Инфекция первичных эпителиальных клеток носа, выращенных на границе воздух-жидкость, для характеристики взаимодействия коронавируса человека с хозяином

Описанные здесь протоколы затрагивают такие ключевые вопросы, как кинетика репликации, тропизм клеток хозяина, индукция врожденного иммунитета и индукция цитотоксичности в носовом эпителии при инфицировании коронавирусами человека. Этот протокол позволяет изучать взаимодействие человека с коронавирусом хозяина в органоидном микроокружении, которое точно повторяет особенности носового эпителия in vivo, включая его гетерогенную клеточную популяцию и мукоцилиарные функции. Этот метод может быть применен к другим культуральным системам ОПЛ, таким как системы, полученные из нижних дыхательных путей.

Кроме того, система может быть использована для имитации клинических состояний заболевания, таких как астматические или муковисцидозные дыхательные пути. Выращивание и дифференциация носового воздушно-жидкостного интерфейса, или культур ALI, у трансвеллов, имеющих базальную и апикальную камеры. Расширьте диссоциированные синоназальные клетки человека в погруженном состоянии, после чего удалите среду из апикальной камеры, чтобы обеспечить дифференцировку культур на границе между воздухом и жидкостью.