Оптимизированный подход к прижизненной визуализации для долгосрочного мониторинга динамики эпителиальных тканей на инвертированном конфокальном микроскопе
June 30th, 2023
Протокол представляет собой новый инструмент для упрощения прижизненной визуализации с помощью инвертированной конфокальной микроскопии.
Мы разработали инструмент для проведения прижизненной визуализации на живых мышах с помощью инвертированного конфокального микроскопа. Это позволяет нам отслеживать динамику клеток кожи на протяжении всего гомеостаза и сравнивать поведение клеток во время начала и прогрессирования заболевания. Многофотонная микроскопия является основным подходом, применяемым для прижизненного отслеживания клеток.
Однако к недостаткам этих микроскопов относятся ограниченная универсальность повседневной визуализации, высокая стоимость и техническая сложность. Наш новый инструмент позволяет использовать универсальные инвертированные конфокальные микроскопы для прижизненной визуализации in vivo. Изменяя файл проекта, размеры вставки предметного столика можно настроить в соответствии с любой маркой инвертированного микроскопа.
Размер и положение отверстия объектива могут быть изменены в соответствии с любой моделью животного и тканью по вашему выбору.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Обзор
Это исследование представляет новый инструмент для выполнения интравитальной визуализации с использованием инвертированной конфокальной микроскопии у живых мышей, что позволяет исследователям отслеживать динамику клеток кожи во время гомеостаза и прогрессирования заболевания. Новый инструмент устраняет ограничения многофотонной микроскопии, делая интравитальную визуализацию более доступной и универсальной.
Ключевые компоненты исследования
Область исследования
- Интравитальная визуализация
- Динамика клеток кожи
- Методы микроскопии
Фон
- Текущие ограничения многофотонной микроскопии включают высокую стоимость и техническую сложность.
- Инвертированные конфокальные микроскопы предлагают универсальные возможности визуализации для живых тканей.
- Индивидуальный дизайн позволяет адаптировать инструмент к различным моделям животных.
Использованные методы
- Инвертированная конфокальная микроскопия с настраиваемыми 3D-печатаемыми вставками
- Живые мыши как биологическая система
- Настраиваемая конфигурация визуализации для различных тканей
Основные результаты
- Успешное получение Z-stacks флуоресцентно помеченной ткани уха с минимальной дрейфом.
- Непрерывная визуализация клеток кожи (положительные mCherry и GFP) в течение длительного времени.
- Подтверждена эффективность 3D-печатаемых вставок для интравитальной визуализации для стабильной съемки.
Выводы
- Это исследование демонстрирует инновационный подход к улучшению возможностей интравитальной визуализации.
- Инструмент усиливает способность исследовать клеточную динамику в живых моделях, продвигая исследования в области клеточной биологии.
