-1::1
Simple Hit Counter
Skip to content

Products

Solutions

×
×
Sign In

RU

EN - EnglishCN - 简体中文DE - DeutschES - EspañolKR - 한국어IT - ItalianoFR - FrançaisPT - Português do BrasilPL - PolskiHE - עִבְרִיתRU - РусскийJA - 日本語TR - TürkçeAR - العربية
Sign In Start Free Trial

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

Behavior
Biochemistry
Bioengineering
Biology
Cancer Research
Chemistry
Developmental Biology
View All
JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

Biological Techniques
Biology
Cancer Research
Immunology
Neuroscience
Microbiology
JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduate courses

Analytical Chemistry
Anatomy and Physiology
Biology
Calculus
Cell Biology
Chemistry
Civil Engineering
Electrical Engineering
View All
JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

Advanced Biology
Basic Biology
Chemistry
View All
JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

Biology
Chemistry

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

Accounting
Finance
Macroeconomics
Marketing
Microeconomics

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Authors

Teaching Faculty

Librarians

K12 Schools

Biopharma

Products

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduates

JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Solutions

Authors
Teaching Faculty
Librarians
K12 Schools
Biopharma

Language

ru_RU

EN

English

CN

简体中文

DE

Deutsch

ES

Español

KR

한국어

IT

Italiano

FR

Français

PT

Português do Brasil

PL

Polski

HE

עִבְרִית

RU

Русский

JA

日本語

TR

Türkçe

AR

العربية

    Menu

    JoVE Journal

    Behavior

    Biochemistry

    Bioengineering

    Biology

    Cancer Research

    Chemistry

    Developmental Biology

    Engineering

    Environment

    Genetics

    Immunology and Infection

    Medicine

    Neuroscience

    Menu

    JoVE Encyclopedia of Experiments

    Biological Techniques

    Biology

    Cancer Research

    Immunology

    Neuroscience

    Microbiology

    Menu

    JoVE Core

    Analytical Chemistry

    Anatomy and Physiology

    Biology

    Calculus

    Cell Biology

    Chemistry

    Civil Engineering

    Electrical Engineering

    Introduction to Psychology

    Mechanical Engineering

    Medical-Surgical Nursing

    View All

    Menu

    JoVE Science Education

    Advanced Biology

    Basic Biology

    Chemistry

    Clinical Skills

    Engineering

    Environmental Sciences

    Physics

    Psychology

    View All

    Menu

    JoVE Lab Manual

    Biology

    Chemistry

    Menu

    JoVE Business

    Accounting

    Finance

    Macroeconomics

    Marketing

    Microeconomics

Start Free Trial
Loading...
Home
JoVE Journal
Biology
Формирование, ограничение и наблюдение за активной нематитикой на основе микротрубочек
Формирование, ограничение и наблюдение за активной нематитикой на основе микротрубочек
JoVE Journal
Biology
This content is Free Access.
JoVE Journal Biology
Forming, Confining, and Observing Microtubule-Based Active Nematics

Формирование, ограничение и наблюдение за активной нематитикой на основе микротрубочек

Full Text
3,155 Views
08:37 min
January 13, 2023

DOI: 10.3791/64287-v

Fereshteh L. Memarian1, Dimitrius A. Khaladj1, Derek Hammar1, Linda S. Hirst1

1Department of Physics,University of California

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study focuses on the preparation and confinement of active nematics formed from microtubules and kinesin motors, contributing to advances in experimental techniques for studying complex fluid systems. The methods outlined simplify the approaches needed for newcomers in the field, enabling them to explore the dynamics of active materials more effectively.

Key Study Components

Research Area

  • Active Nematics
  • Nonlinear dynamics
  • Liquid crystal behavior

Background

  • Active nematics exhibit unique chaotic dynamics and topological defects.
  • Recent theoretical studies focus on the confinement of active nematics in microscale geometries.
  • Experimentalists have faced challenges in confining these materials effectively.

Methods Used

  • Construction of flow cells for confining active materials.
  • Utilization of microtubules and kinesin motors as the biological system.
  • Techniques for surface treatment and preparation of hydrophilic/hydrophobic supports.

Main Results

  • Successfully demonstrated the preparation of active nematic systems.
  • Identified a homogenous texture with mobile topological defects.
  • Validated imaging techniques for observing microtubule behavior.

Conclusions

  • This study offers a reproducible method for preparing active nematics.
  • The results enhance understanding of complex fluid behaviors in biological systems.

Frequently Asked Questions

What are active nematics?
Active nematics are complex fluids characterized by the continuous movement of particles driven by the active forces generated by motor proteins, leading to unique dynamical behaviors.
How do you prepare the hydrophilic cover slips?
Hydrophilic cover slips are prepared by cleaning with soapy water and ethanol, treating with a silane solution, and coating with an acrylamide solution.
What is the significance of using microtubules and kinesin motors?
Microtubules and kinesin motors serve as a model system for studying active matter, providing insights into the mechanics of biological processes at the microscale.
What imaging techniques are employed in this study?
Epi-fluorescence microscopy is used to visualize the behavior and dynamics of the confined active nematic layers.
Why is controlling the environment important for active nematics?
Control over the surrounding environment is crucial for directing the behavior of active nematics and studying their interactions under various conditions.
Can these methods be applied to other systems?
Yes, the techniques may be adapted for studying various types of active matter systems beyond nematics.

