисунок 7B),о чем свидетельствует появление ярких пятнышек. По мере увеличения давления генерировалось больше микропузырьков(рис. 7C и 7D). Это также продемонстрировало, что капли не будут самопроизвольно испаряться при 37 °C.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62665/62665fig1v2.jpg"> Рисунок 1:Изображения этапов формирования 30% пиролипидного раствора. A)Липидный порошок плюс Pyro-SPC в хлороформе. Б)Растворяющий раствор добавлен. C)Липидная пленка высушивается и наносится на внутреннюю стенку флакона. D)Липидный флакон, обернутый в алюминиевую фольгу (внешняя фольга, заклеенная для повторного использования). E)Гидратированный липидный раствор. F)Раствор липидов во флаконе сыворотки. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62665/62665fig01large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62665/62665fig2v2.jpg"> Рисунок 2:10-коллекторный газообменник. Клапаны, упомянутые в протоколе, маркируются. Смотрите дополнительный файл «Другие протоколы и данные» для получения инструкций о том, как собрать газообменник. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62665/62665fig02large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62665/62665fig03.jpg"> Рисунок 3: А)Липидные растворы 7 составов (от 0% до 50% Pyro-SPC) во флаконах для образцов. На рисунках B-D показаны изображения шагов, предпринятых для получения 30% пиролипидных капель. B)30% пиролипидный раствор во флаконе с образцом. C)Пост-агитация. D) 15 мин выбранный размер. Д)Нижняя перегородка переносится на декафторбутановый флакон. D)Постконденсация. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62665/62665fig03large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62665/62665fig04.jpg"> Рисунок 4:Данные о размерах счетчика сошника (CC) выбранных по размеру микросубблов и капель с различным содержанием пиролипидной оболочки(n = 3). Сплошные зеленые линии представляют собой микропузырьки, а пунктирные голубые линии представляют капли. A) 0% Pyro-SPC. B) 1% Pyro-SPC. C) 10% Pyro-SPC. D) 20% Pyro-SPC. E) 30% Pyro-SPC. F) 40% Pyro-SPC. G) 50% Pyro-SPC. H)Общие наблюдаемые концентрации образцов микросубблок и капель из КК на основе содержания Pyro-SPC в оболочке. Все полосы ошибок указывают на стандартное отклонение. Все измерения проводились с использованием диафрагмы 10 мкм, которая имеет диапазон размеров от 200 нм до 6000 нм. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62665/62665fig04large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62665/62665fig05.jpg"> Рисунок 5:Репрезентативные измерения поглощения спектроскопии от 300 до 800 нм образца после конденсации 30% пиролипидных капель, разбавленных в PBS и в 1% тритоне. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62665/62665fig05large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62665/62665fig06.jpg"> Рисунок 6:Репрезентативное флуоресцентное излучение от 600 до 750 нм, возбуждаемого при 410 нм. A) Выбранный по размеру, предварительно конденсированный 30% пиролипидный микросуббл в PBS и в 1% Тритоне. B)Постконденсированный 30% образец пиролипидных капель в PBS и в 1% тритоне. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62665/62665fig06large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.</a>
