Уникальный подход к выделению нейтрофилов костного мозга крыс с сопоставимой емкостью
April 26th, 2024
В этом исследовании описаны два метода выделения многочисленных внеклеточных ловушек нейтрофилов (НВЛ) из костного мозга крысы. Один метод сочетает в себе коммерческий набор для выделения нейтрофилов с центрифугированием с градиентом плотности, в то время как другой использует только центрифугирование с градиентом плотности. Оба подхода дают функциональные НВЛ, превосходящие таковые из нейтрофилов периферической крови.
Разработан метод выделения нейтрофилов крыс с последующим выделением НВЛ. Этот метод позволяет оптимизировать доступность для проведения экспериментов, связанных с НВЛ, как на крысах, так и на клеточных линиях, полученных от крыс. В нашем исследовании мы провели сравнение нейтрофилов, которые были выделены из периферической крови и нитей костного мозга.
Наши результаты подчеркивают превосходство нейтрофилов костного мозга, демонстрируя существенное численное преимущество в подсчете изолированных нейтрофилов наряду с их профессиональной способностью к синхронизации. Наш метод выделения нейтрофилов и НВЛ крыс на основе костного мозга заполняет пробел в исследованиях, оптимизируя методы выделения этих типов клеток. В отличие от предыдущих методов, которые в основном использовали периферическую кровь, наш протокол нацелен на костный мозг, увеличивая количество нейтрофилов при больших выходах и предлагая более точную модель крыс для изучения нейтрофилов и биологии крыс.
Обзор
Это исследование изучает методы изоляции внеклеточных ловушек нейтрофилов (ВЛН) из костного мозга крыс, сравнивая два различных метода. Исследование показывает, что оба метода дают функциональные ВЛН, при этом нейтрофилы, полученные из костного мозга, демонстрируют более высокую эффективность изоляции по сравнению с теми, что из периферической крови.
Ключевые компоненты исследования
Область исследования
- Биология нейтрофилов
- Внеклеточные ловушки
- Иммунология костного мозга
Фон
- Значимость нейтрофилов в иммунном ответе
- Внеклеточные ловушки нейтрофилов (ВЛН) и их биологические функции
- Предыдущие ограничения в методах изоляции из периферической крови
Используемые методы
- Изоляция с использованием центрифугирования по плотности градиента
- Использование коммерческих наборов для изоляции нейтрофилов
- Оценка чистоты и жизнеспособности клеток
Основные результаты
- Повышенный выход и чистота нейтрофилов из костного мозга
- Функциональная целостность ВЛН, изолированных из нейтрофилов, полученных из костного мозга
- Повышенная точность эксперимента для исследований, связанных с ВЛН
Выводы
- Исследование представляет надежный метод изоляции ВЛН с высоким выходом из костного мозга крыс.
- Оно подчеркивает важность использования костного мозга вместо периферической крови для иммунологических исследований.
Часто задаваемые вопросы
Chapters in this video
0:00
Introduction
1:24
One and Two‐Step Method of Rat Neutrophil Isolation for Harvesting Neutrophil Extracellular Traps (NETs)
4:20
Acquisition and Verification of Rat Neutrophil Extracellular Traps (NETs)
6:52
Fluorometric Quantification and Cytometric Analysis of Rat Neutrophil Extracellular Traps (NETs)
