ПЦР с блокированием дикого типа в сочетании с секвенированием по Сэнгеру для выявления низкочастотных соматических мутаций

В данной статье представлено применение метода низкочастотного детектирования, основанного на секвенировании по Сэнгеру при ангиоиммунобластной лимфоме. Дают основание для применения данного метода при других заболеваниях.

Мы заинтересованы в понимании низкочастотных соматических мутаций в раковых тканях. В данной статье представлено применение метода обнаружения низкочастотных мутаций на основе нашего теста на ангиоиммунобластную лимфому по методу Сэнгера, что дает основу для применения этого метода к другим тестам на заболевания. В настоящее время существуют методы обнаружения низкочастотных мутаций, такие как количественная ПЦР, цифровая ПЦР и NGS.

Но нет никаких сообщений об обнаружении низкочастотной мутации IGHV7-3 на основе секвенирования по Сэнгеру, из которых предел обнаружения составляет всего от 5% до 20%. Как правило, из-за технических ограничений обнаружение низкой частоты на основе секвенирования по Сэнгеру не может быть точно количественно определено. Наш метод отличается высокой чувствительностью, низкой стоимостью и большой гибкостью, что делает его идеальным выбором для обнаружения низкочастотных мутаций. Мы планируем разработать псевдогенные праймеры, а также мультиплексные праймеры GCR для изучения их применения при заболеваниях крови.