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62665/62665fig07.jpg"> Рисунок 7:Репрезентативные ультразвуковые изображения фантома агарова 37 °C, сделанные с помощью доклинических преобразователей линейной решетки 21 МГц в B-режиме (см. Таблицу материалов). В левомстолбце (рисунки A, C, Eи G)показаны элементы управления PBS. Правая колонка(рисунки B, D, Fи H)показывает 20 мкл постконденсированного 30% пиролипидного образца капли, разбавленного в 50 мл 37 °C PBS. Каждая строка представляет собой пиковые отрицательные давления свободного поля, которые были оценены из работы, проделанной Sheeran et al.8 Желтые треугольники указывают на глубину фокусировки. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62665/62665fig07large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td>Метод</td>
			<td>Агент</td>
			<td>Пиро-оболочка %</td>
			<td>0</td>
			<td>1</td>
			<td>10</td>
			<td>20</td>
			<td>30</td>
			<td>40</td>
			<td>50</td>
		</tr>
<tr>
<td>КУБОВЫЙ</td>
			<td>Пузыри</td>
			<td>Конс. [/мл]</td>
			<td>(2.76 ± 0.28) × 10^10</td>
			<td>(3.04 ± 0.15) × 10^10</td>
			<td>(2.02 ± 0.11) × 10^10</td>
			<td>(1.91 ± 0.22) × 10^10</td>
			<td>(1.47 ± 0.05) × 10^10</td>
			<td>(8.47 ± 0.95) × 10^9</td>
			<td>(9.89 ± 0.15) × 10^9</td>
		</tr>
<tr>
<td>КУБОВЫЙ</td>
			<td>Пузыри</td>
			<td>Пик [нм]</td>
			<td>329 ± 6</td>
			<td>297 ± 15</td>
			<td>305 ± 21</td>
			<td>273 ± 14</td>
			<td>310 ± 40</td>
			<td>266 ± 33</td>
			<td>393 ± 89</td>
		</tr>
<tr>
<td>КУБОВЫЙ</td>
			<td>Пузыри</td>
			<td>Среднее [нм]</td>
			<td>609 ± 2</td>
			<td>603 ± 15</td>
			<td>635 ± 6</td>
			<td>690 ± 8</td>
			<td>812 ± 1</td>
			<td>935 ± 22</td>
			<td>950 ± 55</td>
		</tr>
<tr>
<td>КУБОВЫЙ</td>
			<td>Пузыри</td>
			<td>Медиана [нм]</td>
			<td>450 ± 6</td>
			<td>421 ± 6</td>
			<td>414 ± 6</td>
			<td>432 ± 5</td>
			<td>490 ± 2</td>
			<td>596 ± 37</td>
			<td>695 ± 41</td>
		</tr>
<tr>
<td>КУБОВЫЙ</td>
			<td>Капель</td>
			<td>Конс. [/мл]</td>
			<td>(2.18 ± 0.07) × 10^10</td>
			<td>(2.71 ± 0.13) × 10^10</td>
			<td>(1.75 ± 0.18) × 10^10</td>
			<td>(1.72 ± 0.13) × 10^10</td>
			<td>(1.09 ± 0.01) × 10^10</td>
			<td>(7.36 ± 0.81) × 10^9</td>
			<td>(7.38 ± 0.28) × 10^9</td>
		</tr>
<tr>
<td>КУБОВЫЙ</td>
			<td>Капель</td>
			<td>Пик [нм]</td>
			<td>292 ± 0</td>
			<td>297 ± 17</td>
			<td>261 ± 13</td>
			<td>280 ± 9</td>
			<td>268 ± 17</td>
			<td>287 ± 38</td>
			<td>390 ± 55</td>
		</tr>
<tr>
<td>КУБОВЫЙ</td>
			<td>Капель</td>
			<td>Среднее [нм]</td>
			<td>353 ± 5</td>
			<td>350 ± 5</td>
			<td>347 ± 1</td>
			<td>347 ± 4</td>
			<td>397 ± 1</td>
			<td>399 ± 6</td>
			<td>400 ± 7</td>
		</tr>
<tr>
<td>КУБОВЫЙ</td>
			<td>Капель</td>
			<td>Медиана [нм]</td>
			<td>318 ± 4</td>
			<td>318 ± 4</td>
			<td>310 ± 1</td>
			<td>315 ± 2</td>
			<td>340 ± 0</td>
			<td>367 ± 5</td>
			<td>370 ± 9</td>
		</tr>
</tbody></table>Таблица 1: Статистика данных о размерах образцов микросубблов и капель с различным содержанием Pyro-SPC из счетчика сошника (CC)(n = 3). Все ошибки указывают на стандартное отклонение.
Дополнительная информация - Лист липидных формул: <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62665/Supplementary%20Information%20-%20Lipid%20Formula%20Sheet.xlsx" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы загрузить этот файл.</a>
Дополнительная информация - Другие протоколы и данные: <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62665/Supplementary%20Information%20-%20Other%20Protocols%20and%20Data.docx" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы загрузить этот файл.</a>

