Оценка убиквитилирования субстрата убиквитин-лигазой E3 в лизатах клеток млекопитающих

2.6K просмотров

Процитировано: 2

09:47 мин

10 мая 2022 г.

10.3791/63561-v

10 мая 2022 г.

2.6K просмотров

* These authors contributed equally

Мы предоставляем подробный протокол для анализа убиквитилирования конкретного субстрата и убиквитин-лигазы E3 в клетках млекопитающих. Клеточные линии HEK293T использовали для гиперэкспрессии белка, полиубиквитилированный субстрат очищали от клеточных лизатов иммунопреципитацией и разрешали в SDS-PAGE. Иммуноблоттинг использовался для визуализации этой посттрансляционной модификации.

Больше видео

F box

Chapters in this video

0:05

Introduction

1:08

Cell Culture

2:33

Cell Transfection

3:41

Cell Lysis and Immunoprecipitation

7:40

Results: Specific Polyubiquitylation of UXT-V2-HA Mediated by Fbxo7

9:06

Conclusion

Related Videos