Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Пациенты с тяжелым перитонеальным фиброзом имеют высокую заболеваемость и смертность. Механизм перитонеального фиброза неясен. В этом исследовании мы описываем простую экспериментальную мышиную модель перитонеального фиброза, вызванного инъекцией перитонеального диализного раствора.
Перитонеальный фиброз может возникать у пациентов, проходящих перитонеальный диализ (ПД), а пациенты с тяжелым перитонеальным фиброзом имеют высокую заболеваемость и смертность. Перитонит, перитонеальная диализная жидкость с высоким содержанием глюкозы и длительный период БП ускоряют начало перитонеального фиброза. Исследование перитонеального фиброза на животных необходимо из-за ограничений исследований на людях и in vitro . Тем не менее, большинство животных моделей не имитируют клинические условия. Для изучения перитонеального фиброза мы разработали клинически значимую мышиную модель, имплантировав перитонеальный катетер и вводя 2,5% жидкости с высоким содержанием глюкозы и 20 мМ метилглиоксаль (MGO) в брюшную полость ежедневно в течение 21 дня. Имплантация перитонеального катетера позволяет избежать травмирования брюшины иглами и имитирует клинические пациенты с болезнью Паркинсона. Иммунофлуоресцентное окрашивание показало, что миофибробласты накапливаются в фиброзной брюшине. Опытная группа имела меньший объем ультрафильтрации и транспортную функцию перитонеальной мембраны (тест на перитонеальное равновесие). В этой статье мы приводим подробный протокол модели.
Перитонеальный диализ (ПД) является одним из видов заместительной почечной терапии, которую получают около 11% пациентов с терминальной стадией почечной недостаточности (ТХПН)1. Исследования показали, что перитонеальный фиброз развивается у пациентов, получающих ПД2. Инкапсулирующий перитонеальный склероз (ЭФС), тяжелая форма перитонеального фиброза, приводит к высокой заболеваемости и смертности3. К факторам риска перитонеального фиброза относятся перитонит, высокоглюкозный перитонеальный диализный раствор, длительный период БП и генетически....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Эксперименты были одобрены и проведены в соответствии с требованиями Медицинского колледжа Национального университета Тайваня и Институционального комитета по уходу за животными и их использованию Колледжа общественного здравоохранения (IACUC). Все мыши содержались под стандартным уходом.
1. Эксперимент на животных
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Была исследована гистология брюшинной ткани, которая показала, что перитонеальный фиброз был успешно индуцирован в группе жидкости PD плюс MGO (PDF). Иммунофлуоресцентное окрашивание висцеральной брюшины поверхности печени показало большее накопление миофибробластов в поврежденной брюшине в группе PDF, чем в контрольной группе (рис. 1). Как показано на рисунке 2A, группа PDF имела меньший объем ультрафильтрации, чем контрольная группа. Как показано на
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Брюшина имеет висцеральную и париетальную брюшину, охватывающую органы брюшной полости и брюшные стенки. Он состоит из монослоя мезотелиальных клеток, субмезотелиального слоя, серозы, фибробластов, лимфоцитов и секретируемых белков14. Перитонеальный фиброз – это потеря и обнажение мезотелиальных клеток, субмезотелиальное утолщение и накопление многих воспалительных клеток, таких как миофибробласты и макрофаги 4,14
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Авторам нечего раскрывать.
Эта работа была поддержана Национальной университетской больницей Тайваня (NTUH) 111-UN0026.
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| анти-антитела к цитокератину широкого спектра действия | abcam | ab9377 | |
| Beckman Coulter | Beckman Coulter | AU5800 | Биохимический анализатор |
| DAPI, 4′,,6-диамидино-2-фенилиндол антитела | Sigma-Aldrich | 98718-90-3 | |
| Драпирует | любую | ||
| козу FITC анти-кролик | Jackson ImmunoResearch Secondary Антитела | 111-095-144 | |
| Перчатки | любые | ||
| GraphPad Prizm | GraphPad Программное | обеспечение GraphPad 9.0 | |
| Kellys | любой | ||
| метилглиоксаль (MGO) | Sigma-Aldrich | ||
| Mini-UTE Mouse | Port Access Technologies MMP-4S | 061108B | Мышь 4-французский силиконовый порт |
| Моноклональный антиактин, α-гладкие мышцы-антитело Cy3 | Sigma-Aldrich | C6198 | |
| Иглы | любые | ||
| Рефлекторные зажимы 7 мм | любые | ||
| Шовные материалы 4-0 Нейлон | любой |
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Эта статья была опубликована
Видео скоро будет доступно