В настоящем протоколе изложены способы синтеза и характеристики мультимодальных капель порфирина с фазовым переходом.

Phase-change droplets are a class of ultrasound contrast agents that can convert into echogenic microbubbles in situ with the application of sufficient ...

Этот протокол важен тем, что он обеспечивает полную процедуру создания капель из липидной пленки в липидный раствор для микропузырьков, а затем для капель. Основным преимуществом данной методики является простота конденсации микропузырьков в капли. Просто путем охлаждения и закрутки капельки могут быть изготовлены без необходимости герметизации.Визуальная демонстрация имеет решающее значение, потому что простой тест, чтобы увидеть, были ли микропузырьки успешно конденсированы, заключается в визуальной проверке изменения полупрозрачность. Продемонстрировать процедуру будет Кимун Ю, студент магистратуры в лаборатории Ган Чжэн. Используя декапер, снимите алюминиевое уплотнение на флаконе сыворотки и перенесите один миллилитр липидного раствора в флакон с образцом боросиликатного стекла емкостью 1,85 миллилитра с фенольной винтовой крышкой, позволив раствору липидов стекать по внутренней стенке без создания пузырьков.С помощью флакона с образцом 1,85 миллилитра приготовьте к поступлению газа декафторбутана в пространство пробирки образца с помощью газообменника. Убедитесь, что все клапаны газообменника правильно закрыты, а насос выключен. Откройте клапан коллектора и аккуратно отстегнивайте соответствующую иглу от коллектора.Откройте клапан давления A и клапан давления B и поверните клапан газового баллона примерно на 1/16 до 1/8 против часовой стрелки, чтобы частично открыть его. Откройте клапан ручки Т и свяжете флакон с образца раствором липидов. Поместите иглу коллектора над интерфейсом жидкого воздуха флакона, медленно поверните клапан регулятора воздуха по часовой стрелке, пока стрелка датчика регулятора воздуха не слегка не сдвинется из своего положения покоя, и позвольте перфторуглеродному газу мягко течь в пространство над головой флакона в течение 30 секунд, заботясь о том, чтобы не создавать пузырьков.При необходимости отрегулируйте клапан регулятора воздуха. Через 30 секунд осторожно и быстро храните флакон с образцом, не слишком двигая флакон. Клапан газового баллона, клапан Т-ручки, клапан регулятора воздуха, клапан давления A, клапан давления B и клапан коллектора.Тщательно обшивайте иглу, затем маркируете флакон с образцом и запечатываете горловину восковой пленкой по часовой стрелке. Храните флакон с образцом в темноте и при четырех градусах Цельсия в течение не менее 10 минут или до 24 часов. Поместите около 100 граммов сухого льда в изолированный контейнер на место обычного льда в другой изолированный контейнер.Извлеките предварительно приготовленный флакон с декафторбутановой сывороткой до 1,5-дюймовых игл 20-го калибра, пластиковый шприц на один миллилитр, контейнер емкостью 200 миллилитров, металлические щипцы и термометр. Поместите флакон с липидным раствором в механическую мешалку и перемешивайте в течение 45 секунд. Должно происходить изменение цвета и полупрозрачность.После механического перемешивания встаньте флакон с образцом правой стороной вверх, защищенный от света, и начните 15-минутный обратный отсчет, чтобы остыть флакон и выбрать размер микропузырьков. Когда обратный отсчет достигнет 10 минут, заполните контейнер примерно 200 миллилитрами изопропанола и охладите его до минус 20 градусов Цельсия сухим льдом с помощью металлических щипцов. После того, как микропузырьки были отобраны в течение 15 минут, найдите выбранный размер раздела внутри флакона с образцом.Держа флакон с образцом правой стороной вверх, осторожно расстегнуть флакон с образца и изолировать около 0,7 миллилитров нижней перегородки с помощью 1,5-дюймовой иглы 20-го калибра, прикрепленной к пластиковому шприцеву на один миллилитр. Убедитесь, что ни одна из верхних перегородок не снята, и не щелкайте шприцем, чтобы удалить воздушные карманы. Нацеливаясь на центральный круг на резиновой пробке, вставьте другую иглу 20 калибра в флакон с сывороткой декафторбутана, удерживая иглу в верхней части флакона сыворотки для вентиляции, а затем вставьте иглу с выбранным размером микропузырьков.