Создание простой и эффективной модели крыс для интраоперационной визуализации паращитовидных желез

Паращитовидная железа – небольшой орган с очень важными функциями. Наш протокол может быть использован для разработки новых технологий идентификации ПГ, которые могут помочь хирургам защитить его во время тиреоидэктомии при раке щитовидной железы. Основным преимуществом этой модели является то, что она может наблюдать четкую разницу между щитовидной железой и ПГ через отрицательную визуализацию IONP.

Кроме того, стоимость и эксплуатационные трудности для этой модели крыс значительно ниже, чем для моделей крупных животных. Для начала поместите предварительно расплавленную грелку на хирургический стол, чтобы поддерживать температуру тела животного во время операции, а затем перенесите обезболенную крысу вниз на хирургическую драпировку, размещенную на операционном столе. Используя резинки, закрепите конечности крысы к операционному столу и поместите цилиндрическую подушку из драпировки под плечо крысы, чтобы откинуть ее голову назад, полностью обнажив область шеи, затем нанесите крем для депиляции на область шеи, до подчелюстного пространства, вплоть до мечевидного отростка и с обеих сторон наружу грудино-ключично-сосцевидной мышцы.

Через три минуты аккуратно протрите волосы и крем для депиляции салфеткой. Далее, используя йодофорный ватный тампон, стерилизуйте середину шеи и прилегающую область. с которого удаляются волосы.

Накройте животное хирургической драпировкой, сохраняя отверстие выровненным с продезинфицированной областью. С помощью скальпеля сделайте примерно пятисантиметровый продольный разрез в передней средней линии шеи крысы. Поднимите кожу по обеим сторонам разреза и с помощью ножниц продольно разрезайте по линии alba cervicalis.

Используйте щипцы для разделения грудиногиоидной и грудино-щитовидной мышц. Зажмите разделенные мышцы перед шеей с помощью сосудистых щипцов и вытяните зажатую ткань наружу. С помощью иглы пропустите шов через зажатую ткань.

Сделайте узел и закрепите шов к хирургической драпировке операционного стола. Найдите щитовидный хрящ на основе его формы щита и крикоидный хрящ на основе его кольцевой формы в качестве верхней границы в области операции, затем найдите трахею на основе формы трубчатого хрящевого кольца в передней и средней части шеи в качестве нижней границы в области операции. Расположите щитовидную железу, красную железу в форме бабочки на противоположной стороне трахеи между верхней и нижней границами.

Далее расположите две паращитовидные железы в веретенообразной форме, которые красноваты, но легче окружающей щитовидной железы с определенной границей на верхней и внешней сторонах щитовидной железы. Сделайте лобную фотографию паращитовидных желез с трахеей, щитовидной железой и гортанью. Рассекните заднюю часть пищевода и с помощью втягивающего устройства обнажите правую сторону паращитовидных желез.

Сделайте фотографию с правой стороны паращитовидных желез со щитовидной железой и трахеей, а также обнажите и захватите левую сторону желез. Используйте инсулиновый шприц для местного введения 10 микролитров суспензии наночастиц черного оксида железа в центр щитовидной железы и осторожно надавите на место инъекции марлей в течение пяти секунд, затем наблюдайте за быстрой диффузией черных наночастиц оксида железа внутри щитовидной железы, но не паращитовидных желез, так как это негативно окрашивает паращитовидные железы и дифференцирует их от окружающей щитовидной железы. Захватите передние, левые и правые фотографии отрицательно окрашенных паращитовидных желез вместе с трахеей, щитовидной железой и гортанью.

После инъекции контрастное вещество, черные наночастицы оксида железа, легко диффундируют внутри щитовидной железы и окрашивают ее в черный цвет, но не могут проникнуть в паращитовидную железу из-за их высокой плотности тканей. Гистологический анализ наночастиц черного оксида железа, вводимых щитовидной железой, показал, что паращитовидные железы обогащены тесно выровненными главными клетками, тогда как щитовидная железа имеет много рыхлых просветов, указывающих на гораздо более низкую плотность тканей. В этой процедуре следует помнить две важные вещи.

Во-первых, осанка крысы. Мы рекомендуем наклонять уши и голову назад, полностью обнажая область шеи. Во-вторых, когда мы вводим ИОНП, мы должны использовать тонкую иглу, потому что поверхность щитовидной железы полна кровеносных сосудов.

Эта процедура также может быть выполнена с помощью автофлуоресцентной визуализации ПГ, которая является неинвазивной, предоставляет информацию в режиме реального времени и не использует краситель в качестве контрастного вещества, но сигнал автофлуоресценции слабый, а эффективность визуализации также низкая. Другие исследователи могут использовать эту простую и эффективную модель крыс для разработки и оценки новых технологий и продуктов идентификации ПГ вместо использования более сложных и дорогих крупных животных, таких как собаки и свиньи.