В городе Виво Методы оценки функции и структуры ганглиозных клеток сетчатки и зрительного нерва у крупных животных

Всем привет. Это Икуй Чжан из глазной больницы Вэньчжоу. В верхнем нерве отсутствуют эксоны из орексиновых ганглиозных клеток, а затем передают визуальный сигнал в мозг.

Более крупная модель повреждения верхнего нерва необходима для перевода нового лечения от модели робота к лимфатическому применению. Здесь мы опишем некоторые методы in vivo для оценки структуры и функции орексиновых ганглиозных клеток в верхнем нерве у крупных животных. Представляя этот метод шаг за шагом, мы надеемся увеличить экспериментальные репродуктивные нарушения и облегчить использование более крупных моделей оптического невроза.

Брейте электронной бритвой. И, приготовьте его с 70% спиртом три раза, чтобы очистить кожу и обнажить подкожную вену. Вводят периферическую венозную кастору внутривенно.

Затем капают атропин и пропофол. Интубируйте козу шестимиллиметровой трахеальной трубкой и подключите к искусственному респиратору. Анестезия поддерживалась 3,5% изофлурана в кислороде при постоянном двухлитровом управляемом расходе.

Поместите датчик температуры под язык козы. Прикрепите насыщение кислородом к проксимальному концу козьего уха. Привяжите манжету артериального давления к основанию бедра.

Зажим ЭКГ расщепляет конечности в порядке. Затем мы можем контролировать жизненно важные показатели козы. Побрить волосы и продезинфицировать кожу бетадином и 70% спиртом три раза в центре лобной кости.

Откройте пакет стерилизатора, содержащий ножницы и ногти. Сделайте разрезы кожи, чтобы обнажить череп ножницами. Стальные винты для имплантации в центр лобной кости.

Сбрить волосы и продезинфицировать кожу бетадином и 70% спиртом три раза в средней точке двух ушей в затылочной кости. Сделайте разрезы кожи. Стальные винты для имплантации в среднюю точку двух ушей в затылочную кость.

Электрод шлифовальной иглы вставляется подкожно под лобной винт черепа. Активный электрод и электрод сравнения соединены с фронтальным и затылочным винтами соответственно аллигаторными зажимами для уменьшения импотенции электрода. Сделайте патч на один глаз.

Нанесите глазные капли для местной анестезии на глазную поверхность. Зрачки с обеих сторон расширяются глазными каплями при мидриазе. Поместите козью голову в газонаполненный стимулятор, направленный на амбулаторный свет.

Наденьте черное одеяло на стимулятор и козью голову на пять минут адаптации. Зеркало века используется для полного обнажения его зрачка. Проверьте электрод тканевую контактную импотенцию.

Убедитесь, что импотенция ниже 10 километров для каждого, чтобы избежать электромагнитных помех от других электрических устройств в той же комнате. Проверьте базовый шум без световой стимуляции. Запустите запись FVEP.

Обратите внимание, что запись FVEP при каждой интенсивности света выполняется дважды. Обратите внимание, что смочите роговицу искусственным разрывом, если она окажется сухой. Повторите шаги для контралатерального глаза.

Начните запись FVEP при разной интенсивности света последовательно. Для каждой записи усредняется 64 следа, чтобы получить одну форму волны. Первый положительный и активный пик в волновой форме FVEP был обозначен как P1 и N1. Стерилизованный заземляющий электрод расположен в мочке уха.

Стерилизованные активные и опорные электроды вводятся подкожно вдоль средней линии и лобной и затылочной кости соответственно. Зеркало века используется для полного обнажения его зрачка. Сделайте патч на один глаз.

Записывайте паттерн VEP реакции другого глаза на разных пространственных частотах последовательно. Подключите к заземляющему электроду с помощью зажима для аллигатора. Два стерилизованных игольчатых эталонных электрода помещают под кожу на один сантиметр позади бокового кантуса с обеих сторон.