Медленно переносите размер выбранных микропузырьков. Дайте жидкости осторожно скользить по внутренней стенке флакона с сывороткой декафторбутана. После того, как весь выбранный размер микросубблока будет перенесен, удалите иглу со шприца, но держите вентиляционную иглу, чтобы снять отрицательное давление.Добавьте небольшое количество сухого льда или изопропанола комнатной температуры в изопропаноловую ванну, чтобы температура ванны была от минус 15 до минус 17 градусов по Цельсию. С помощью вентиляционной иглы 20 калибра, вставленной в верхнюю часть флакона сыворотки, поместите флакон сыворотки и изопропаноловую ванну, сохраняя уровень микропузырька ниже уровня изопропанола, но шейку флакона над ним и периодически закручивайте флакон сыворотки в течение двух минут, чтобы конденсировать микропузырьки. Не закручивайте флакон сыворотки непрерывно в изопропаноле и не дайте раствору замерзнуть.Закрутите около пяти секунд и вынимите флакон сыворотки из изопропанола. Проверьте зарождение льда, затем возобновите закручивание изопропанола. Если есть образование льда, закрутите флакон сыворотки в воздухе, пока он не рассеется.После двухминутной конденсации извлеките флакон сыворотки из изопропанольной ванны и удалите вентиляционную иглу. Микропузырьки должны были конденсироваться в капли, о чем свидетельствует изменение полупрозрачность. Протрите флакон сыворотки, наклейте на него этикетку и поместите на обычный лед в темный изолированный контейнер до готовности к использованию.Неоткрытые капли с неповрежденным алюминиевым уплотнением должны быть стабильными до шести часов, пока расплавленный лед заменяется по мере необходимости. Когда он будет готов к использованию, снимите алюминиевое уплотнение с помощью декаппера. После использования этого протокола предварительно конденсированные микропузырьки выбранного размера и постконденсированные капли были рассчитаны на счетчике Coulter с диафрагмой 10 микрон.Показаны данные о размерах для 30% пиролипидного состава. Статистика, основанная на данных о размерах, показана здесь. Используя соотношение средних диаметров до и после конденсации, результаты показали, что по мере увеличения содержания пиролипидов концентрация уменьшалась, а средний диаметр увеличивался.Показаны измерения репрезентативных абсорбентов образца 30% пиролипидных капель. Это показало, что неповрежденные сборки имеют различные оптические свойства, отраженные различным пиком по сравнению с отдельными несобранными липидными компонентами. Здесь показаны репрезентативные измерения цветения предварительно конденсированного микросубблированного, постконденсированного образца капель с 30% пиролипидами, демонстрирующие различные пики флуоресценции для интактных образцов в нарушенной форме.Показаны репрезентативные ультразвуковые изображения образца 30% пиролипидных капель, изображенного при различных давлениях. При низких давлениях наблюдался только фоновый сигнал от пузырьков воздуха, застрявших от синтеза агара. При несколько большей мощности было сгенерировано несколько микропузырьков, о чем свидетельствует появление ярких пятнышек.По мере увеличения давления генерировалось больше микропузырьков. Важно помнить, что температура конденсации здесь оптимизирована для этой конкретной композиции капельной оболочки. Различные составы скорлупы могут требовать разной температуры.

synthesis-characterization-multi-modal-phase-change-porphyrin

Research

JoVE Journal

Medicine

Медицина

Здесь мы представляем протокол для исследования многокомпонентных фазовых диаграмм с использованием магнитных шариков, управляемых извне, в качестве носителей жидкости в подходе «лаборатория в пробирке». Этот подход может быть полезен в приложениях, направленных на сбор дополнительной информации о фазовых изменениях в сложных жидкостных системах.

