-1::1
Simple Hit Counter
Skip to content

Products

Solutions

×
×
Sign In

RU

EN - EnglishCN - 简体中文DE - DeutschES - EspañolKR - 한국어IT - ItalianoFR - FrançaisPT - Português do BrasilPL - PolskiHE - עִבְרִיתRU - РусскийJA - 日本語TR - TürkçeAR - العربية
Sign In Start Free Trial

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

Behavior
Biochemistry
Bioengineering
Biology
Cancer Research
Chemistry
Developmental Biology
View All
JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

Biological Techniques
Biology
Cancer Research
Immunology
Neuroscience
Microbiology
JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduate courses

Analytical Chemistry
Anatomy and Physiology
Biology
Calculus
Cell Biology
Chemistry
Civil Engineering
Electrical Engineering
View All
JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

Advanced Biology
Basic Biology
Chemistry
View All
JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

Biology
Chemistry

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

Accounting
Finance
Macroeconomics
Marketing
Microeconomics

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Authors

Teaching Faculty

Librarians

K12 Schools

Biopharma

Products

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduates

JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Solutions

Authors
Teaching Faculty
Librarians
K12 Schools
Biopharma

Language

ru_RU

EN

English

CN

简体中文

DE

Deutsch

ES

Español

KR

한국어

IT

Italiano

FR

Français

PT

Português do Brasil

PL

Polski

HE

עִבְרִית

RU

Русский

JA

日本語

TR

Türkçe

AR

العربية

    Menu

    JoVE Journal

    Behavior

    Biochemistry

    Bioengineering

    Biology

    Cancer Research

    Chemistry

    Developmental Biology

    Engineering

    Environment

    Genetics

    Immunology and Infection

    Medicine

    Neuroscience

    Menu

    JoVE Encyclopedia of Experiments

    Biological Techniques

    Biology

    Cancer Research

    Immunology

    Neuroscience

    Microbiology

    Menu

    JoVE Core

    Analytical Chemistry

    Anatomy and Physiology

    Biology

    Calculus

    Cell Biology

    Chemistry

    Civil Engineering

    Electrical Engineering

    Introduction to Psychology

    Mechanical Engineering

    Medical-Surgical Nursing

    View All

    Menu

    JoVE Science Education

    Advanced Biology

    Basic Biology

    Chemistry

    Clinical Skills

    Engineering

    Environmental Sciences

    Physics

    Psychology

    View All

    Menu

    JoVE Lab Manual

    Biology

    Chemistry

    Menu

    JoVE Business

    Accounting

    Finance

    Macroeconomics

    Marketing

    Microeconomics

Start Free Trial
Loading...
Home
JoVE Journal
Immunology and Infection
Идентификация каспаз и их мотивов, которые расщепляют белки во время вирусной инфекции гриппа А
Идентификация каспаз и их мотивов, которые расщепляют белки во время вирусной инфекции гриппа А
JoVE Journal
Immunology and Infection
Author Produced
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Immunology and Infection
Identifying Caspases and their Motifs that Cleave Proteins During Influenza A Virus Infection

Идентификация каспаз и их мотивов, которые расщепляют белки во время вирусной инфекции гриппа А

Full Text
1,892 Views
08:16 min
July 21, 2022

DOI: 10.3791/64189-v

Matloob Husain1

1Department of Microbiology and Immunology,University of Otago

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study investigates the role of caspases in the cleavage of host proteins during Influenza A virus (IAV) infection. By utilizing various molecular techniques, the research identifies specific proteins targeted by caspases in infected mammalian cells.

Key Study Components

Area of Science

  • Virology
  • Cell Biology
  • Molecular Biology

Background

  • Influenza A virus (IAV) can activate caspases that cleave both host and viral proteins.
  • Caspases play crucial roles in both pro- and antiviral functions.
  • Understanding caspase activity can provide insights into viral pathogenesis.
  • Identifying cleavage sites may reveal potential therapeutic targets.

Purpose of Study

  • To determine if proteins in IAV-infected cells undergo cleavage by caspases.
  • To identify specific caspase cleavage sites on host proteins.
  • To develop a method applicable to other viral infections and external stimuli.

Methods Used

  • Inhibitors and RNA interference to manipulate caspase activity.
  • Site-directed mutagenesis to identify cleavage sites.
  • Western blotting to detect protein cleavage.
  • RT-qPCR for quantifying mRNA levels of target proteins.

Main Results

  • Identification of host cortactin and histone deacetylases as cleavage targets.
  • Demonstration of caspase activation in IAV-infected cells.
  • Confirmation of the method's adaptability for other viruses and stimuli.
  • Insights into the dual role of caspases in viral infections.

Conclusions

  • Caspases are critical in the cleavage of host proteins during IAV infection.
  • The developed method is versatile for studying other infections.
  • Understanding caspase activity may lead to new antiviral strategies.