Здесь представлены методы получения активной нематики из микротрубочек и кинезиновых двигателей, включая подготовку и конструирование белка и использование скважин для активного нематического удержания.

Активная нематика стала захватывающей темой исследования, которая расширяет области нелинейной динамики и жидких кристаллов. Существуют сложные флюиды, которые демонстрируют смертные топологические дефекты и хаотическую динамику. В литературе есть много недавних теоретических исследований, посвященных ограниченной активной нематице.

Тем не менее, экспериментаторам было сложно ограничить материал микромасштабной геометрией. Наша техника делает экспериментальную установку более простой, чтобы новые группы могли войти в поле и попробовать эти захватывающие материалы. Методы могут быть применены к другим системам активной материи EQUIS, например, для формирования фазы, состоящей из эффектов, и по мере развития более активных фаз в будущем экспериментаторам необходимо выяснить способы ограничения материала с использованием аналогичной нематики.

Демонстрировать процедуру будут Дерек Хаммар и Фереште Мемарян, аспиранты моей лаборатории. Для приготовления гидрофильных покровных слипов с акриламидным покрытием начинают с тщательной очистки крышки мыльной водой, этанолом и 0,1 молярным гидроксидом натрия с чередующимися ополаскивателями с использованием нано чистой воды. После промывки покрытия крышка скользит раствором силана, состоящим из 100 миллилитров этанола, одного миллилитра аскетической кислоты и 500 микролитров триметоксисилилпропилметакрилата а в течение 15 минут.

Затем смойте нано чистой водой. Готовят акриламидный раствор из 95 миллилитров наночистой воды и пяти миллилитров 40 весового процента акриламида. Затем дегазировать раствор в течение 30 минут в вакуумной печи, добавить 0,07 г аммония на сульфит и 35 микролитров тетраметилэтилендиамина для конечной концентрации 2,3 миллимоляра.

Налейте раствор акриламида на крышку вверх и высиживайте в течение ночи при комнатной температуре. Для приготовления слайдов гидрофобного микроскопа пипетки составляет 100 микролитров водоотталкивающего раствора на предметном стекле стеклянного микроскопа. Затем поместите сверху еще одну чистую стеклянную горку.

Это обеспечивает равномерное покрытие водоотталкивающего раствора на поверхности, где он находится в течение двух минут. Удалите второй стеклянный слайд и тщательно промойте первый слайд наночистой водой. Затем высушите газообразным азотом.

Приготовьте смесь инженерного масла, которая включает в себя 1,8% фторсо-поверхностно-активного вещества. Соберите стеклянную горку и крышку с помощью двухсторонних клеевых распорок длиной 40 микрометров. Поместите распорки на расстоянии 1,5 миллиметра друг от друга на слайде гидрофобного микроскопа.

Затем поместите крышку с акриламидным покрытием поверх распорок обработанной стороной вниз, чтобы прилипнуть. После того, как проточная ячейка была построена, сразу же пипетка масляной смеси в проточную ячейку, заполняющую замкнутое пространство с помощью пипетки в отдельном флаконе, аккуратно смешайте шесть микролитров активного материала с 3,73 микролитрами смеси. Один микролитр раствора микротрубочек 0,6 микролитра раствора АТФ и 0,67 микролитра М двух В буферной пипетки шесть микролитров свежеперемешанного активного материала в один открытый конец проточной ячейки.

Некоторое количество масла будет вытеснено водным раствором при его введении в канал. Это можно сделать на противоположном конце проточного канала с помощью небольшого кусочка папиросной бумаги. После заполнения запечатайте обе стороны проточной ячейки эпоксидным клеем, который затвердевает при воздействии ультрафиолетового излучения в течение 20 секунд.

Ограничить активный слой между двумя допустимыми жидкостями в квази-2D-слой. Поместите проточную ячейку в центрифугу с качающимся ковшом с водной фазой сверху и более плотным масляным слоем под центрифугой при 212 G в течение 10 минут. После завершения этого этапа проточную клетку можно отвести в эпифлуоресцентный микроскоп для визуализации с объективом с увеличением 10 x или 20 x.

Во-первых, спроектируйте мастер-форму для PDMS. Это может быть достигнуто путем 3D-печати столбов на подложке. После 3D-печати смоляной формы очистите ее изопропанолом, а затем отвержьте форму под ультрафиолетовой лампой в течение 45 минут и в духовке при 120 градусах Цельсия в течение двух часов, приготовьте поликрасительный метилциан с использованием эластомера и эластомерной основы.

Смешайте два компонента в соотношении 1 к 10 с помощью металлического шпателя. Чтобы удалить эти пузырьки, поместите смесь под вакуум для дегазации в течение одного часа, после чего неотвержденная PDMS должна казаться прозрачной. Вылейте PDMS в подходящую форму и оставьте на ночь, чтобы вылечить при 60 градусах Цельсия.