Зеркало века используется для полного обнажения его зрачка. Два дезинфицированных регистрирующих электрода ERG центрируют обе роговицы после местного применения искусственной слезы. Перед каждым глазом размещены два стимулятора с расстоянием просмотра 50 сантиметров.

Убедитесь, что импотенция ниже 10 километров. Отслеживайте базовый шум без световой стимуляции. Направьте амбулаторный свет.

Начните запись паттерна ERG с обоих глаз одновременно на разных пространственных частотах последовательно. Наконец, возвращение экрана для записи паттерна ERG без визуальных стимуляторов и активного управления. Полосовой фильтр установлен в диапазоне от одного до 75 Гц для трех ERG cpD паттерна.

Полосовой фильтр составляет от одного до 50 Гц, чтобы сгладить форму, не влияя на ее амплитуду. Первые положительные и активные пики в волновой форме обозначаются как P1 и N1. Рисунок амплитуды ЭРГ, измеренной от N1 до P1.To уменьшить импотенцию электродов, стерилизованную иглу эталонного размещения под лобную кожу. А стерилизованный игольчатый опорный электрод помещается под кожу на один сантиметр позади бокового кантуса с одной стороны.

Продезинфицированный записывающий электрод ERG помещается на роговицу при местном применении искусственной слезы. Сделайте патч на один глаз. Дисплей размещается на расстоянии просмотра 50 сантиметров.

Зеркало века используется для полного обнажения его зрачка. Затем козу укладывают на подбородок. Выровняйте козу с камерой, чтобы отправить его головку зрительного нерва в изображение лазерной офтальмоскопии конфокального сканирования, изменив положение головы.

Нажмите кнопку Пуск, чтобы перейти на конечную фазу обнаружения. Дождитесь завершения загрузки машины. Нажмите желтую кнопку запуска, чтобы запустить формальную визуализацию.

Отрегулируйте джойстик для равномерного освещения инфракрасного изображения для улучшения качества изображения. Сдвиньте камеру вперед до тех пор, пока на правом верхнем экране не появится вертикальное изображение Сетчатки. Измените джойстик, чтобы он равномерно танцевал в горизонтальном изображении OCT сетчатки.

Нажмите кнопку на джойстике, чтобы автоматически поймать изображение. Удерживайте этот джойстик, чтобы поддерживать качество изображения на экране живого изображения до завершения выполнения изображения. Затем нажмите приобрести.

Выберите качественную начальную фотографию. Щелкните правой кнопкой мыши и выберите задать ссылку. Нажмите кнопку «Продолжить», чтобы программа автоматически сопоставила текущее сканирование с базовым сканированием.

После сопоставления нажмите кнопку на джойстике, чтобы активировать автоматическое отслеживание в реальном времени. Нажмите кнопку измерения, чтобы войти в измерительную платформу. Выберите инструмент ластика и протрите линию RFL, которая автоматически маркируется машиной.

Выберите инструмент рисования линий, чтобы вручную очертить границу между IPL и INL. Между красной и синей линиями находится комплекс GCC. Измененная визуализация сетчатки у макак-резусов выполняется с использованием того же оборудования и процедуры, что и у коз.

На рисунке А показан репрезентативный FVEP у козла. На рисунке B показан репрезентативный паттерн волновой формы ERG у козы. На рисунке C показан репрезентативный паттерн FVEP у макак-резусов.

И на рисунке D показан репрезентативный паттерн волновой формы ERG у макак-резусов. На втором рисунке показаны репрезентативные изображения ОКТ сетчатки вокруг головки зрительного нерва и толщина комплекса GCC в различных периферических областях у козы и макаки-резуса. Модель крупного животного играет важную роль в трансляционных исследованиях.

Во многих случаях многообещающие терапевтические эффекты на моделях мелких животных не были переведены на пациентов-людей. В этом исследовании мы представили видеопротокол FVEP, PERG и OCT у козы и макаки-резуса. Этот метод in vivo может быть применен в более крупной модели различных оптических неврозов, таких как ишемическая глаукома или травматическая оптическая нейропатия и неврит зрительного нерва.