17 марта 2023 г.
В этом протоколе описывается метод генерации цибрид из раковых клеток, растущих в суспензии, в качестве инструмента для изучения роли митохондрий в онкогенном процессе.
Это исследование направлено на то, чтобы лучше понять вклад митохондрий в прогрессирование рака и метастазирование. Генерация трансмитохондриальных цибридов может помочь нам выяснить, как и на каком уровне митохондриальные генотипы участвуют в агрессивности опухолевой клетки. Одной из технологий получения информации о роли митохондрий в раке является генерация цибридов.
Мы комбинируем этот инструмент с множеством других методов, которые включают донорский электрофорез, анализ дыхания и другие митохондриальные функциональные анализы, проточную цитометрию, протеомику и так далее. Пластичность раковых клеток вместе с сетями взаимодействия между ядерными и митохондриальными генами увеличивает сложность наших экспериментов и интерпретации данных. Это одна из причин, почему необходимо разрабатывать новые экспериментальные подходы.
Одним из самых захватывающих результатов нашего исследования стало открытие двух мутаций митохондриальной ДНК, связанных с отрывом клеток от игровой тарелки, напоминающих генерацию метастазов и делающих клетки полностью зависимыми от аэробного гликолиза, а также делающих их более онкогенными и метастатическими в моделях in vivo. Этот протокол обмена митохондриями может быть применен к суспензии растущих раковых клеток. Хронология может преодолеть ограничения традиционных подходов, где процесс зарождения и полное удаление митохондриальной ДНК из клеточных линий митохондрий-реципиентов часто становятся реальной проблемой.
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео
This protocol describes a technique for cybrid generation from suspension-growing cancer cells as a tool to study the role of mitochondria in the tumorigenic process. The research aims to elucidate how mitochondrial genotypes contribute to cancer progression and metastasis.