Для приготовления гидрофильной поверхности PDMS очистите PDMS в течение 10 минут как этанолом, так и изопропанолом, затем тщательно промойте деионизированной водой три раза и высушите. Используйте плазменный очиститель в течение пяти минут, чтобы очистить сухую отвержденную PDMS. Это делает поверхность более гидрофильной.

Затем подготовьте силановый раствор и погрузите подложку в этот раствор на 15 минут, чтобы подготовить акриламидное покрытие, тщательно промойте подложку деионизированной водой и погрузите в раствор акриламида. Когда поверхность будет готова к использованию, промойте ее деионизированной водой и высушите азотом для немедленного использования. Прикрепите PDMS к стеклянному слайду с эпоксидным клеем, нанесите один микролитр активной смеси на подложку PDMs и немедленно добавьте силиконовое масло поверх активной сетевой капли.

Активная сеть переместится в колодец. Этот процесс занимает до 60 минут. Поместите устройство PDMS в центрифугу с качающимся ведром с масляным слоем над слоем воды и вращайте в течение 12 минут при 212 G. После завершения этого шага отнесите материал в микроскоп для записи прогресса материала.

Как это уравновешивает. На репрезентативном изображении изображены короткие микротрубочки одинаковой длины. Отдельные микротрубочки могут быть сложными для изображения из-за их небольшого размера.

Использование высокочувствительной камеры, предназначенной для флуоресцентной микроскопии, лучше всего подходит для этого применения. Хорошо сформированный активный пневматический слой однородный по текстуре без значительных пустот и наличия подвижных топологических дефектов. Обратите внимание, однако, что в дефектных сердечниках могут быть некоторые приемлемые небольшие пустоты.

Правильная обработка поверхности должна иметь гидрофильную или гидрофобную поверхность. С помощью этого метода можно легко обсудить геометрию рулона, а активную структуру можно контролировать, только изменяя физическое удержание.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

Sign In Start Free Trial

Explore More Videos

Биология выпуск 191

Related Videos

Подготовка сегментированных микротрубочек исследовать движение приводится в действие разборки микротрубочек Ends

12:20

Подготовка сегментированных микротрубочек исследовать движение приводится в действие разборки микротрубочек Ends

Related Videos

14.9K Views

Контроль скорости потока microtubule основе 3D активных жидкостей с использованием температуры

08:04

Контроль скорости потока microtubule основе 3D активных жидкостей с использованием температуры

Related Videos

7.6K Views

In vivo Оценка динамики и ориентации микротрубочек в нейронах Caenorhabditis elegans

07:43

In vivo Оценка динамики и ориентации микротрубочек в нейронах Caenorhabditis elegans

Related Videos

3.5K Views

Одновременная визуализация динамики сшитых и одиночных микротрубочек in vitro методом TIRF-микроскопии

07:20

Одновременная визуализация динамики сшитых и одиночных микротрубочек in vitro методом TIRF-микроскопии

Related Videos

3K Views

Непосредственное измерение сил в восстановленных активных пучках микротрубочек

07:47

Непосредственное измерение сил в восстановленных активных пучках микротрубочек

Related Videos

1.9K Views

Использование микрофлюидики и флуоресцентной микроскопии для изучения динамики сборки одноактиновых нитей и пучков

08:02

Использование микрофлюидики и флуоресцентной микроскопии для изучения динамики сборки одноактиновых нитей и пучков

Related Videos

3.1K Views

Самостоятельная сборка тактоидов микротрубочек

08:49

Самостоятельная сборка тактоидов микротрубочек

Related Videos

4.5K Views

Восстановление и характеристика актин-микротрубочных композитов с перестраиваемой динамикой и механикой с приводом от двигателя

09:10

Восстановление и характеристика актин-микротрубочных композитов с перестраиваемой динамикой и механикой с приводом от двигателя

Related Videos

3.8K Views

Механика (поро-)эластичных сократительных сетей актомиозина как модельная система клеточного цитоскелета

08:50

Механика (поро-)эластичных сократительных сетей актомиозина как модельная система клеточного цитоскелета

Related Videos

1.2K Views

Настройка режимов сократимости и деформации активных сборок на основе актина in vitro: от двумерных активных сетей до жидкокристаллических капель

06:48

Настройка режимов сократимости и деформации активных сборок на основе актина in vitro: от двумерных активных сетей до жидкокристаллических капель

Related Videos

877 Views

JoVE logo
Contact Us Recommend to Library
Research
  • JoVE Journal
  • JoVE Encyclopedia of Experiments
  • JoVE Visualize
Business
  • JoVE Business
Education
  • JoVE Core
  • JoVE Science Education
  • JoVE Lab Manual
  • JoVE Quizzes
Solutions
  • Authors
  • Teaching Faculty
  • Librarians
  • K12 Schools
  • Biopharma
About JoVE
  • Overview
  • Leadership
Others
  • JoVE Newsletters
  • JoVE Help Center
  • Blogs
  • JoVE Newsroom
  • Site Maps
Contact Us Recommend to Library
JoVE logo

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. All rights reserved

Privacy Terms of Use Policies
WeChat QR code