Химическая модификация остатка триптофана в рекомбинантном N-домене Ca2+-АТФазы для изучения триптофана-ANS FRET

2.7K просмотров

12:07 мин

9 октября 2021 г.

10.3791/62770-v

9 октября 2021 г.

2.7K просмотров

ANS связывается с Ca2+-ATPase рекомбинантным N-доменом. Флуоресцентные спектры отображают FRET-подобную картину при возбуждении на длине волны 295 нм. NBS-опосредовавшая химическая модификация Trp гасят флуоресценцию N-домена, что приводит к отсутствию переноса энергии (FRET) между остатком Trp и ANS.

Больше видео

FRET

Chapters in this video

0:03

Introduction

1:15

Determination (in silico) of the ANS and SERCA N‐Domain Interaction

3:09

Expression and Purification of the Recombinant N‐Domain

3:39

Monitor the Formation of the ANS‐N‐Domain Complex Based on ANS and N‐Domain Fluorescence Intensity Changes

7:38

N‐Domain Intrinsic Fluorescence Titration by Trp Chemical Modification with NBS

8:43

Titrate the NBS Modified N‐Domain with ANS by Recording Fluorescence Spectra at 25°C

9:37

Evidence of ANS Binding to the Chemically Modified N‐Domain by Excitation at λ = 370 nm

10:32

Results Overview

11:30

Conclusions

Related Videos