Unique Approach for Isolating Rat Bone Marrow Neutrophils with Comparable Capacity

Xiangfeng Gong; Yutao Sun; Xiaoxin Zhang; Zhenghua Xiao; Li He; Chaoyi Qin

doi:10.3791/65506

Уникальный подход к выделению нейтрофилов костного мозга крыс с сопоставимой емкостью

JoVE Journal
Biology

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Biology

Unique Approach for Isolating Rat Bone Marrow Neutrophils with Comparable Capacity

Уникальный подход к выделению нейтрофилов костного мозга крыс с сопоставимой емкостью

Full Text

2,758 Views

08:56 min

April 26, 2024

DOI: 10.3791/65506-v

Xiangfeng Gong*¹, Yutao Sun*¹, Xiaoxin Zhang^2,3, Zhenghua Xiao^1,4, Li He^1,4, Chaoyi Qin^1,4

¹Department of Cardiovascular Surgery, West China Hospital,Sichuan University, ²Department of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine, Sichuan Provincial Pancreatitis Centre, West China Hospital,Sichuan University, ³West China-Liverpool Biomedical Research Centre, West China Hospital,Sichuan University, ⁴Cardiovascular Surgery Research Laboratory, West China Hospital,Sichuan University

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This research investigates methods for isolating neutrophil extracellular traps (NETs) from rat bone marrow, comparing two distinct techniques. The study shows that both methods yield functional NETs, with the bone marrow-derived neutrophils demonstrating superior isolation efficiency compared to those from peripheral blood.

Key Study Components

Research Area

Neutrophil biology
Extracellular traps
Bone marrow immunology

Background

Importance of neutrophils in immune response
Neutrophil extracellular traps (NETs) and their biological functions
Prior limitations in isolation techniques from peripheral blood

Methods Used

Isolation using density gradient centrifugation
Use of commercial neutrophil isolation kits
Assessment of cell purity and viability

Main Results

Increased yield and purity of neutrophils from bone marrow
Functional integrity of NETs isolated from bone marrow-derived neutrophils
Enhanced experimental accuracy for NET-related studies

Conclusions

The study presents a reliable method for isolating high-yield NETs from rat bone marrow.
It emphasizes the relevance of using bone marrow over peripheral blood for immunological research.

Frequently Asked Questions

What are neutrophil extracellular traps (NETs)?

NETs are web-like structures released by neutrophils that trap pathogens and prevent their spread.

Why is bone marrow a better source for neutrophils than peripheral blood?

Bone marrow provides a higher yield and purity of neutrophils, enhancing the study of immune responses.

What is density gradient centrifugation?

A method used to separate cells based on their density, allowing for the isolation of specific cell types.

How were NETs isolated in this study?

NETs were isolated following neutrophil activation and subsequent cell lysis using specialized buffers and centrifugation.

What implications does this research have for studying immune diseases?

The optimized isolation techniques can improve models for exploring neutrophil behavior in various inflammatory conditions.

What are the benefits of using commercial neutrophil isolation kits?

These kits streamline the isolation process and can enhance the purity and functionality of neutrophils.

В этом исследовании описаны два метода выделения многочисленных внеклеточных ловушек нейтрофилов (НВЛ) из костного мозга крысы. Один метод сочетает в себе коммерческий набор для выделения нейтрофилов с центрифугированием с градиентом плотности, в то время как другой использует только центрифугирование с градиентом плотности. Оба подхода дают функциональные НВЛ, превосходящие таковые из нейтрофилов периферической крови.

Разработан метод выделения нейтрофилов крыс с последующим выделением НВЛ. Этот метод позволяет оптимизировать доступность для проведения экспериментов, связанных с НВЛ, как на крысах, так и на клеточных линиях, полученных от крыс. В нашем исследовании мы провели сравнение нейтрофилов, которые были выделены из периферической крови и нитей костного мозга.

Наши результаты подчеркивают превосходство нейтрофилов костного мозга, демонстрируя существенное численное преимущество в подсчете изолированных нейтрофилов наряду с их профессиональной способностью к синхронизации. Наш метод выделения нейтрофилов и НВЛ крыс на основе костного мозга заполняет пробел в исследованиях, оптимизируя методы выделения этих типов клеток. В отличие от предыдущих методов, которые в основном использовали периферическую кровь, наш протокол нацелен на костный мозг, увеличивая количество нейтрофилов при больших выходах и предлагая более точную модель крыс для изучения нейтрофилов и биологии крыс.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos