26 октября 2021 г.
В этой работе описывается стандартный протокол для механического и горячего теплового количественного сенсорного тестирования для оценки соматосенсорной системы у собак. Сенсорные пороги измеряются с помощью электронного анестезиометра фон Фрея, альгометра давления и термода с горячим контактом.
Этот протокол оценки сенсорных порогов у собак с помощью количественного сенсорного тестирования или QST поможет стандартизировать исследования, что позволит проводить ценные сравнения между различными исследованиями. Этот метод представляет собой неинвазивный метод измерения сенсорных порогов у собак. Наш протокол помогает исследователям руководствоваться передовыми методами получения точных и согласованных данных.
Этот протокол может дать представление о механизмах болевых ощущений у собак, в том числе после операций и при заболеваниях, связанных с хроническими болевыми состояниями. Наиболее важным аспектом этой техники является осведомленность о поведении собак. Чтобы обеспечить безопасное и точное тестирование, все участники должны помнить о поведении собаки и уровне ее беспокойства.
Начните с организации настройки инструмента, аккуратно приложив к тензодатчику жесткий наконечник фон Фрея диаметром 0,9 миллиметра, убедившись, что тензодатчик надежно ввинчен в наконечник. Затем подключите шнур от наконечника к записывающему устройству через канал M0. Затем включите записывающее устройство и нажмите кнопку «Максимум», чтобы зафиксировать и отобразить максимальную силу, достигнутую при реакции собаки на приложенный раздражитель.
Обнулите прибор нажатием кнопки CLR. Чтобы собрать данные и измерить пороговые значения, попросите собаку лечь, а затем помогите ей занять боковое положение лежа. Применяйте минимальное или умеренное ограничение, чтобы удерживать собаку в положении и относительно неподвижно.
Обеспечьте мягкую ручную поддержку конечности испытуемой собаки, чтобы конечность не касалась пола, и обеспечьте устойчивую опору для приложения силы, не мешая собаке отвести конечность. Как только собака успокоится и расслабится, а конечность будет проверена на 70% разгибания, примените стимул один раз. Расположите наконечник фон Фрея перпендикулярно коже исследуемой области.
Если собака проявляет рефлекторные движения от ощущения кончика фон Фрея на коже, позвольте собаке снова расслабить конечность, прежде чем снова наносить кончик фон Фрея. Когда кожа не вызывает рефлекторных движений, проведите мерку, применив наконечник фон Фрея. Прикладывайте неуклонно увеличивающуюся силу с помощью наконечника фон Фрея со скоростью 20 грамм в секунду до тех пор, пока собака не отведет конечность, не издаст звук.
поворачивается, чтобы посмотреть на стимул, или проявляет другие движения или поведенческие реакции, указывающие на сознательное восприятие стимула. Уберите раздражитель, когда собака отведет конечность или будет достигнуто максимальное усилие, и запишите максимальное приложенное усилие, отображаемое на записывающем устройстве. Повторяйте измерения в течение пяти попыток, оставляя одну минуту между каждым измерением, когда собака находится в боковом положении, если она остается относительно спокойной и расслабленной без каких-либо ограничений или с минимальными ограничениями.
Обнуляйте прибор между каждым шагом, нажимая кнопку CLR. Затем запишите оценку выполнимости от нуля до пяти, чтобы указать на простоту сбора данных. Дайте собаке перерыв в пять минут перед началом измерений с помощью тупого измерительного альгометра.
Во время настройки прибора убедитесь, что небольшой тупой щуп надежно ввинчен в устройство. Затем включите записывающее устройство и нажмите кнопку «Максимум», чтобы продолжить, когда на экране появится соответствующий запрос. Нажимайте кнопку единицы измерения до тех пор, пока единица измерения не отобразится в граммах в верхней части экрана, и нажимайте кнопку нуля, чтобы обнулить прибор.
Затем поместите и подготовьте собаку в боковом положении для измерения пороговых значений, как упоминалось ранее. Приложите тупой зонд перпендикулярно коже испытуемой области, чтобы приложить неуклонно увеличивающееся усилие зонда со скоростью 20 граммов в секунду до тех пор, пока собака не проявит поведенческие реакции, указывающие на сознательное восприятие стимула. Убирайте раздражитель, когда собака отводит конечность или достигается максимальная сила.
После записи максимального приложенного усилия с записывающего устройства повторите измерения в общей сложности в течение пяти попыток. Позвольте собаке оставаться в боковом положении лежа, чтобы сидеть, стоять или передвигаться по комнате QST, чтобы сохранить комфорт во время межсудебного интервала. Затем замените собаку в боковом положении перед последующим измерением.
Запишите оценку выполнимости от нуля до пяти, чтобы указать на легкость сбора данных. Дайте собаке перерыв в пять минут перед началом измерений с помощью горячего термозонда. Прежде чем начать эксперимент, подготовьте собаку, как объяснялось ранее.
Затем нанесите термод на кожу испытуемой области и нажмите кнопку «Пуск» в левом нижнем углу тестовой вкладки, чтобы начать тест. Когда собака демонстрирует движения или поведенческие реакции, указывающие на сознательное восприятие стимула, или когда достигается максимальная задержка, снимите термод, одновременно остановив секундомер. Запишите задержку для вывода средств.
Повторите измерения в общей сложности в течение пяти попыток, сначала нажав кнопку «стоп», а затем кнопку предварительного теста между каждым измерением, чтобы остановить нагрев термода. Это позволит программному обеспечению повторно откалибровать термод для подготовки к следующему применению. Запишите оценку выполнимости от нуля до пяти, чтобы указать на легкость сбора данных.
Репрезентативный анализ обобщает данные по механическому и горячему тепловому QST от группы здоровых собак без боли. Данные измерений сенсорных порогов с помощью электронного эстезиометра фон Фрея не показали существенного влияния массы тела на сенсорные пороги. Аналогичное влияние веса тела было замечено в данных тупого зондирования сенсорных порогов алгометра давления.
С другой стороны, данные, собранные для сенсорной латентности горячего теплового зонда, показали значительное влияние массы тела на сенсорную латентность. Общее среднее, стандартное отклонение и диапазон сенсорных порогов для механического и горячего теплового QST были суммированы в той же группе здоровых собак без боли. Наиболее важно надежно идентифицировать поведенческую реакцию собаки, которая указывает на сознательное восприятие стимула, которое может выглядеть по-разному для разных собак.
В дополнение к количественному сенсорному тестированию, сбор поведенческой информации с помощью проверенных анкет владельцев и тестов эмоциональной реактивности может помочь обеспечить всестороннюю оценку аффективного состояния собаки.
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео
В данном исследовании представлен стандартный протокол количественного сенсорного тестирования (QST) у собак для оценки соматосенсорной системы с использованием механических и термических (горячих) методов. Благодаря применению таких инструментов, как электронный анестезиометр von Frey и алгометр давления, данный протокол направлен на стандартизацию оценок, что позволит проводить сравнительный анализ результатов различных исследований.
Количественное сенсорное тестирование (QST) у собак представляет собой стандартизированный неинвазивный подход к оценке соматосенсорной функции, что способствует трансляционным исследованиям боли и разработке сравнительных моделей. Установление референтных сенсорных порогов и поведенческих конечных точек позволяет проводить более прогностическую доклиническую оценку кандидатов в анальгетики и снижать механистические риски в ветеринарных и сравнительных нейробиологических исследованиях. Стандартизированные протоколы QST обеспечивают сопоставимость данных между различными исследованиями и центрами, что укрепляет процесс принятия решений по портфелю препаратов на этапах раннего поиска и трансляционных исследований.
QST интегрируется в континуум от этапа поиска до доклинических исследований в качестве функционального показателя для валидации мишеней, оптимизации соединений-лидеров и разработки трансляционных биомаркеров в рамках разработки препаратов для лечения боли и сенсорных расстройств.