Система Zerio Tol2: модульный и гибкий подход к трансгенезу на основе шлюза

Трансгенные рыбки данио-рерио оказались критически важными для нашего понимания развития эмбриона. Система Tol2 является универсальным инструментом, который позволяет исследователям быстро и систематически генерировать несколько трансгенных рыбок данио-рерио для исследований FASD. Модульная конструкция и простота создания новых компонентов набора делают систему Tol2 универсальным инструментом для создания новых трансгенных препаратов без необходимости переделывать какие-либо компоненты набора.

Мой совет исследователям, впервые применяющим эту технику, состоит в том, чтобы сделать несколько пробных запусков, чтобы потренироваться на точности создания и введения трансгенных конструкций. Для начала линеаризуют плазмиду набора Tol2, содержащую транспозазу, с нулевой эндонуклеазой рестрикции, объединив 10 микролитров плазмиды транспозазы, 1,5 микролитра рестрикционного реакционного буфера эндонуклеазы и 0,3 микролитра нуклеазы одной эндонуклеазы в микроцентрифужной пробирке объемом 500 микролитров. Залейте реакцию до 20 микролитров водой, не содержащей РНК.