Создание модели искусственной децидуализации мыши с овариэктомией для исследования децидуализации эндометрия

Нарушение децентрализации приводит к вирусным нарушениям эндометрия, таким как летальный исход, привычный выкидыш. Этот метод обеспечивает хорошую и надежную животную модель для изучения децентрализации эндометрия. Эта модель искусственной децентрализации с овариэктомией может избежать влияния анджелины на гормоны, что часто может привести к высоковоспроизводимым результатам с незначительными групповыми различиями.

Начать стерилизацию хирургических инструментов с помощью стерилизатора высокой температуры и высокого давления за сутки до операции. Нанесите защитную глазную мазь на глазные яблоки, чтобы предотвратить сухость во время анестезии. Начинайте операцию, когда мыши полностью обезболиваются.

Поместите мышей в положение лежа на операционной поверхности и сбрейте волосы на спине, предварительно намочив их мыльным раствором. Продезинфицируйте кожу 70%-ным этанолом. Найдите место разреза операции на расстоянии 0,5 сантиметра на верхнем крае корня бедра обеих задних конечностей параллельно позвоночнику.

Возьмите место разреза в качестве центра и трижды продезинфицируйте область разреза йодофором. Сделайте продольный надрез примерно от 0,5 до одного сантиметра с помощью ножниц. Разрежьте фасцию и пассивно разделите мышцы пинцетом.

Найдите кусочек белого жирового мешка в поле разреза близко к нижнему полюсу почки через тонкий мышечный слой. Зажмите жировую массу кровоостанавливающими зажимами и вытащите яичник, обернутый жировой подушкой, из разреза. Зажмите соединение яичника и маточных труб изогнутым пинцетом и удалите ножницами яичник вдоль ножки яичника.

Остановить кровотечение можно с помощью шприц-ручки для электрокоагуляции или иглы одномиллилитрового шприца, нагретого на спиртовой лампе. Промойте хирургический разрез обычным физиологическим раствором, чтобы предотвратить слипание тканей. Используйте шов 4-0, чтобы засеять мышцу и кожу соответственно, и снова продезинфицируйте хирургический разрез йодофором.

Поместите мышей в положение лежа в клетке и реанимируйте их в инкубаторе с температурой 25 градусов по Цельсию. Оборудован источником света и системой вентиляции около двух часов. Обратите внимание на мышей после операции.

Поместите их обратно в исходное место кормления в одиночестве, пока они полностью не выздоровеют, и дайте им достаточно воды и еды. Подкожно вводите 100 нанограммов эстрогена в 50 микролитров кунжутного масла каждой мыши в течение трех дней с последующим двухдневным отдыхом. Введите один миллиграмм прогестерона и 10 нанограммов эстрогена в 50 микролитров кунжутного масла каждой мыши еще на три дня.

Управляйте мышами, чтобы вызвать модель искусственной остаточной терапии через шесть часов после третьей комбинированной инъекции эстрогена и прогестерона. Найдите рог матки на нижнем конце фаллопиевых труб и медленно введите 20 микролитров кунжутного масла вдоль рога матки. Отодвинуте ткань назад, зашите разрез и дайте мыши восстановиться.

Зафиксируйте три-пять миллилитров ткани матки 10%-ным формалином, встроенным в парафин, и разделите их. Окрашивают срезы гематоксилином и эозином, чтобы наблюдать за морфологическими изменениями. Поместите еще три-пять миллиметров ткани матки в оптимальную температуру резки, заморозьте в жидком азоте и храните в морозильной камере при температуре минус 80 градусов по Цельсию.

Замороженную срез ткани в 10 мкм и определение активности щелочной фосфатазы в тканях матки методом азосвязывания. Общая морфология искусственной децентрализованной матки мышей, индуцированной нефтью, ближе к таковой матки во время беременности. Тело матки становится толстым, а полость матки становится меньше, чем неиндуцированная сторона.

Объем и вес индуцированного рога матки значительно выше, чем у неиндуцированной стороны. Окрашивание тканей матки гематоксилином и эозином показало, что железы исчезают, а конечные стромальные клетки эндометрия на индуцированном разрыве дифференцируются в крупные круглые цитоплазматические и многоядерные децидуальные клетки с нечеткими границами клеток. Неиндуцированные боковые срезы показывают морфологию ткани эндометрия в нормальном физиологическом состоянии.

Результат метода азосвязи показал, что содержание щелочной фосфатазы на маслоиндуцированной стороне было значительно выше, чем на неиндуцированной стороне. Результаты КПЦР показали, что экспрессия мРНК PRL-8-A-2, ALPL и IGFBP-1 в индуцированном роге была значительно выше, чем в неиндуцированном, что позволяет предположить, что масло может вызывать искусственную децентрализацию у мышей. Гомо-добавки - это длительный процесс, требующий особого внимания, загрязнение между гомосексуалистами, что является ключом к успеху.

На основе этой модели может быть выполнена инъекция аденовируса в рог матки, которая может изучить соответствующий механизм специфических молекул, регулирующих резидуализацию.