3D-культивирование органоидов из крипт кишечника мышей и одной стволовой клетки для исследования органоидов

Наши исследования сосредоточены на биологии стволовых клеток, особенно кишечных стволовых клеток, присутствующих на дне кишечной крипты. Цель состоит в том, чтобы ответить, как гомеостаз поддерживается стволовыми клетками в кишечнике. Эта 3D-культура органов, полученная из стволовых клеток кишечника, является мощным инструментом для изучения пролиферации, дифференцировки и поддержания стволовых клеток.

Органная технология помогает культивированию стволовых клеток кишечника в течение длительного времени, сохраняя потенциал самообновления и дифференцировки. Органоид широко используется для фундаментальных и трансляционных исследований хрупкости кишечника и хрупкости в прошлом. Наша текущая задача состоит в том, чтобы понять коронарную систему, участвующую в эпителиальных клетках кишечника и стволовых клетках.

Понимание биологических процессов, запускаемых объективным клонированием, имеет ключевое значение. Одним из наших важных открытий является то, что передача сигналов посредством клонирования поддерживает гомеостаз роста и дифференцировки эпителия кишечника. Наш протокол описывает метод последовательной изоляции крипт тонкой кишки и последующего культивирования 3D-органоидов для улучшения скорости высвобождения криптала.

Мы устанавливаем метод механической изоляции, включающий энергичное встряхивание, после обработки ЭДТА. ЭДТА и механическая диссоциация могут быть объединены для повышения выхода крипты. Кроме того, надлежащий навык может свести заражение вирусами к минимуму, увеличив количество крипт.

Наши результаты свидетельствуют о том, что передача сигналов через мышечные рецепторы и рецепторы организма, по-видимому, работают вместе, чтобы поддерживать гомеостаз роста и дифференцировки эпителия кишечника. Это побуждает нас выдвинуть гипотезу о том, что ненейрокоронарно-артериальная система играет важную роль в умеренности ниши кишечных стволовых клеток.