Фазовая диаграмма характеристик, используя магнитные шарики в качестве жидких носителей

Молекулы органических красителей и наночастицы, покрытые олеиновой кислотой, не растворяются в воде. Этот протокол описывает метод «plug and play», который позволяет переносить молекулы органических красителей и повышающие конверсию частиц из их исходного гидрофобного растворителя в воду.

Метод «подключи и работай», чтобы создать воду диспергируемые Nanoassemblies Содержит амфифильным полимер, органических красителей и преобразования вверх наночастиц

Представлен протокол для синтеза и получения наночастиц, состоящих из электроактивных полимеров.

Свойства Электроактивный полимер наночастицы Участие фототермические

Протокол для синтеза и определения характеристик диффузионного движения циклических полимеров на одной молекулы уровне представлена.

Синтез циклических полимеров и характеристика их диффузионное движение в расплавленном состоянии на уровне отдельной молекулы

Здесь мы представляем протоколы анализов дифференциально обнаружение времени решены инфракрасный колебательной спектроскопии и электронной дифракции позволяющие наблюдений деформаций местных структур вокруг photoexcited молекул в столбчатых жидкий кристалл, давая атомной перспективы на взаимосвязи между структурой и динамикой этого фотоактивного материала.

Новые методы для наблюдения за структурной динамики Photoresponsive жидких кристаллов

Здесь представлен протокол, в применении которого используется усовершенствованный метод ЗМ/ММ для изучения изотопного эффекта на процесс переноса двойного протона в порфицене.

Изотопный эффект в двойном процессе передачи протона порфицена, исследованного расширенным методом ЗМ/ММ

Этот протокол демонстрирует подготовку фотореологического материала, который обладает твердой фазой, различными жидкокристаллическими фазами и изотропной жидкой фазой за счет повышения температуры. Здесь представлены методы измерения структуры-вязкости отношения материала.

Высококонтрастное и быстрое фоторелогическое переключение Твист-Бенд Nematic Liquid Crystal

Конденсатная реакция Клейзена-Шмидта является важной методологией для генерации конъюгированных велосипедных ароматических соединений, спрягаемых на метане. Благодаря использованию базового варианта реакции алдола, ряд флуоресцентных и / или биологически соответствующих молекул могут быть доступны через в целом недорогой и оперативно простой синтетический подход.

Синтез рН зависимых пиразол, имидазол, и изойндолон дипиринон флюорофоры с использованием Claisen-Шмидт конденсата подход

Этот протокол описывает способ генерации больших объемов инкапсулированных липидами микропузырьков декафторбутана с использованием ультразвуковой обработки зондовым наконечником и последующей конденсации их в нанокапли с фазовым сдвигом с использованием экструзии высокого давления и механической фильтрации.

Производство мембранно-фильтрованных фазовых декафторбутановых нанокафторбутановых из предварительно сформированных микропузырьков

В этом протоколе описывается применение атомно-силовой микроскопии и наноразмерной инфракрасной спектроскопии для оценки производительности фототермической наноразмерной инфракрасной спектроскопии при характеризации трехмерных многополимерных образцов.

Достижения в области наноразмерной инфракрасной спектроскопии для исследования многофазных полимерных систем

Узнайте метод синтеза мультимодальных капель порфирина с фазовым переходом через конденсацию микропузырьков без прессуризации. Этот протокол обеспечивает воспроизводимость для исследований в области нейронауки и биофизики.

Синтез и характеристика мультимодальных капель порфирина с фазовым переходом

Больше видео