Frequently Asked Questions

What are caspases?
Caspases are a family of cysteine proteases that play essential roles in programmed cell death and inflammation.
How does IAV infection affect host cells?
IAV infection can activate cellular pathways, including caspase activation, leading to protein cleavage and immune responses.
What techniques were used in this study?
The study employed inhibitors, RNA interference, site-directed mutagenesis, western blotting, and RT-qPCR.
Can this method be used for other viruses?
Yes, the method can be adapted for studying other animal viruses and external stimuli.
What is the significance of identifying cleavage sites?
Identifying cleavage sites can help understand viral mechanisms and identify potential therapeutic targets.
What cell lines were used in the experiments?
MDCK and A549 cell lines were used for the experiments.

Инфекция вируса гриппа А (IAV) активирует каспазы, расщепляющие хозяина, и вирусные белки, которые, в свою очередь, обладают про- и противовирусными функциями. Используя ингибиторы, интерференцию РНК, сайт-направленный мутагенез и методы западного блоттинга и RT-qPCR, были идентифицированы каспазы в инфицированных клетках млекопитающих, которые расщепляют кортактин хозяина и гистоновые деацетилазы.

Этот метод поможет определить и подтвердить, подвергается ли белок в инфицированных вирусом гриппом клетках деградации или расщеплению каспазами и идентифицировать места расщепления каспазы. Этот метод требует только базовых лабораторных условий молекулярной и клеточной биологии и исследовательских навыков и не требует какого-либо специализированного оборудования или обучения программному обеспечению. Этот метод может быть адаптирован для достижения аналогичных целей, связанных с инфекцией другими вирусами или микробами животных и воздействием внешних раздражителей, таких как токсины и химические вещества.

Для начала посейте клетки MDCK или A549 в 12-луночную пластину для культивирования клеток. Инкубируйте клетки в течение ночи при 37 градусах Цельсия в атмосфере углекислого газа 5%. На следующий день удалите из клеток старую культуральную среду и дважды промойте клетки в каждой лунке одним миллилитром mem без сыворотки.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

Sign In Start Free Trial

Explore More Videos

Иммунология и инфекции выпуск 185

Related Videos

Оценка активации множественных каспаз в макрофагах

04:01

Оценка активации множественных каспаз в макрофагах

Related Videos

559 Views

Оценка каспазо-опосредованного расщепления вирусных белков и белков хозяина в инфицированных вирусом клетках

03:34

Оценка каспазо-опосредованного расщепления вирусных белков и белков хозяина в инфицированных вирусом клетках

Related Videos

508 Views

In Vitro разборке вируса гриппа капсиды по градиентное центрифугирование

07:24

In Vitro разборке вируса гриппа капсиды по градиентное центрифугирование

Related Videos

9.6K Views

Освещение пути к Caspase активации с помощью Bimolecular флуоресценции дополнения

08:47

Освещение пути к Caspase активации с помощью Bimolecular флуоресценции дополнения

Related Videos

9.5K Views

Fluorogenic пептид расщепления Assay экран для протеолитической активности: приложения для коронавирус Спайк активации белка

07:53

Fluorogenic пептид расщепления Assay экран для протеолитической активности: приложения для коронавирус Спайк активации белка

Related Videos

33.9K Views

Анализ группы IV Вирусные SSHHPS Использование в пробирке и в Силико методы

10:40

Анализ группы IV Вирусные SSHHPS Использование в пробирке и в Силико методы

Related Videos

26.6K Views

Визуализация воспалительных каспаз, индуцированных близостью в макрофагах, полученных из моноцитов человека

08:41

Визуализация воспалительных каспаз, индуцированных близостью в макрофагах, полученных из моноцитов человека

Related Videos

3.2K Views

Оценка активации каспазы для оценки гибели врожденных иммунных клеток

10:23

Оценка активации каспазы для оценки гибели врожденных иммунных клеток

Related Videos

3.9K Views

В пробирке Анализ расщепления с использованием очищенных рекомбинантных Drosophila Caspases для скрининга субстрата

08:16

В пробирке Анализ расщепления с использованием очищенных рекомбинантных Drosophila Caspases для скрининга субстрата

Related Videos

2K Views

Генерация рекомбинантного вируса гриппа от ДНК плазмиды

11:31

Генерация рекомбинантного вируса гриппа от ДНК плазмиды

Related Videos

32.3K Views

JoVE logo
Contact Us Recommend to Library
Research
  • JoVE Journal
  • JoVE Encyclopedia of Experiments
  • JoVE Visualize
Business
  • JoVE Business
Education
  • JoVE Core
  • JoVE Science Education
  • JoVE Lab Manual
  • JoVE Quizzes
Solutions
  • Authors
  • Teaching Faculty
  • Librarians
  • K12 Schools
  • Biopharma
About JoVE
  • Overview
  • Leadership
Others
  • JoVE Newsletters
  • JoVE Help Center
  • Blogs
  • JoVE Newsroom
  • Site Maps
Contact Us Recommend to Library
JoVE logo

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. All rights reserved

Privacy Terms of Use Policies
WeChat QR code