Модифицированный матричный гель-пробка in vivo для исследований ангиогенеза
30 июня 2023 г.
Представленный здесь метод позволяет оценить влияние реагентов на ангиогенез или проницаемость сосудов in vivo без окрашивания. Метод использует инъекцию декстрана-FITC через хвостовую вену для визуализации неососудов или сосудистой утечки.
Наши исследования посвящены ангиогенезу, процессу образования новых сосудов из ранее существовавших. Он играет важнейшую роль во многих физиологических и патологических процессах, таких как эмбриональное развитие или лечение атеросклероза, развитие опухолей и т.д. Построение надежной модели для оценки степени ангиогенеза имеет решающее значение для исследований миокарда или открытия лекарств для лечения заболеваний, зависящих от ангиогенеза.
Однако большинство существующих моделей сложны, дороги и требуют специализированного оборудования. Здесь мы представляем модифицированный матричный гель-пробка, который может быть использован для исследования ангиогенеза и проницаемости сосудов без окрашивания простым, интуитивно понятным и эффективным способом.
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео
Обзор
В данном исследовании изучается ангиогенез — процесс образования новых кровеносных сосудов — с использованием модифицированного метода анализа с матриксными гелевыми пробками. Этот метод позволяет оценивать влияние реагентов на ангиогенез и проницаемость сосудов in vivo без применения окрашивания.
Основные компоненты исследования
Область исследований
- Ангиогенез
- Сосудистая проницаемость
- Методы in vivo
Теоретическая часть
- Ангиогенез играет ключевую роль в различных физиологических и патологических процессах.
- Существующие модели для изучения ангиогенеза часто сложны и дорогостоящи.
- Необходима более простая и эффективная модель для оценки ангиогенеза и проницаемости сосудов.
Используемые методы
- Модифицированный анализ с использованием матриксных гелевых столбиков
- Мышиная модель для исследований in vivo
- Инъекция декстрана-FITC для визуализации новообразованных сосудов
Основные результаты
- Метод позволил эффективно визуализировать новообразованные сосуды и утечку из сосудов без необходимости окрашивания.
- Была продемонстрирована возможность оценки ангиогенеза с использованием простого и интуитивно понятного подхода.
- Исследование подтверждает применимость данного метода для дальнейших изысканий.
Выводы
- В данном исследовании представлен новый метод оценки ангиогенеза и сосудистой проницаемости.
- Этот метод может значительно продвинуть исследования заболеваний, зависящих от ангиогенеза.
Часто задаваемые вопросы
Практическая значимость для отрасли
Количественная оценка ангиогенеза in vivo является критическим этапом валидации мишеней и ранних стадий разработки лекарственных препаратов в рамках программ по изучению сосудистых заболеваний и онкологии. Модифицированный метод анализа с использованием матриксных гелевых имплантатов позволяет напрямую измерять формирование сосудов и их проницаемость, что обеспечивает прогностическую достоверность и снижение механистических рисков при разработке терапевтических средств, модулирующих ангиогенез. Данный оптимизированный рабочий процесс снижает операционную сложность, способствуя более широкому внедрению метода и обеспечению сопоставимости результатов между различными программами в рамках корпоративных исследований и разработок.
Стратегическое применение в биофармацевтических исследованиях и разработках
Первичное обнаружение и валидация мишени
- Позволяет напрямую проверять про- и антиангиогенные гипотезы в физиологически релевантных условиях in vivo.
- Обеспечивает функциональную валидацию мишеней путем количественного определения образования новых сосудов и изменений проницаемости.
- Способствует механистическому снижению рисков путем изоляции эффектов исследуемых реагентов на сосудистые конечные точки.
- Предоставляет количественные данные для принятия решений по сортировке и приоритизации портфеля препаратов.
Скрининг и разработка анализа
- Обеспечивает воспроизводимую и масштабируемую платформу для оценки влияния соединений на ангиогенез in vivo.
- Стандартизирует количественные показатели, используя декстран-FITC для определения длины и проницаемости сосудов.
- Снижает сложность анализа за счет исключения необходимости окрашивания, что повышает пропускную способность и надежность.
- Обеспечивает готовность к скринингу различных классов реагентов, воздействующих на биологию сосудов.
Трансляционные и доклинические исследования
- Сопоставляет показатели in vivo с конечными точками, значимыми для заболевания, для разработки трансляционных биомаркеров.
- Обеспечивает преемственность от этапа раннего поиска до доклинической валидации агентов, модулирующих ангиогенез.
- Предоставляет скорректированные с учетом рисков данные для принятия решений о дальнейшем продвижении терапевтических средств, нацеленных на сосуды.
- Повышает прогностическую ценность последующих исследований эффективности и безопасности.
Интеграция конвейеров и рабочих процессов
Данный анализ служит связующим звеном между этапами раннего поиска и доклинических исследований, предоставляя количественную платформу in vivo для оценки ангиогенеза, что способствует идентификации ведущих соединений и подтверждению механизмов их действия.
- Открытия в биологии: позволяет проверять гипотезы и уточнять сигнальные пути для мишеней ангиогенеза.
- Скрининг: обеспечивает стандартизированные и воспроизводимые результаты для оценки соединений.
- Аналитика: позволяет количественно определить длину сосудов и проницаемость с помощью dextran-FITC, что способствует проведению сравнительного анализа.
- Трансляционные исследования: согласуется с релевантными для заболевания конечными точками сосудистых реакций для обеспечения преемственности биомаркеров.
- Корпоративное повторное использование: представляет собой многократно используемую, адаптируемую платформу для различных программ, ориентированных на ангиогенез.
Операционное и корпоративное воздействие
- Научная ценность: повышает достоверность прогнозов и снижает механистическую неопределенность в исследованиях ангиогенеза.
- Операционная ценность: оптимизирует рабочие процессы за счет стандартизации и исключает этапы окрашивания.
- Стратегическая ценность: повышает качество принятия решений о целесообразности дальнейшей разработки (go/no-go) и эффективность использования капитала за счет получения надежных количественных данных.
- Влияние на портфель: позволяет осуществлять приоритизацию и продвижение активов, нацеленных на сосудистую систему, с учетом рисков.
Особенности реализации
- Требуется опыт работы с мышами in vivo и владение техникой подкожных инъекций.
- Необходим доступ к инфраструктуре флуоресцентной визуализации для детектирования декстрана-FITC.
- Требуется стандартизация протоколов приготовления матриксного геля и количественного анализа между исследовательскими группами.
- Метод может быть адаптирован для различных типов сосудистых клеток и классов реагентов, предусмотренных протоколом.
- Применимость ограничена моделями мелких животных; может потребоваться оптимизация для других видов или контекстов заболеваний.
Часто задаваемые вопросы по биофармацевтике
Chapters in this video
0:00
Introduction
0:59
Preparing Vascular Cells for In Vivo Matrix Gel Plug Assay
3:20
Preparing Matrix Gel with Vascular Cells for In Vivo Matrix Gel Plug Assay
5:04
Matrix Gel Mixture Injection into Mouse for Matrix Gel Plug Assay
6:46
Dextran‐FITC Injection and Matrix Gel Plug Collection from Mouse for Matrix Gel Plug Assay
